显性致死试验 GB 15193.9-2003.pdf

GB15193.9-2003显性致死试验1范围本标准规定了显性致死试验的基本技术要求。本标准适用于评价食品生产、加工、保藏、运输和销售过程中所涉及的可能对健康造成危害的化学、生物和物理因素的致突变作用和对人体可能产生的危害（检测染色体结构和数量的损伤，但不能检测基因突变和毒性作用)，检验对象包括食品添加剂（含营养强化剂）、食品新资源及其成分、新资源食品、辐照食品、食品容器与包装材料、食品工具、设备、洗涤剂、消毒剂、农药残留、兽药残留、食品工业用微生物等。2原理致突变物可引起哺乳动物生殖细胞染色体畸变，以致不能与异性生殖细胞结合或导致受精卵在着床前死亡，或导致胚胎早期死亡。3试验动物选用健康动物，符合试验规格，且有合格证号。经生殖能力预试，受孕率应在70%以上者。雄性成年小鼠（性成熟，体重30g以上）或大鼠（性成熟，体重200g以上），预先接触受试物，再进行交配。交配用的成年堆鼠，不接触受试物。雌性鼠为雄性鼠的56倍量。每组雄鼠一般不少于15只，雄鼠与堆鼠交配，使每组产生至少30只受孕堆鼠。4剂量及分组试验至少设3个受试物剂量组。高剂量组应引起动物生育力轻度下降。各组受试物剂量可在1/101/3LD之间。急性毒性试验给予受试物最大剂量（最大使用浓度和最大灌胃容量）求不出LD时，则以10g/kg体重、人的可能摄入量的100倍、或受试物最大给予剂量为最高剂量，再下设2个剂量组，另设溶剂对照组和阳性对照组。阳性对照物可用环醉酰胺(40mg/kg体重)。雌性动物每组不少于30只受孕鼠。一般应同时做阳性和溶剂对照组。5操作步骤5.1给予受试物5.1.1给予途径：应采用灌胃法，或用喂饲法。5.1.2给予受试物的方法：灌胃法一般一日一次，或一日两次，连续6天或3个月。5.2交配给予雄鼠受试物后，按雌雄鼠2：1比例同笼交配6天后，取出雌鼠另行饲养。雄鼠则于1天后，再以同样数量的另一批雌鼠同笼交配，如此共进行5批6批。5.3胚胎检查以堆雄鼠同笼日算起第15天一17天，采用颈椎脱白法处死堆鼠后，立即剖腹取出子宫，仔细检查、计数，分别记录母一啡鼠的活胎数、早期死亡胚胎数与晚期死亡胚胎数。5.4胚胎鉴别活胎：完整成形，色鲜红，有自然运动，机械刺激后有运动反应。早期死亡胚胎：胚胎形体较小，外形不完整，胎盘较小或不明显。最早期死亡胚胎会在子宫内膜上1