流式细胞术原理(yuánlǐ)及应用ForFCMTraining第一页,共一百四十三页。第一页,共一百四十三页。流式细胞术(FlowCytometry,简称FCM)是一种可以快速、准确、客观,并且同时检测单个微粒(通常是细胞)的多项特性的技术,同时可以对特定群体加以分选第二页,共一百四十三页。第二页,共一百四十三页。第三页,共一百四十三页。第三页,共一百四十三页。InjectorTipFluorescenceFluorescencesignalssignalsFocusedlaserFocusedlaserbeambeamSheathfluid第四页,共一百四十三页。第四页,共一百四十三页。第五页,共一百四十三页。第五页,共一百四十三页。1.散射光信号(xìnhào)•前向角散射光(FSC,ForwardScatter)入射激光的同向散射光信号细胞相对大小及其表面积。•侧向(cèxiànɡ)角散射(SSC,SideScatter)入射激光90角的散射光信号细胞粒度及细胞内相对复杂性。第六页,共一百四十三页。第六页,共一百四十三页。—FALSSensorLaser第七页,共一百四十三页。第七页,共一百四十三页。FALSSensor90LSSensorLaser第八页,共一百四十三页。第八页,共一百四十三页。第九页,共一百四十三页。第九页,共一百四十三页。lysedwholeblood第十页,共一百四十三页。第十页,共一百四十三页。Deadcellsareknowntobesmallerandtoexhibitmoreinternalcomplexitythanlivecells.Whichofthepopulationsonthisplotwouldyouexpecttobedead?第十一页,共一百四十三页。第十一页,共一百四十三页。第十二页,共一百四十三页。第十二页,共一百四十三页。FreqFluorescenceFALSSensorFluorescencedetector(PMT3,PMT4etc.)第十三页,共一百四十三页。第十三页,共一百四十三页。WhichofthethreepopulationshasthemostAbAbindingsites?AbAAbB第十四页,共一百四十三页。第十四页,共一百四十三页。第十五页,共一百四十三页。第十五页,共一百四十三页。液流系统第十六页,共一百四十三页。第十六页,共一百四十三页。—液流系统将样本悬液聚焦在光源(guāngyuán)的中心处第十七页,共一百四十三页。第十七页,共一百四十三页。SampleLaminarFlowLowSampleFlowRate12L/minSheathSheathSampleLaminarFlowSheathSheathOpticalCuvetteHighSampleFlowRate60L/min第十八页,共一百四十三页。第十八页,共一百四十三页。Whichofthefollowingwouldcausedisturbanceinthelaminarflowoftheopticalcuvette?A.bubblesB.cellularconcentrationC.sampleflowrate第十...