2022年医学专题—第5章-花药和花粉培养(1).ppt

第5章 花药和花粉(hufn)培养,植物(zhw)组织培养,第一页，共二十六页。,第5章 花药和花粉培养(piyng)(3学时),本章主要内容(nirng)：花粉和花药培养技术花粉和花药培养应用,第5章 花药和花粉(hufn)培养,第二页，共二十六页。,(1)掌握花药培养和花粉培养的区别；(2)了解花药最佳接种(jizhng)时期；(3)掌握花药培养的大致过程；(4)掌握花粉发育的四种途径；(5)掌握花粉培养的大致过程。,第5章 花药和花粉(hufn)培养,本章教学目的(md)与要求,第三页，共二十六页。,花粉和花药的培养(pollen and anther culture)是指花粉在培养基上改变其正常发育和机能，不经受精(shu jng)而发生细胞分裂，由单个花粉粒发育成完整单倍体植株的技术。,第5章 花药(huyo)和花粉培养,单倍体植物(haplobiont)用离体培养花药的方法(fngf)使花粉发育成一个完整的植株。,名词,第四页，共二十六页。,第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,花药培养是将花粉发育至一定阶段的花药(huyo)接种到人工培养基上进行培养，以形成花粉胚或愈伤组织进而分化成植株的技术。,第5章 花药(huyo)和花粉培养,第五页，共二十六页。,花粉(hufn)培养：是将花粉从花药中分离出来进行离体培养的过程。,油菜成熟(chngsh)花药的结构,花粉囊,花粉囊壁,成熟(chngsh)花粉粒,花药裂口,第一节 花药和花粉培养技术,第六页，共二十六页。,一、花药(huyo)和花粉的培养方法：,（一）花粉发育(fy)时期：1、适宜时期：单核期,尤其是单核中、晚期(单核靠边期),第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,第七页，共二十六页。,花粉粒形态(xngti)：,第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,花粉粒即雄配子体。为2细胞(xbo)花粉或3细胞花粉,2-细胞花粉,3-细胞花粉,第八页，共二十六页。,2、花粉发育时期(shq)的检测：,外部形态观察：在水稻中，一般叶枕距为5-15cm，颖片淡黄绿色、雄蕊长度接近颖片长度的1/2时，可能为单核靠边期的花粉(hufn)。压片染色法：是检测花粉发育时期的简便有效方法，常用染色剂为醋酸洋红。,第一节 花药和花粉(hufn)培养技术,第九页，共二十六页。,（二）培养(piyng)过程,1、花药培养过程：1）预处理:低温冷藏是最常用的方法2）表面消毒3）接种4）培养(piyng)形成花粉植株。花粉-愈伤组织-苗 花粉-胚状体-苗,第一节 花药(huyo)和花粉培养技术,选幼年树花蕾,第十页，共二十六页。,水稻(shudo)花药培养过程：,旗叶鞘(yqio)用70酒精擦洗一遍,剥去旗叶鞘(yqio)，取出稻穗,10漂白粉10 min,无菌水洗3次,培养5天，花药变褐，20天后花药裂开，长出淡黄色的花粉愈伤组织，先长芽，后长根，形成幼苗。,用接种环接种到培养基上,左手持穗，右手用镊子取花药，放无菌培养皿中,第一节 花药和花粉培养技术,第十一页，共二十六页。,花药培养脱毒,1974年日本(r bn)：花药培养可以脱除草莓病毒；花药采取时期单核期：花蕾4-6mm，花药1mm花药诱导愈伤组织培养基MS+IAA4mg/L+BA2mg/L+KT2mg/L+蔗糖30g+琼脂7g/L增殖分化培养基MS+GA1mg/L+IBA0.2mg/L+BA1mg/L+蔗糖30g+琼脂7g/L生根培养基1/2MS+IBA0.2mg/L+活性炭3g/L+蔗糖20g+琼脂7g/L,第一节 花药和花粉(hufn)培养技术,第十二页，共二十六页。