ＤＯＩ：１０．１９３９２／ｊ．ｃｎｋｉ．１６７１⁃７３４１．２０２３１２０５４ＧＦＰ唾液乳杆菌ＣＣＦＭ６１０５的构建高彤１李明桂１梁水明１范丽佳１王长丽２∗１．右江民族医学院临床医学院广西百色５３３０００；２．右江民族医学院基础医学院广西百色５３３０００摘要：目的：构建、筛选并鉴定出重组ＧＦＰ唾液乳杆菌ＣＣＦＭ６１０５。方法：利用ＧＦＰ作为报告基因，从携带ｇＷｉｚ⁃ＧＦＰ质粒的大肠杆菌中提取质粒，将ｇＷｉｚ⁃ＧＦＰ质粒电转化至唾液乳杆菌ＣＣＦＭ６１０５中，构建ＧＦＰ唾液乳杆菌。结果：ＰＣＲ产物电泳结果显示约在７５０ｂｐ处出现明亮条带，ＰＣＲ反应成功；在１８００Ｖ电压下的菌落荧光暗沉；在２４００Ｖ电压下的菌落荧光致密明亮；在２２００Ｖ、２６００Ｖ电压下菌落荧光偏暗；各代重组菌的ＧＦＰ表达良好且无明显减弱。结论：本实验成功构建ＧＦＰ唾液乳杆菌ＣＣＦＭ６１０５且ＧＦＰ在唾液乳杆菌在稳定遗传中得到了稳定的表达。关键词：唾液乳杆菌；绿色荧光蛋白；电转化ＣｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎｏｆＧＦＰＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓＳａｌｉｖａｒｉｕｓＣＣＦＭ６１０５ＧａｏＴｏｎｇ１ＬｉＭｉｎｇｇｕｉ１ＬｉａｎｇＳｈｕｉｍｉｎｇ１ＦａｎＬｉｊｉａ１ＷａｎｇＣｈａｎｇｌｉ２∗１．ＹｏｕｊｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｆｏｒｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，ＳｃｈｏｏｌｏｆｃｌｉｎｉｃａｌｍｅｄｉｃｉｎｅＧｕａｎｇｘｉＢａｉｓｅ５３３０００；２．ＹｏｕｊｉａｎｇＭｅｄｉｃａｌＣｏｌｌｅｇｅｆｏｒｎａｔｉｏｎａｌｉｔｉｅｓ，ＭｅｄｉｃａｌｌａｂｏｒａｔｏｒｙＣｏｌｌｅｇｅＧｕａｎｇｘｉＢａｉｓｅ５３３０００Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔ，ｓｃｒｅｅｎａｎｄｉｄｅｎｔｉｆｙｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔＧＦＰＬａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓｓａｌｉｖａｒｉｕｓＣＣＦＭ６１０５．Ｍｅｔｈｏｄｓ：ｕｓｉｎｇＧＦＰａｓｔｈｅｒｅｐｏｒｔｅｒｇｅｎｅ，ｔｈｅｐｌａｓｍｉｄｗａｓｅｘｔｒａｃｔｅｄｆｒｏｍＥ．ｃｏｌｉｃａｒｒｙｉｎｇｇＷｉｚＧＦＰｐｌａｓｍｉｄ，ａｎｄｔｈｅｇＷｉｚＧＦＰｐｌａｓｍｉｄｗａｓｅｌｅｃ⁃ｔｒｏｔｒａｎｓｆｏｒｍｅｄｉｎｔｏＬ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓＣＣＦＭ６１０５ｔｏｃｏｎｓｔｒｕｃｔＬ．ｓａｌｉｖａｒｉｕｓＧＦＰ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｅｌｅｃｔｒｏｐｈｏｒｅｓｉｓ...
