食品安全国家标准 食品中9种抗氧化剂的测定 GB 5009.32-2016.pdf

GB5009.32-20165.2测定步骤5.2.1提取5.2.1.1固体类样品：称取1g(精确至0.01g)试样(5.1)于50mL离心管中，加人5mL乙腈饱和的正己烷溶液，涡旋1min充分混匀，浸泡10min。加入5mL饱和氯化纳溶液，用5mL正己烷饱和的乙腈溶液涡旋2min,3000r/min离心5min,收集乙腈层于试管中，再重复使用5mL正己烷饱和的乙腈溶液提取2次，合并3次提取液，加0,1%甲後溶液调节DH=4,待净化。同时做空白试验。5.2.1,2油类：称取1g(精确至0.01g)试样(5.1)于50mL离心管中，加人5mL乙腈饱和的正己烷溶液溶解样品，涡旋1min,静置10min,用5mL正己烷饱和的乙腈溶液涡旋提取2min,3000r/min离心5mi,收集乙腈层于试管中，再重复使用5mL正己烷饱和的乙腈溶液提取2次，合并3次提取液，待净化。同时做空白试验。5.2.2净化在Cs固相萃取柱中装入约2g的无水硫酸钠，用5mL甲醇活化萃取柱，再以5l乙腈平衡萃取柱，弃去流出液。将所有提取液(5.2.1)倾入柱中，弃去流出液，再以5mL乙脂和甲醇的混合溶液洗脱，收集所有洗脱液于试管中，40下旋转蒸发至干，加2mL乙腈定容，过0.22m有机系滤膜，供液相色谱测定。5.2.3凝胶渗透色谱法（纯油类样品可选）称取样品(5.1)10g(精确至0.01g)于100mL容量瓶中，以乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容至刻度，作为母液；取5mL母液于10mL容量瓶中以乙酸乙酯和环己烷混合溶液定容至刻度，待净化。取10mL待测液加入凝胶渗透色谱(GPC)进样管中，使用GP净化（凝胶渗透色谱净化条件见附录B),收集流出液，40下旋转蒸发至干，加2mL乙睛定容，过0.22mm有机系滤膜，供液相色谱测定。同时做空白试验。5.3液相色谱仪条件a)色谱柱：Cs柱，柱长250mm,内径4.6mm,粒径5m,或等效色谱柱：b)流动相A:0.5%甲酸水溶液，流动相B:甲醇；c)洗脱梯度：05min流动相(A)50%,5min15min:流动相(A)从50%降至20%，15min20min流动相(A)20%,20min25min:流动相(A)从20%降至10%，25min27min:流动相(A)从10%增至50%，27min30min:流动相(A)50%；d)柱温：35；c)进样量：5L)检测波长：280nm。5.4标准曲线的制作将系列浓度的标准工作液分别注入液相色普仪中，测定相应的抗氧化剂，以标准工作液的浓度为横坐标，以响应值（如：峰面积、峰高、吸收值等）为纵坐标，绘制标准曲线。9种抗氧化剂标准液相色谱图见附录C。5.5试样溶液的测定将试样溶液注入高效液相色谱仪中，得到相应色谱峰的响应值，根据标准曲线得到待测液中抗氧化