HPLC测定纺织品中维生素E含量_贺志鹏.pdf

贺志鹏1，刘蒙21.中国纺织信息中心，北京 100020；2.中联品检（北京）检验技术有限公司，北京 100025摘要：通过确定维生素E的3种主要异构体-生育酚、-生育酚和-生育酚的液相色谱分析条件，以特征保留时间确定各异构体相应的液相色谱指纹图谱。建立了纺织品中维生素E含量的测定方法：以相同液相色谱分析条件对纺织样品提取液进样分析，根据各异构体指纹图谱以外标法定量求得纺织品中异构体含量，最终获得纺织品中维生素E的含量。测定方法的精密度和回收率均满足相关标准要求，可用于纺织品中维生素E含量的检测。关键词：高效液相色谱法；纺织品；维生素E；含量测定中图分类号:O652文献标志码:C文章编号:1004-0439（2023）04-0053-04Determination of Vitamin E content in textiles by HPLCHE Zhipeng1,LIU Meng21.China Textile Information Center,Beijing 100020,China;2.United TestingService(Beijing)Co.Ltd.,Beijing 100025,ChinaAbstract:By determining the three main isomers of Vitamin E,-tocopherol,-tocopherol and-tocopherol were determined,and then the corresponding HPLC fingerprints of each isomer were determined according to the characteristic retention time.The determination method of Vitamin E content in textiles was established,the extraction solution of textiles was injected and analyzed with the same liquid chromatographyanalysis conditions,and the content of Vitamin E in textiles was obtained quantitatively according to the fingerprint of each isomer and the external standard method,and finally the content of Vitamin E in textiles was obtained.The precision and recovery rate of the method met the requirements of the relevant standards andcould be used for the determination of Vitamin E content in textiles.Key words:HPLC;textiles;Vitamin E;content determination收稿日期：2022-12-16作者简介：贺志鹏（1987），男，高级工程师，硕士，研究方向为检测技术标准化及纺织产业发展。维生素E广泛存在于植物油脂中，有研究表明椰油中含有较多的多酚和维生素E，可以通过协同作用发挥抗氧化作用；初榨橄榄油原料的生育酚含量为0.01%0.04%1-2。而在纺织产品开发中，既可以直接使用各类植物油脂，也可以使用分离纯化后的维生素E，但均是利用维生素E来使产品具有抗氧化功能。有关维生素E应用于功能性纺织产品开发的案例比较多，但是无论现有的纺织标准体系还是纺织相关科研文献，均未见关于含量方面的测试方法。天然维生素E主要有8种异构体，植物油脂中含量较多的为-生育酚、-生育酚和-生育酚，本实验以这3种生育酚为研究对象，借助液相色谱分析技术进行纺织品中维生素E含量测定方法的研究。1实验1.1材料HPLC测定纺织品中维生素E含量印 染 助 剂TEXTILE AUXILIARIESVol.40 No.4Apr.2023第40卷第4期2023年4月印染助剂40卷标准品：-生育酚（CAS号10191-41-0）、-生育酚（CAS 号 54-28-4）、-生育酚（CAS 号 119-13-1）（河南北方伟业计量技术有限公司）；甲醇、乙醇（色谱级，上海安谱实验科技股份有限公司）。1.2仪器电子天平 精度大于等于 0.01 g，梅特勒托利多科技（中国）有限公司，恒温水浴锅（温控精确度1，厦门瑞比精密机械有限公司），高效液相色谱仪（配有紫外检测器，美国 Waters 公司），旋转蒸发仪（上海亚荣仪器有限公司），移液枪（最小刻度 0.01mL，山东高芯生物传感器研究院有限公司）。1.3维生素E标准储备溶液的配制分别精确称取-生育酚、-生育酚以及-生育酚各 10.0 mg，用乙醇溶解后转移至 10 mL棕色容量瓶中，用乙醇定容至刻度，溶液避光保存。1.4液相色谱分析条件色谱柱：Athena C18-WP 柱（250.0 mm4.6 mm5.0 m）；柱温：35；流速：1.0 mL/min；进样量：10 L；流动相设置：100%甲醇运行20 min。2结果与讨论2.1检测波长标准样品为脂溶性物质，选用100%甲醇作为流动相，在全波段进行扫描确定最大吸收波长。研究发现：-生育酚最大吸收波长为 293 nm，-生育酚和-生育酚最大吸收波长均为298 nm。由图1可以看出，各标准样品在相应波长下的灵敏度高，分离效果好，特征保留时间单一而且无重叠，-生育酚特征保留时间约为13.4 min，-生育酚特征保留时间约为11.5 min，-生育酚特征保留时间约为 9.9 min，同时不受溶解试剂无水乙醇和流动相甲醇的干扰，因此在测定后续纺织品中维生素E含量时，即使使用混标进样也可以将3种生育酚进行完全区分（如图2所示）。