,草莓花药愈伤组织,再生(zishng)植株,花药植株,第一节 花药(huyo)和花粉培养技术,第十三页，共二十六页。,2、花粉(hufn)培养,花粉培养成苗途径与花药培养比较:相同点：胚状体成苗途径、愈伤组织再分化成苗途径 不同点：花粉培养：需进行(jnxng)花粉的分离 特殊的花粉诱导培养,第一节 花药和花粉(hufn)培养技术,第十四页，共二十六页。,花粉培养(piyng)过程,取花蕾（镜检）,取花药,第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,第十五页，共二十六页。,二、培养基,第一节 花药和花粉(hufn)培养技术,基本(jbn)培养基,激素(j s)种类和浓度,蔗糖浓度,第十六页，共二十六页。,（一）基本(jbn)培养基：,第一节 花药(huyo)和花粉培养技术,MS和H培养基：适合(shh)双子叶植物花药培养；B5培养基：适合豆科和十字花科花药培养；N6培养基：适合禾谷类作物的花药培养。,第十七页，共二十六页。,第一节 花药(huyo)和花粉培养技术,细胞分裂素可促进(cjn)胚状体形成；生长素可诱导愈伤组织形成。细胞分裂素与生长素比值高时可诱导愈伤组织分化苗,（二）激素(j s)种类和浓度,第十八页，共二十六页。,较高浓度蔗糖可诱导花粉(hufn)形成愈伤组织；较低 浓度蔗糖可使愈伤组织分化成苗。,第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,（三）蔗糖(zhtng)浓度,第十九页，共二十六页。,三、单倍体植株(zhzh)染色体加倍的方法,第一节 花药和花粉(hufn)培养技术,单倍体植物天然发生(fshng)的途径：,孤雌生殖,孤雄生殖,无配子生殖,第二十页，共二十六页。,单倍体植株(zhzh)染色体加倍的方法,1、自然加倍2、人工(rngng)加倍：用秋水仙素溶液浸苗、处理愈伤组织和用含0.4%秋水仙素的羊毛脂涂抹单倍体植株的顶芽、腋芽，可得到能结实的二倍体植株。3、愈伤组织反复继代培养，可得到二倍体植株。,第一节 花药和花粉培养(piyng)技术,第二十一页，共二十六页。,第二节 花药和花粉(hufn)培养的应用-单倍体植株育种,1、诱导形成单倍体，快速获得纯系，缩短育种周期；2、有利于筛选隐性突变体，提高选择效率;3、有利于隐性基因(jyn)控制性状的选择4、快速获得自交系的超雄株,第5章 花药(huyo)和花粉培养,第二十二页，共二十六页。,大大缩短育种(y zhng)周期,第二节 花药和花粉(hufn)培养的应用,第二十三页，共二十六页。,(1)花药培养是器官培养，花粉培养属细胞培养。(2)花药培养一般选择花粉的单核期进行接种。(3)花药培养包括：选择材料-消毒-接种培养-愈合组织生成-分化出单倍体植株。(4)花粉的发育途径包括：营养细胞发育、生殖细胞发育、营养和生殖细胞同时发育及花粉均等分裂发育。(5)花粉培养包括花粉的分离-预处理-培养过程。(6)胚胎培养包括：幼胚培养、成熟胚培养、胚珠培养、子房培养和胚乳(pi r)培养等。(7)胚胎的培养的意义。,第5章 花药(huyo)和花粉培养,本章(bn zhn)小结：,第二十四页，共二十六页。,谢谢(xi xie)!,第5章 花药(huyo)和花粉培养,第二十五页，共二十六页。,内容(nirng)总结,第5章 花药和花粉培养。第5章 花药和花粉培养。大 家 好。第5章 花药和花粉培养(3学时)。花粉和花药的培养(pollen and anther culture)。为2细胞花粉或3细胞花粉。花粉-愈伤组织-苗。花粉-胚状体-苗。用接种环接种到培养基上。胚状体成苗途径(tjng)、愈伤组织再分化成苗途径(tjng)。第二节 花药和花粉培养的应用-单倍体植株育种。谢谢,第二十六页，共二十六页。,