2022年医学专题—第三章-细菌的遗传与变异.ppt

第三章第三章 细菌细菌(xjn)(xjn)的生长和遗传变的生长和遗传变异异第一页，共九十八页。第一节第一节 细菌细菌(xjn)(xjn)的生长及其特的生长及其特性性n n细菌(xjn)(xjn)在适宜的环境条件下，不断吸收营养物质，按照自己的代谢方式进行新陈代谢活动。正正正正常常常常情情情情况况况况下下下下，同同同同化化化化作作作作用用用用大大大大于于于于异异异异化化化化作作作作用用用用，细细细细菌菌菌菌大大大大量量量量繁繁繁繁殖殖殖殖，数量增多的现象叫做生长。数量增多的现象叫做生长。数量增多的现象叫做生长。数量增多的现象叫做生长。n n这里的生长是细菌群体数量的增长。这里的生长是细菌群体数量的增长。第二页，共九十八页。n n细菌个体生长到一定阶段，就会以二分裂的方式形成二个细菌个体生长到一定阶段，就会以二分裂的方式形成二个细菌个体生长到一定阶段，就会以二分裂的方式形成二个细菌个体生长到一定阶段，就会以二分裂的方式形成二个子细胞，细菌个体数目增加子细胞，细菌个体数目增加子细胞，细菌个体数目增加子细胞，细菌个体数目增加，这种繁殖方式似乎与动植物的这种繁殖方式似乎与动植物的这种繁殖方式似乎与动植物的这种繁殖方式似乎与动植物的繁殖方式大不相同，繁殖方式大不相同，繁殖方式大不相同，繁殖方式大不相同，但如果但如果但如果但如果(rgu)(rgu)我们将细菌看作是一个植我们将细菌看作是一个植我们将细菌看作是一个植我们将细菌看作是一个植物的种子或动物的受精卵，把细菌繁殖产生的群体作为物的种子或动物的受精卵，把细菌繁殖产生的群体作为物的种子或动物的受精卵，把细菌繁殖产生的群体作为物的种子或动物的受精卵，把细菌繁殖产生的群体作为整体来考虑的话，细菌与其他生物则是完全相同的。整体来考虑的话，细菌与其他生物则是完全相同的。整体来考虑的话，细菌与其他生物则是完全相同的。整体来考虑的话，细菌与其他生物则是完全相同的。细菌细菌细菌细菌更像是一个更像是一个更像是一个更像是一个“没有固定形状，没有组织分化，可分可合没有固定形状，没有组织分化，可分可合没有固定形状，没有组织分化，可分可合没有固定形状，没有组织分化，可分可合”的多细的多细的多细的多细胞生物胞生物胞生物胞生物，更象是特殊植物，这里之所以说它是植物是因为只要更象是特殊植物，这里之所以说它是植物是因为只要更象是特殊植物，这里之所以说它是植物是因为只要更象是特殊植物，这里之所以说它是植物是因为只要给以合适的条件细菌也可以像植物一样永远生长下去。给以合适的条件细菌也可以像植物一样永远生长下去。给以合适的条件细菌也可以像植物一样永远生长下去。给以合适的条件细菌也可以像植物一样永远生长下去。n n各类细菌都是抱团群居，各类细菌都是抱团群居，各类细菌都是抱团群居，各类细菌都是抱团群居，研究表明群居的细菌获得营养的能力研究表明群居的细菌获得营养的能力研究表明群居的细菌获得营养的能力研究表明群居的细菌获得营养的能力大大高于游离的细菌，同时群居的细菌还象高等动植物一样大大高于游离的细菌，同时群居的细菌还象高等动植物一样大大高于游离的细菌，同时群居的细菌还象高等动植物一样大大高于游离的细菌，同时群居的细菌还象高等动植物一样释放类似激素的调节因子，使群体主动适应环境的变化，并释放类似激素的调节因子，使群体主动适应环境的变化，并释放类似激素的调节因子，使群体主动适应环境的变化，并释放类似激素的调节因子，使群体主动适应环境的变化，并对环境产生影响，因此研究单个细菌的生长意义不大，对环境产生影响，因此研究单个细菌的生长意义不大，对环境产生影响，因此研究单个细菌的生长意义不大，对环境产生影响，因此研究单个细菌的生长意义不大，通常通常通常通常都是将细菌群体作为研究对象，考察细菌群体的生长规律，都是将细菌群体作为研究对象，考察细菌群体的生长规律，都是将细菌群体作为研究对象，考察细菌群体的生长规律，都是将细菌群体作为研究对象，考察细菌群体的生长规律，“生、老、病、死生、老、病、死生、老、病、死生、老、病、死”。