食品安全国家标准 水产品中阿维菌素和伊维菌素多残留的测定 高效液相色谱法 GB 29695-2013.pdf

GB29695-2013一次，合并两次提取液。在提取液中加正己烷10mL,充分涡旋混合1min,4000r/min离心5min,弃上层正己烷层。提取液中再加正己烷10mL,重复提取一次，弃正己烷层，备用。7.3净化取备用液，依次过用乙腈10mL活化的无水硫酸钠柱和碱性氧化铝固相萃取柱，收集滤液。待滤液流至将尽，用乙脂10L冲洗离心管，转至无水硫酸钠柱和减性氧化铝固相萃取柱，吹干，合并滤液于茄形瓶中，于4050旋转蒸发至干。用乙腈3mL分2次溶解残余物，并转至5mL具塞玻璃离心管中，4555水浴氨气吹干。7.4衍生化于上述5mL离心管中加衍生化试剂A100L,盖紧塞子，旋涡混合30s,再加衍生化试剂B150L,盖紧塞子，旋涡混合30s,密封避光，室温下衍生15mi,加甲醇750L,旋涡混合308，过滤，供高效液相色谱测定。7.5测定7.5.1色谱条件7.5.1.1色谱柱：C1s(250mm4.6mm,粒径5m),或相当者。7.5.1.2流速：1.5mL/min。7.5.1.3进样量：20L。7.5.1.4柱温：35。7.5.1.5检测器：激发波长365nm,发射波长475nm。7.5.1.6洗脱梯度见表1。表1洗脱梯度表时间甲醇乙腈0.4%乙酸min%03955133955154555025395567.5.2测定法取试样溶液和相应的标准溶液，作单点或多点校准，按外标法，以峰面积计算。标准溶液及试样溶液中阿维菌素和伊维菌素响应值应在仪器检测的线性范围之内。在上述色谱条件下，标准溶液和空白添加试样溶液的高效液相色谱图见附录A。7.6空白实验除不加试料外，采用完全相同的步骤进行平行操作。3