2.2标准曲线方程分别准确移取-生育酚、-生育酚以及-生育酚标准储备溶液各 0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL 置于 10mL的棕色瓶中，用乙醇定容至刻度制备工作溶液。将上述工作溶液分别注入液相色谱仪中，按照确定的液相色谱分析条件，测定在标准品特征保留时间处的峰面积，以峰面积作为纵坐标，以质量浓度作为横坐标绘制标准曲线，计算直线回归方程，具体如表1所示。由表1可看出，-生育酚、-生育酚以及-生育酚标准品拟合直线的线性相关系数均大于 0.999 0，表明线性关系良好。2.55.07.510.020.0012.5 15.0 17.5时间/min-生育酚2.55.07.510.020.0012.5 15.0 17.5时间/min-生育酚2.55.07.5 10.020.0012.5 15.0 17.5时间/min-生育酚图1各标准品HPLC-DAD谱图8.010.09.011.0 12.0 13.0 14.0 15.0 16.0 17.0123时间/min1-生育酚；2-生育酚；3-生育酚图2各标准品混标加入后的HPLC-DAD谱图544期2.3方法精密度方法精密度实验如表2所示。分别准确移取-生育酚、-生育酚和-生育酚标准储备溶液各0.3 mL于10 mL棕色瓶中，用乙醇定容至刻度。按照确定的液相色谱分析条件，各标准品连续进样6次，记录每次在对应特征保留时间位置的峰面积，代入标准曲线计算各标准品质量浓度。由表2可以看出，测定各标准品使用本方法的相对标准偏差均低于 2%，满足仪器分析方法的要求，方法精密度符合 GB/T 274172017 合格评定 化学分析方法确认和验证指南 附录 B 中实验室内变异系数的要求，方法精密度较高。2.4方法回收率分别准确移取-生育酚、-生育酚和-生育酚标准储备溶液各 0.15、0.25、0.35、0.45、0.55 mL 于 10mL棕色瓶中，用乙醇定容至刻度。按照确定的液相色谱分析条件，不同质量浓度标准品依次进样，记录每次在对应特征保留时间位置的峰面积，代入标准曲线计算各标准品质量浓度，比较测试值与已知值计算回收率。由表3可以看出，方法回收率符合GB/T 274172017 合格评定 化学分析方法确认和验证指南 附录A中方法回收率偏差范围的要求。进样编号123456标准偏差均值CV值/%质量浓度/（mgL-1）-生育酚30.430.530.830.130.530.20.2530.40.82-生育酚31.032.032.032.431.832.00.4731.91.47-生育酚34.034.034.034.033.933.70.1233.90.35表2方法精密度实验溶液质量浓度/（mgL-1）1020304050线性方程峰面积-生育酚0.669 01.394 02.017 82.737 33.443 3y=0.068 9x-0.015 3（R2=0.999 5）-生育酚0.351 60.723 01.070 61.413 81.781 5y=0.035 5x+0.002 9（R2=0.999 8）-生育酚0.708 81.467 32.178 32.927 33.658 9y=0.073 6x-0.019 9（R2=0.999 9）表1标准曲线绘制数据进样质量浓度/（mgL-1）15.025.035.045.055.0平均回收率/%测试值/（mgL-1）-生育酚15.260 626.183 036.459 946.001 455.483 0-生育酚14.634 724.697 635.313 945.012 655.088 3-生育酚15.715 326.131 036.277 746.732 656.363 3回收率/%-生育酚101.74104.73104.17102.23100.88102.75-生育酚97.5698.79100.90100.03100.1699.49-生育酚104.77104.52103.65103.85102.48103.85表3方法回收率实验贺志鹏，等：HPLC测定纺织品中维生素E含量55印染助剂40卷2.5纺织样品测试准确称取 5.0 g 纺织样品，剪碎至约 0.5 cm0.5cm大小，置于250 mL锥形瓶中，加入100 mL乙醇，在室温下振荡提取30 min后用旋转蒸发仪浓缩至约2mL；用乙醇分次将蒸发瓶中残留物溶解并转移至10mL容量瓶中，定容至刻度，溶液过0.45 m有机滤膜后作为待测样液。按照确定的液相色谱分析条件进样测试，记录每次在对应特征保留时间位置的峰面积，代入标准曲线并经计算获得纺织样品维生素E含量，结果如表4所示。由表4可以看出，液相色谱法对测定纺织品中维生素E含量有效，而且能测定含量较低的样品。分析测试的5个样品中均含有维生素E，其中样品1含有1种生育酚即-生育酚，样品25含有同种生育酚即-生育酚，样品中均未检测到-生育酚。3结论（1）通过确定维生素E中各主要异构体-生育酚、-生育酚以及-生育酚标准品检测波长及其液相色谱特征保留时间，进而确定维生素E液相色谱分析条件。（2）在确定的液相色谱分析条件下，采用液相色谱分析技术进行维生素E各主要异构体含量的测定，方法精密度、回收率均符合相关要求，因此可用于纺织品中维生素E含量的测定。（3）以对应维生素E异构体色谱法的特征保留时间信息，将提取后的纺织品待测样液在相同液相色谱分析条件下进样测试，以外标法求得纺织品中维生素E的含量。参考文献：1刘小琴.原生态椰子油熔融分提及物性研究D.海口:海南大学,2012.2梁北梅,祝芷琦,李咏华,等.国家标准方法在橄榄油-生育酚含量测定的应用J.食品安全质量检测学报,2021,12(7):2834-2840.样品编号12345维生素E含量/（mgkg-1）-生育酚2.10000-生育酚00000-生育酚01.41.21.10.8总量2.11.41.21.10.8