HainanMedJ,Apr.2023,Vol.34,No.8海南医学2023年4月第34卷第8期PenicilazaphiloneC抑制NETosis诱导哮喘炎症的机制研究黄俊敏，王才春海南医学院第一附属医院呼吸内科，海南海口571199【摘要】目的探讨PenicilazaphiloneC(PAC)对哮喘小鼠炎症反应的影响，以及中性粒细胞胞外诱捕网的形成(NETosis)介导哮喘发生发展的可能机制。方法在体外，采用佛波醇12-十四酸酯13-乙酸酯(PMA)诱导健康小鼠的中性粒细胞产生中性粒细胞胞外诱网(NETs)。设置四组PAC的不同剂量组及对照组，通过测定dsDNA的产生了解抑制效果。在体内，采用脂多糖(LPS)诱导建立哮喘小鼠模型，将30只小鼠随机分成对照组、哮喘组、地塞米松组、DNaseⅠ组及PAC组。测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞因子和炎性细胞水平；对肺组织采用HE染色、PAS染色及免疫荧光；通过Westernblotting检测肺组织中的瓜氨酸化组蛋白；通过荧光镜检验证哮喘小鼠是否产生了NETs。结果在体外，1.2mg/mL的PAC可以显著抑制NETs的形成[0.3mg/mL、0.6mg/mL、0.9mg/mL、1.2mg/mLPAC组结果分别为(0.72±0.17)RFU、(0.35±0.09)RFU、(0.16±0.02)RFU、(0.11±0.03)RFU)]，差异有统计学意义(P<0.05)；在体内实验中，小鼠BALF中的dsDNA与对照组(165.40±6.99)ng/mL相比，哮喘组(300.00±8.27)ng/mL的含量明显增加，差异有统计学意义(P<0.05)；BALF中有大量细胞因子及炎性细胞，中性粒细胞约占62%，肺组织明显受损。PAC组小鼠的中性粒细胞水平为(235.50±21.03)×104cells/mL，明显低于哮喘组的(796.50±12.47)×104cells/mL，差异有统计学意义(P<0.05)；PAC组小鼠肺组织病理改变较哮喘组明显减少，PAC组小鼠的炎症评分为(1.17±0.41)分，明显低于哮喘组的(3.17±0.75)分，差异有统计学意义(P<0.05)；与哮喘组对比，PAC组Westernblotting检测出的瓜氨酸化组蛋白水平显著下降。结论利用LPS成功建立中性粒细胞型哮喘小鼠模型；PAC可以显著缓解哮喘小鼠炎症，其机制与抑制瓜氨酸化组蛋白和NETosis有关。【关键词】小鼠；哮喘；炎症；中性粒细胞；中性粒细胞胞外诱捕网；组蛋白；机制【中图分类号】R-332【文献标识码】A【文章编号】1003—6350（2023）08—1065—07MechanismofinhibitionofNETosis-inducedasthmainflammationbyPenicilazaphiloneC.HUANGJun-min,WANGCai-chun.DepartmentofRespiratoryMedicine,theFirstAffiliatedHospitalofHainanMedicalUniversity,Haikou571199,Hainan,CHINA【Abstract】ObjectiveToinvestiga...