n n 在介绍细菌的生长规律之前，先介绍细菌生长数量的测定在介绍细菌的生长规律之前，先介绍细菌生长数量的测定在介绍细菌的生长规律之前，先介绍细菌生长数量的测定在介绍细菌的生长规律之前，先介绍细菌生长数量的测定方法。方法。方法。方法。第三页，共九十八页。一、细菌一、细菌(xjn)(xjn)生长测定方法生长测定方法n n（1 1）直接测定）直接测定）直接测定）直接测定 n n 直直接接测测定定是是常常用用的的细细菌菌生生长长(shngzhng)(shngzhng)测测定定方方法法，它它它它借借借借助助助助显显显显微微微微镜镜镜镜直直直直接接接接观观观观察察察察计计计计数数数数，其其其其优优优优点点点点是是是是测测测测定定定定过过过过程程程程快快快快速速速速，缺缺缺缺点点点点是是是是不不不不能能能能区区区区分分分分细细细细菌菌菌菌的的的的死死死死活活活活。直直接接测测定定法法根根据据不不同同的的测测定定方方法法原原理理，可可以以分分成成以以下下几类：几类：n n1.1.涂片染色法涂片染色法涂片染色法涂片染色法 n n 将将已已知知体体积积(0 00101mlml)的的待待测测样样品品，均均匀匀地地涂涂布布在在载载玻玻片片的的已已知知面面积积内内(1 1cmcm2 2)，经经固固定定染染色色后后，在在显显微微镜镜下下选选择择若若干干个个视视野野计计算算细细胞胞的的数数量量，每每个个视视野野的的直直径径和和面面积积、对对应应的的细细菌菌体体积积用用目目镜镜测测微微尺尺测测出出，结结合合视视野野中中的的细细菌菌数数量量从从而而推推算算0 00101mlml菌样的细菌数量。菌样的细菌数量。第四页，共九十八页。涂片涂片(t pin)(t pin)染色法染色法第五页，共九十八页。2计数器测定法计数器测定法将菌液滴在血球计数板将菌液滴在血球计数板0 01 1mlml 的计数格中，细菌被固定的计数格中，细菌被固定(gdng)染色后，在显微镜下选择数出若干个小格中的细菌数目，（一染色后，在显微镜下选择数出若干个小格中的细菌数目，（一般数般数125个小格），根据比例关系折算出单位体积菌液中细菌的个小格），根据比例关系折算出单位体积菌液中细菌的数量。数量。第六页，共九十八页。例如数了例如数了125个小格中有个小格中有90个细菌则个细菌则 (90125)0.0025=288个个/ml菌菌液液中中细细菌菌数数目目就就为为288个个/ml。这这种种方方法法只只只只能能能能测测测测定定定定个个个个体体体体较较较较大大大大的的的的细细细细菌菌菌菌，细细菌菌个个体体r若若太太小小，则则由由于于每每一一小小格格中中细细菌菌层层层层(cn cn)叠加，相互遮挡，难以准确计数。若适当稀释，效果较好。叠加，相互遮挡，难以准确计数。若适当稀释，效果较好。第七页，共九十八页。3比例比例(bl)(bl)计数法计数法n n将将将将待待待待测测测测样样样样品品品品溶溶溶溶液液液液与与与与等等等等体体体体积积积积的的的的血血血血液液液液(xuy)(xuy)混混混混合合合合，然然然然后后后后涂涂涂涂片片片片，在在在在显显显显微微微微镜镜镜镜下下下下测测测测定定定定细细细细菌菌菌菌与与与与红红红红血血血血球球球球数数数数的的的的比比比比例例例例，因因因因血血血血液液液液(xuy)(xuy)中中中中的的的的红红红红血血血血球球球球数数数数已已已已知知知知(男男男男性性性性400500400500万万万万个个个个mlml，女女女女性性性性350450350450万万万万个个个个mlml)，由由由由此此此此可可可可以以以以测测测测得得得得细菌数量。细菌数量。细菌数量。细菌数量。第八页，共九十八页。4比浊计数法比浊计数法n n这是这是这是这是测定悬浮细胞的快速方法测定悬浮细胞的快速方法测定悬浮细胞的快速方法测定悬浮细胞的快速方法。