地中海贫血筛查-血液学分析.pptx

地中海贫血检测,血液学分析容敏逢,第一页，共二十四页。,主要内容,筛查方案血液学分析地贫基因型与临床表现,第二页，共二十四页。,地中海贫血筛查及产前诊断流程,第三页，共二十四页。,地中海贫血的临床特征,小细胞低色素性溶血型贫血(中、重度)黄疸肝脾肿大(脾大明显)骨髓扩增发育缓慢合并感染Barts 水肿胎(地贫,宫内或出生后数小时内死亡),第四页，共二十四页。,地贫血液学分析,最常用的方法:,红细胞平均容积(MCV)、红细胞脆性试验、Hb电泳联合检测进行筛查,发现异常者再进行基因诊断。,第五页，共二十四页。,地中海贫血的血液学表型特征 RBC脆性 RBC 参数 MCV MCH 细胞形态变化 Hb电泳分析 Hb A2()或()Hb Barts()Hb H()Hb E(),第六页，共二十四页。,贫血实验室诊断程序,贫血的形态学分类,第七页，共二十四页。,第八页，共二十四页。,人类不同时期血红蛋白的组成,人血红蛋白的组成胚胎期血红蛋白：Hb Gower 1 x2 e2 Hb Gower 2(a2 e2)Hb Portland(x2 g2)即Hb Portland 1另有少量Hb Portland 2(x2 b2)，Hb Portland 3(x2 d2)胎儿期主要血红蛋白：HbF a2 g2 成人主要血红蛋白：HbA a2 b2约占血红蛋白总量96.597.5%HbA2 a2 d2 约占血红蛋白总量2.53.5%HbF a2 g2约占血红蛋白总量1%以下。,第九页，共二十四页。,第十页，共二十四页。,地中海贫血表型阳性诊断参考标准,第十一页，共二十四页。,血红蛋白电泳图谱,1 2 3 4 5,1.正常人HB2.轻型地贫 3.异常HB E 杂合子4.新生儿HB Barts(4)(地贫标准型5.HB H(4),Normal AA2 AE Barts AF HA,+,-,500V,25min,第十二页，共二十四页。,全自动血红蛋白琼脂糖凝胶电泳图谱,1、正常成人HbA2,无HbF区带;2、成人HbA2升高,但HbF碱变性含量正常,图谱中不能扫描出HbF区带;3、成人HbA2升高,HbF碱变性含量稍高于正常,图谱中可见浅染HbF区带;4、成人HbA2升高,HbF碱变性含量高于正常,图谱中可见一浅染HbF区带;5、成人HbA2升高,HbF碱变性含量明显高于正常,图谱中可见一清晰HbF区带。,第十三页，共二十四页。,a-珠蛋白基因突变及其遗传学分型,就遗传单体型而言a-珠蛋白基因突变可分成三类：,HbH病基因型可分成缺失型和非缺失型两种：缺失突变基因型：-a3.7/-、-a4.2/-及(-a2.7/-)非缺失突变基因型：aaT/-和aaT/aaT,第十四页，共二十四页。,a-地中海贫血临床类型,根据临床表现严重程度，可分成以下四种,第十五页，共二十四页。,-珠蛋白基因的突变,-珠蛋白基因点突变：-珠蛋白基因最常见的突变类型。包括单碱基置换和数个碱基缺失或插人突变。在中国-地贫群体中 41/42-TCTT、IV S-654(CT),CD17(AT),-28AG和CD71/72+A等5种突变最常见，约占总突变率90%以上 大片段缺失：缺失突变涉及基因组上较大片段的缺失包括-地贫和遗传性胎儿血红蛋白持存症(hereditary persistance of fetal hemoglobin,HPFH)。此外，G-和A-珠蛋白基因启动子区的突变也可导致HPFH。,第十六页，共二十四页。,突变类型,编码区的无义突变、移码突变和起始密码突变：如CD41-42，CD71-72，CD17突变后形成终止子，表现为0。非编码区IVS-1和IVS-2突变如IVS-II-654突变影响mRNA的拼接，表现为。影响转录的突变：如-28，-29的突变影响基因的转录，表现为。,第十七页，共二十四页。,b地贫的基因型与表现型,重型-地中海贫血/、0/0、0/纯合子或双重杂合子所有患者有组织缺氧病症，可出现“地中海贫血面容，生长发育缓慢。红细胞体积小且低色素。过剩的游离链形成链包涵体，引起溶血性贫血，靠输血维持生命。实验室检查主要可见：血红蛋白定量约为20-30g/L或更低；红细胞体积细小，形态不一，靶形红细胞较常见，网织红细胞增高；血红蛋白电泳时HbA缺乏或严重缺乏，HbF增高达30以上偶可达90%以上。,轻型-地中海贫血A/、A/0 杂合子患者病症较轻，轻度贫血，轻度肝脾肿大。红细胞脆性降低，小细胞，低色素，MCV、MCH较低。实验室检查可见：血红蛋白定量约为90-120g/L或更低;小细胞低色素性贫血，MCH和MCV分别为2022pg和5070fl;红细胞脆性降低；约50%患者HbF增高，约为1-3%，甚少大于5%；HbA2量增高达4%-8%。,第十八页，共二十四页。,b地贫的基因型与表现型,中间型-地中海贫血/、/0 纯合子或双重杂合子患者临床病症介于重型和轻型之间，如中度偏重贫血，生长发育缓慢，黄疸等。血液检查呈小细胞低色素贫血症。实验室检查呈小细胞低色素性贫血症改变，血红蛋白定量局部患者可低至60g/L，但也有患者高达100-120g/L本型患者通常属某些-地中海贫血变异型纯合子，如日+地贫高F+(高 F)地贫或两种不同变异型地中海贫血的双重杂合子，如+地贫+地贫。,第十九页，共二十四页。,血液学分析的敏感性和特异性,RBC脆性假阴性血常规检测(MCV)对静止型地贫有小概率的漏检静止型a-地贫患者多无临床病症E/N基因型患者的MCV十分接近筛查值这局部地贫患者极易漏诊 通过Hb电泳可对-地贫进行明确诊断HbA2轻度增高诊断-地贫的敏感性可达96.8%,特异性可达97.4%Hb电泳对轻型-地贫无诊断意义 轻型-地贫无HbBarts(4)和HbH,第二十页，共二十四页。,-地中海贫血复合-地中海贫血时多表现为-地中海贫血的特征,造成-地贫漏检.地中海贫血合并缺铁性贫血造成地贫漏检.,第二十一页，共二十四页。,第二十二页，共二十四页。,谢谢！,亚能生物技术深圳有限责任公司:/dbs-decipher,第二十三页，共二十四页。,内容总结,地中海贫血检测。正红细胞正色素性贫血。HbH病基因型可分成缺失型和非缺失型两种：。患者多无明显临床症状,实验室检查可小细胞低色素性贫血，MCH和MCV均较低。出生时脐血Hb Barts约占20-30，此时HbH含量较低。但出生后Hb Barts含量迅速降低，HbH含量逐渐增高。HB Barts胎儿水肿综合征（-/-）。E/N基因型患者的MCV十分接近筛查值这局部地贫患者极易漏诊,第二十四页，共二十四页。,