顶空-气相色谱法测定枳实总...取物中的树脂残留和溶剂残留_邓双炳.pdf

：顶空气相色谱法测定枳实总黄酮提取物中的树脂残留和溶剂残留邓双炳，方礼，刘芳芳，徐滢，王章伟，刘地发，（江西青峰药业有限公司 创新天然药物与中药注射剂国家重点实验室，赣州 ；南京中医药大学 药学院，南京 ；桂林南药股份有限公司，桂林 ；暨南大学，广州 ）中图分类号：文献标志码：文章编号：（）枳实总黄酮提取物是临床上用于治疗功能性消化不良的中药在研类新药奥兰 替 胃康 片 的原料，其制备过程中用乙醇提取，并使用了 大孔吸附树脂纯化黄酮提取物。提取物及相关制剂的质量标准研究主要包括含量测定、特征图谱、溶出度等，尚无残留溶剂研究的相关报道；另从药品安全性角度考虑，根据 中药新药质量研究技术指导原则（试行）和 中华人民共和国药典 年版（简称 ）四部通则 残留溶剂测定法的要求，应对提取加工过程中引入的树脂残留、有机溶剂等进行控制。参考 一部三七总皂苷等的树脂残留方法进行优化，本工作采用顶空气相色谱法对枳实总黄酮提取物中树脂残留（正己烷、苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯等种成分）以及溶剂残留（乙醇）进行测定。试验部分仪器与试剂 型气相色谱仪；型电子分析天平。单对照品储备溶液：分别精密称取适量的正己烷、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯对照品，用（体积分数），二甲基甲酰胺溶液（空白溶剂）逐级稀释，配制成质量浓度均为 的单对照品储备溶液。同法 制 备 乙 醇、苯 的 质 量 浓 度 分 别 为 ，的单对照品储备溶液。收稿日期：基金项目：江西省科技计划项目（）通信联系人。混合对照品溶液：分别精密量取上述各单对照品储备溶液适量，用空白溶剂逐级稀释，配制成正己烷、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯质量浓度均为 ，乙醇、苯的质量浓度分别为 ，的混合对照品溶液。枳实总黄酮提取物（批号 ，）；正己烷、苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、二乙烯苯、乙醇、甲苯、苯乙烯对照品的纯度均大于。，二甲基甲酰胺为分析纯；试验用水为超纯水。仪器工作条件顶空条件顶空平衡温度，平衡时间 。色谱条件 色 谱 柱（，）；传输线温度 ，进样环温度 ，进 样 口 温 度 ；载 气 为 氮 气，流 量 ；分流进样，分流比为:，进样量。柱升温程序：初始温度，保持 ；以 的速率升温至 ，保持 ；以 的速率升温至 ，保持 ；以 的速率升温至 ，保持 。氢火焰离子化检测器，检测器温度 。试验方法取枳实总黄酮提取物粉末约，精密称定，置于 顶空瓶中，用空白溶剂 溶解，密封，摇匀，即为供试品溶液，按照仪器工作条件进行测定。邓双炳，等：顶空气相色谱法测定枳实总黄酮提取物中的树脂残留和溶剂残留结果与讨论色谱行为取空白溶剂、混合对照品溶液，分别按仪器工作条件进行测定，记录色谱图，见图。（）空白溶剂（）混合对照品溶液正己烷；乙醇；苯；甲苯；乙苯；对二甲苯；间二甲苯；邻二甲苯；苯乙烯；二乙烯苯（峰）图空白溶剂和混合对照品溶液的色谱图 结果显示：混合对照品溶液中各成分出峰顺序依次为正己烷、乙醇、苯、甲苯、乙苯、对二甲苯、间二甲苯、邻二甲苯、苯乙烯、二乙烯苯（呈现峰），且各待测成分之间的分离度均大于；空白溶剂对上述成分检测无干扰。标准曲线、检出限和测定下限取适量的单对照品储备溶液，用空白溶剂逐级稀释，配制成正己烷的质量浓度分别为 ，乙 醇 的 质 量 浓 度 分 别 为 ，苯的质量浓度分别为 ，甲苯的质量浓度分别为 ，乙苯的质量浓度分别为 ，对二甲苯的质量浓度分别为 ，间二甲苯的质量浓度分别为 ，邻二甲苯的质量浓度分别为 ，苯乙烯的质量浓度分别为 ，二 苯 乙 烯 的 质 量 浓 度 分 别 为 ，的对照品溶液系列。按照仪器工作条件测定，以目标物的质量浓度为横坐标，以对应的峰面积为纵坐标绘制标准曲线，得到线性回归方程、线性范围、相关系数见表。