培养细胞的取材与分离取材部位准确(zhǔnquè)严格无菌操作，避免微生物和化学污染尽快培养，24h以内减小损伤，使用锐器，避免撕扯制备标本，以便鉴定第一页，共三十页。体外细胞的纯化人工纯化：酶消化法、机械刮除法(chúfǎ)、反复贴壁法、克隆法、培养基限定法、流式细胞仪分离法等自然纯化第二页，共三十页。细胞冻存要点：冷冻过程要缓慢冻存细胞必须处在对数生长期细胞复苏要点：快速解冻解冻后的细胞应离心去除(qùchú)冷冻保护剂后再接种到培养基中第三页，共三十页。微生物污染：细菌，真菌，支原体等污染污染的途径：空气、器材、操作(cāozuò)、试剂、组织标本微生物污染的检测微生物污染的控制：抗生素除菌法；加温处理第四页，共三十页。细胞培养常用方法(fāngfǎ)：组织块培养法酶消化法第五页，共三十页。第二节口腔医学中相关(xiāngguān)细胞培养及其特点第六页，共三十页。一、牙齿相关(xiāngguān)细胞第七页，共三十页。牙髓细胞培养方法：组织块法；酶消化法细胞形态特点免疫(miǎnyì)组织化学染色体外培养细胞的生长增殖特点功能特点第八页，共三十页。波形(bōxínɡ)丝蛋白染未分化(fēnhuà)间充质细胞成纤维细胞第九页，共三十页。体外培养细胞(xìbāo)的生长增殖（Cellproliferationinvitro）•生长(shēngzhǎng)增殖较快•传代期较短，15-20代(2-4M)•可复层生长第十页，共三十页。功能(gōngnéng)特点•碱性(jiǎnxìnɡ)磷酸酶（alkalinephosphatase,ALP)活性•矿化现象(VonKossa)•对细胞因子的反应•对盖髓剂的反应第十一页，共三十页。培养方法：组织块培养法；酶消化法细胞形态特点：成纤维细胞型（与牙周膜细胞类似）免疫(miǎnyì)组织化学染色：波形丝蛋白（+）；角蛋白（-）体外培养细胞的生长增殖特点功能特点第十二页，共三十页。培养方法：组织块法；酶消化法细胞(xìbāo)形态特点免疫组织化学染色体外培养细胞的生长增殖特点功能特点牙周膜细胞增殖分化的影响因素原代人牙周膜成纤维细胞传代(chuándài)人牙周膜成纤维细胞第十三页，共三十页。免疫(miǎnyì)组织化学染色波形(bōxínɡ)丝蛋白染色阳性角蛋白染色(rǎnsè)阴性第十四页，共三十页。•成纤维(xiānwéi)样细胞，培养成功率高•细胞增殖快•体外存活时间长(4-12M)第十五页，共三十页。功能特点分泌功能：胶原、非胶原蛋白、碱性(jiǎnxìnɡ)磷酸酶。矿化功能收缩功能...
