食品安全国家标准 食品中伏马毒素的测定 GB 5009.240-2016.pdf

GB5009.240-2016为试样，分别装入洁净的容器内，密封，标识后置于4下避光保存。玉米油样品直接取2份作为试样，分别装人洁净的容器内，密封，标识后置于4下避光保存。在制样的操作过程中，应防止样品受到污染或发生残留物含量的变化。5.2试样提取准确称取固体样品5g(精确至0.01g)样品于50mL高心管中，加人20mL乙腈-水溶液(3.2.2)，涡旋或振荡提取20min,取出后，在4000r/min下离心5min,将上清液转移至另一高心管中。玉米油样品操作同固体样品，提取液在下层。5.3试样净化取2mL提取液，加入47mL吐温-20/PBS溶液(3.2.7)，混合均匀后过免疫亲和柱，流速控制在1mL/min3mL/min,用10 mL PBS缓冲液淋洗免疫亲和柱，分别用1mL甲醇-乙酸溶液(3.2.4)洗脱免疫亲和柱三次，收集洗脱液，55下氨吹至干，加入1mL乙腈-水溶液(3.2.3)溶解残我渣。涡旋30s,过0.45m微孔滤膜后，收集于进样瓶中，待测。注：由于不同厂商提供的免疫亲和柱操作程序可能不同，实际操作时，请参照厂商提供的操作说明和程序使用，5.4仪器参考条件色谱柱：Cs色谱柱：250mm4.6mm,5m,或相当者，检测波长：激发波长335nm:发射波长440nm。流动相：A:甲酸水溶液(3.2.1)；B:甲醇。梯度洗脱，洗脱程序见表1。流动相流速：0.8mL/min。衍生液流速：0.4mL/min。柱温：40。反应器温度：40。进样量：50L。表1流动相洗脱程序时间流动相A流动相Bmin%0.0045.055.02.0045.055.09.0030.070.014.0010.090.014.5010.090.015.0045.055.022.0045.055.05.5试样溶液的测定在5.4项色谱条件下，将50.0L系列伏马毒素混合标准工作溶液(3.4.3)按浓度从低到高依次注入高效液相色谱仪：待仪器条件稳定后，以目标物质的浓度为横坐标(x轴)，目标物质的峰面积为纵坐标(y轴)，对各个数据点进行最小二乘线性拟合，标准工作曲线按式(1)计算：3