n n其其其其原原原原理理理理是是是是细细细细菌菌菌菌细细细细胞胞胞胞是是是是不不不不完完完完全全全全透透透透光光光光的的的的，光光光光束束束束通通通通过过过过悬悬悬悬浮浮浮浮液液液液时时时时会会会会引引引引起起起起光光光光的的的的散散散散射射射射或或或或吸吸吸吸收收收收，降降降降低低低低透透透透光光光光度度度度，在在在在一一一一定定定定范范范范围围围围内内内内透透透透光光光光度度度度与与与与溶溶溶溶液的混浊度即细胞浓度成正比，藉此可以测定细菌浓度。液的混浊度即细胞浓度成正比，藉此可以测定细菌浓度。液的混浊度即细胞浓度成正比，藉此可以测定细菌浓度。液的混浊度即细胞浓度成正比，藉此可以测定细菌浓度。n n采采采采用用用用这这这这种种种种方方方方法法法法时时时时；为为为为了了了了得得得得到到到到实实实实际际际际的的的的细细细细胞胞胞胞绝绝绝绝对对对对含含含含量量量量，通通通通常常常常须须须须将将将将已已已已知知知知细细细细胞胞胞胞浓浓浓浓度度度度的的的的样样样样品品品品按按按按上上上上述述述述测测测测定定定定程程程程序序序序制制制制成成成成标标标标准准准准(biozhn)(biozhn)曲曲曲曲线线线线，然然然然后后后后根根根根据据据据透透透透光光光光度度度度或或或或光光光光密密密密度度度度值值值值从从从从标标标标准准准准(biozhn)(biozhn)曲线中直接查得细菌含量。曲线中直接查得细菌含量。曲线中直接查得细菌含量。曲线中直接查得细菌含量。第九页，共九十八页。（1）制标准）制标准(biozhn)(biozhn)曲线曲线n n（2）测定菌液浊度，查表得出）测定菌液浊度，查表得出(d ch)(d ch)细菌数量细菌数量第十页，共九十八页。（二）间接（二）间接(jin ji)(jin ji)计数法计数法n n间间接接(jin(jin ji)ji)计计数数法法又又称称活活菌菌计计数数法法。它它是是通通过过测测定定样样品品中中活活的的细细菌菌数数量量来来间间接接地地表表示示细细菌菌的的含含量量。这这种种方方法法优优点点在在于于只只计计数数样样品品中中的的活活细细菌菌数数目目，缺缺点点在在于于测测定定所所需需的的时时间间较较长长，手手续续繁繁琐琐。它分下述几种方法：它分下述几种方法：n n1.平板计数法平板计数法n n将待测细菌样品将待测细菌样品先作先作10倍梯度稀释倍梯度稀释，然后，然后取相应稀释度的样品取相应稀释度的样品涂布于固体平板培养涂布于固体平板培养基上，或与未经融化基上，或与未经融化的固体培养基混合、的固体培养基混合、摇匀，培养一定时间摇匀，培养一定时间后观察并计数后观察并计数(j sh)(j sh)生生长的菌数长的菌数，最终根据，最终根据细菌数和取样量计算细菌数和取样量计算出细菌浓度。出细菌浓度。第十一页，共九十八页。第十二页，共九十八页。各各各各取取取取1 1mlml，均均均均匀匀匀匀(jnyn)(jnyn)涂涂涂涂布布布布于固体培养基平板上于固体培养基平板上于固体培养基平板上于固体培养基平板上培培培培养养养养，每每每每一一一一个个个个(y(y)细细细细菌菌菌菌会会会会 生成一个生成一个生成一个生成一个(y)(y)菌落菌落菌落菌落稀稀稀稀释释释释度度度度过过过过小小小小，菌菌菌菌落落落落(jnlu)(jnlu)密密密密集集集集无无无无法法法法计计计计数数数数可可可可以以以以计计计计数数数数，但但但但 数数数数 量量量量 过过过过多多多多，费费费费 时时时时费力费力费力费力数量合数量合数量合数量合适，统适，统适，统适，统计计算，计计算，计计算，计计算，作为结作为结作为结作为结果果果果数数数数 量量量量 太太太太 少少少少，误误误误 差差差差 因因因因 素素素素 太太太太大大大大，不不不不 做做做做 计计计计数数数数第十三页，共九十八页。n n一一般般计计数数平平板板的的细细菌菌生生长长菌菌落落数数以以30300个为宜。个为宜。n n细菌数量细菌数量=数出的菌落数数出的菌落数/稀释度稀释度n n例如：例如：10-5稀释度时菌落数为稀释度时菌落数为100