第六章个别细胞和组织(zǔzhī)的培养第一页,共七十页。第二页,共七十页。(yuányīn)第三页,共七十页。上皮细胞可来源于外、内、中三个胚层;培养中只有源于外和内胚层的细胞能反映出上皮细胞的特征,细胞呈膜状生长的特点。第四页,共七十页。(lìyú)第五页,共七十页。-6第六页,共七十页。第七页,共七十页。第八页,共七十页。第九页,共七十页。第十页,共七十页。注意事项:冷消化目的在于使表皮和真皮结合松散;如冷消化后分离下来的表皮膜自身也已松散,此时亦可直接置入PBS中用吸管吹打制备细胞悬液;不再经过第二次消化。第十一页,共七十页。第十二页,共七十页。培养程序:第十三页,共七十页。(xuèqīng)第十四页,共七十页。(fāngbiàn)第十五页,共七十页。2.初代消化法培养:第十六页,共七十页。第十七页,共七十页。第十八页,共七十页。第十九页,共七十页。(péiyǎng)第二十页,共七十页。(péiyǎng)(péiyǎng)第二十一页,共七十页。第二十二页,共七十页。人脐带易于获得,培养效果好;细胞生长后,一般传6~7代后即衰退,难以长期维持。用兔血管内皮细胞培养较好,可传10~30代;不同部位血管内皮细胞生物学性状不同,对各种作用因素反应亦有很大差别。第二十三页,共七十页。(máoxìxuèɡuǎn)第二十四页,共七十页。(cáiliào)第二十五页,共七十页。第二十六页,共七十页。(pízhì)第二十七页,共七十页。(5)再离心:沉淀物用培养液重悬并离心,再重悬,再离心,共两次;第二十八页,共七十页。(xiǎnwēi)(xiǎnwēi)第二十九页,共七十页。(3)用培养液漂洗两次,以去除漂浮细胞;第三十页,共七十页。第三十一页,共七十页。(róngyì)第三十二页,共七十页。(tiáojiàn)第三十三页,共七十页。小鼠成纤维细胞(xìbāo);细胞(xìbāo)来源:swiss小鼠胚胎第三十四页,共七十页。第三十五页,共七十页。(二)巨噬细胞培养第三十六页,共七十页。(jìshù)第三十七页,共七十页。第三十八页,共七十页。(5)用针头轻轻挑起腹壁,使动物体微倾向一侧,使腹腔中液体集于针头下吸取入针管内;第三十九页,共七十页。第四十页,共七十页。以心肌和骨骼肌培养较为实用。第四十一页,共七十页。第四十二页,共七十页。(shēngzhǎng)第四十三页,共七十页。[程序]第四十四页,共七十页。乳鼠心肌细胞原代培养(péiyǎng)第四十五页,共七十页。第四十六页,共七十页。...