取适量的各单对照品储备溶液，用空白溶剂逐级稀释，按仪器工作条件进行测定，记录色谱图。以倍信噪比对应质量浓度计算检出限，以 倍信噪比对应质量浓度计算测定下限，结果见表。表线性参数、检出限和测定下限 ，化合物线性范围（）线性回归方程相关系数检出限（）测定下限（）正己烷 .乙醇 .苯 .甲苯 .乙苯 .对二甲苯 .间二甲苯 .邓双炳，等：顶空气相色谱法测定枳实总黄酮提取物中的树脂残留和溶剂残留表（续）化合物线性范围（）线性回归方程相关系数检出限（）测定下限（）邻二甲苯 .苯乙烯 .二乙烯苯 .精密度试验取枳实总黄酮提取物，精密称定，置于 顶 空 瓶 中，再 精 密 量 取 混 合 对 照 品 溶 液，置于顶空瓶中，使溶解，密封，作为加标供试品溶液，制备份，按照仪器工作条件测定其中树脂残留和溶剂残留，并计算测定值的相对标准偏差（），结果见表。回收试验精密称取枳实总黄酮提取物，置于 顶空瓶中，分别进行个浓度水平的加标试验，每个浓度水平制备份，按照仪器工作条件测定，计算回表精密度试验结果（）（）化合物测定值 化合物测定值 正己烷 对二甲苯 乙醇 间二甲苯 苯 邻二甲苯 甲苯 苯乙烯 乙苯 二乙烯苯 收率，结果见表。表回收试验结果 化合物本底值加标量回收率化合物本底值加标量回收率正己烷 对二甲苯 乙醇 间二甲苯 苯 邻二甲苯 甲苯 苯乙烯 乙苯 二乙烯苯 样品分析取 批 枳 实 总 黄 酮 提 取 物 中 试 样 品（批 号 ，）适量，按试验方法制备供试品溶液，按仪器工作条件测定其中树脂残留和溶剂残留。结果显示，批样品中检出溶剂乙醇的质量分数分别为，其他树脂残留均未检出。本工作采用优化后的顶空气相色谱法对枳实总黄酮提取物中树脂残留（种成分）以及溶剂残留（乙醇）进行测定。经方法学验证，结果表明方法专属性、精密度、准确度等均符合要求，可用于测定枳实总黄酮提取物中的树脂残留和溶剂残留。邓双炳，等：顶空气相色谱法测定枳实总黄酮提取物中的树脂残留和溶剂残留参考文献：潘赟，闫欣，孙健民，等 以多潘立酮片为阳性对照评价奥兰替胃康片治疗功能性消化不良的临床疗效研究中国药物与临床，（）：黄爱华，迟玉广，曾元儿，等 枳实黄酮对功能性消化不良大鼠胃 肠 动力的影响 中 药 新 药 与 临 床 药 理，（）：吴震宇，张声生，卢小芳，等 枳实总黄酮苷提取物对功能性消化不良大鼠近端胃适应性的影响中国中西医结合消化杂志，（）：李培彩，张声生，吴震宇，等枳实总黄酮苷对功能性消化不良模型大鼠内脏敏感性的影响 北京中医药大学学报，（）：李志勇，程帆，刘地发，等 法同时测定奥兰替胃康片中柚皮苷和新橙皮苷的含量 中国药师，（）：韦锦宁，程帆，王章伟，等枳实总黄酮苷提取物特征图谱研究 江西中医药大学学报，（）：王章伟，王振，邱小燕，等 法同时测定枳实总黄酮苷提取物中 个香豆素类成分含量 江西中医药，（）：刘芳芳，王章伟，邓双炳，等创新中药奥兰替胃康片体外溶出行为探索 中国新 药 杂 志，（）：（上接第 页）三、青年编委权利）入选后颁发青年编委聘用证书，每届聘期为年（每年根据工作情况进行调整）；）可在本刊开设专题或专栏，作为专题或专栏主编组稿约稿；）可在本刊官方媒体平台上发布青年编委信息，宣传其研究成果，提升个人学术影响力；）可享受更优质的学术出版服务，本人撰写或推荐的优秀稿件经同行评审后可优先发表；）贡献突出的青年编委可优先聘为本刊下一届编委会编委。四、青年编委职责）在国内外科研学术交流活动中，积极宣传和推介本刊；）积极参与期刊专题策划，主动组织专题报道，组稿、约稿高水平稿件，每年约稿、组稿不少于篇；）积极推动期刊质量建设，主动将有创新性的高水平原创成果发表在本刊，每年以第一或通信作者向本刊投稿不少于篇；）积极为本刊审稿；）积极参加本刊青年编委会会议和本刊主办或协办的各类学术活动；）积极为本刊的发展与推广出谋献策。五、报名与遴选流程）邮箱报名填写 青年编委自荐（推荐）登记表，发送至邮箱 。邮件主题为“青年编委报名姓名”。报名截止日期为 年 月 日。青年编委自荐（推荐）登记表 可至网站 或 理化检验化学分册 公众号下载。）遴选流程申请材料初筛主编、编委会遴选邮件或微信通知召开青年编委成立工作会颁发聘书。）咨询电话 （微信同号）；。理化检验化学分册 编辑部