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超高效液相色谱-串联质谱法...清中145种脂类成分的含量_宁慧.pdfVIP免费

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DOI:10.11973/lhjy-hx202303005超高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中145种脂类成分的含量宁慧1,张志永2,胡绪俊2,彭章晓3,付艳蕾2*,舒烈波2(1.江苏远方检测技术服务有限公司,南京210043;2.上海鹿明生物科技有限公司,上海201114;3.东方肝胆外科医院国家肝癌科学中心,上海201805)摘要:胆固醇、磷脂和脂肪酸代谢在心血管疾病和炎-癌转化的发病中起着重要作用,在生物体液样本中这3条代谢通路脂质成分的理化性质和浓度水平差别很大,同时定量颇具挑战。基于此,以体积比65:35的甲醇-二氯甲烷混合液为提取溶剂超声提取血清样本后,采用超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS)同时测定3条代谢通路中145种脂类成分的含量。145种脂类成分的测定可在40min内完成,测定下限为0.03~50.0μg·L-1。以内标磷脂酰甘油(15:0)[PG(15:0)]、1-十七碳酰-甘油-3-磷酰胆碱[LysoPC(17:0)]、7α-羟基-4-胆固醇-3-酮-D7、13C-甘氨胆酸、d8-花生四烯酸为代表研究对象,评估方法的基质效应、精密度和准确度。结果显示,基质效应因子值为76.7%~115%,说明基质效应较弱。加标回收试验中目标物的回收率为71.3%~110%,测定值的相对标准偏差(n=5)均小于10%。方法用于测定30例健康人和30例乙型肝炎(HBV)患者血清中145种脂类成分的含量,并将筛选后的29种差异代谢物进行热图分析和相关性分析。结果表明,与健康人血清相比,HBV患者血清中磷脂(PL)和结合态的胆汁酸(BA)含量均是上升的,溶血磷脂(LPL)和脂肪酸(FA)的含量均是下降的。PL与BA表达呈显著正相关,与LPL呈显著负相关。受试者特征曲线分析(ROC)结果显示溶血磷脂酸(16:0)[LysoPA(16:0)]的ROC分析时曲线下面积(AUC)值等于1.000,具有作为HBV诊断生物标志物的前景。关键词:超高效液相色谱-串联质谱法(UHPLC-MS/MS);血清;脂类成分;生物标志物中图分类号:O657.63文献标志码:A文章编号:1001-4020(2023)03-0283-14肝脏不仅是人体内源性代谢物(氨基酸、糖类、脂类等)的重要代谢场所,还是外源性毒物的主要解毒器官[1]。高脂、高糖、化学毒物、肝炎病毒等因素...

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