基于电子舌技术分析多花黄精炮制过程中“味”的变化_曹林.pdf

2023年2月第29卷第2期February.2023 Vol.29 No.2多花黄精（Polygonatum cyrtonema Hua）为百合科黄精属的多年生草本植物，根状茎肥厚。黄精性平、味甘，具有补气养阴、健脾润肺之效1。生黄精有麻舌感，且刺激咽喉，服用时必须通过炮制除去其刺激性。黄精的炮制方法众多，但使用最为广泛的当属“九蒸九晒”这一炮制方法，即通过反复蒸晒从而增其厚重之气，克其湿腻之性，强其补益之效2-3。传统上基于电子舌技术分析多花黄精炮制过程中“味”的变化*曹林，刘福，韩丽（川北医学院附属医院，四川南充637000）摘要目的：探究多花黄精从生品、一蒸一晒至九蒸九晒炮制过程中“味”的变化，将处于不同炮制阶段中多花黄精的味道差异进行客观化表达，以期为九蒸九晒黄精的真伪鉴定提供依据。方法：利用电子舌技术对多花黄精生品、黄精一蒸一晒至九蒸九晒炮制过程中味觉值进行测定，采集味觉信息值和制作雷达信息图，采用酶标仪对不同炮制过程多花黄精中的多糖含量进行测定。结果：多花黄精的味道呈现主要以甜、苦、涩、鲜为主，且生品多花黄精味觉值最大，九蒸九晒多花黄精味觉值最小；随着黄精蒸晒次数的增加，多糖含量呈逐渐降低的趋势。结论：多花黄精自身的甜味、苦味、涩味、鲜味会随着炮制次数的增加而逐渐减弱，且电子舌能够准确辨识其味道。关键词多花黄精；电子舌；味觉；九蒸九晒；雷达图；多糖含量中图分类号R284.1文献标识码A文章编号1672-951X（2023）02-0050-04DOI：10.13862/43-1446/r.2023.02.010Based on Electronic Tongue Technology Analyzes the Change of Taste inProcess of Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua)CAO Lin,LIU Fu,HAN Li(Affiliated Hospital of North Sichuan Medical College,Nanchong Sichuan 637000,China)AbstractObjective:To explore the changes of taste of Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua)during processing from raw product,one-steam-one-bask to nine-steam-nine-bask,and to objectively expressthe taste differences of Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua)in different processing stages,so as toprovide a basis for the authenticity identification of nine-steam-nine-bask of Duohua Huangjing(PolygonatumCyrtonema Hua).Methods:The electronic tongue technology was used to measure the taste value of the rawproducts,one-steam-one-bask to nine-steam-nine-bask of Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua).Thetaste information value was collected and the radar information map was made.The content of polysaccharidesin Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua)in different processing processes was determined by enzymecalibration.Results:The taste of Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua)was mainly sweet,bitter,astringentand fresh,and the taste value of raw product Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua)was the largest,and the taste value of nine-steam-nine-bask of Duohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua)was the smallest.With the increase of the times of steaming and basking,the content of polysaccharide decreased gradually.Conclusion:The sweetness,bitterness,astringency and umami of Duohua Huangjing(Polygonatum CyrtonemaHua)will gradually weaken with the increase of processing times,and the electronic tongue technology canaccurately identify its taste.KeywordsDuohua Huangjing(Polygonatum Cyrtonema Hua);electronic tongue;taste;nine-steam-nine-bask;radar chart;polysaccharide content引用：曹林，刘福，韩丽.基于电子舌技术分析多花黄精炮制过程中“味”的变化J.中医药导报，2023,29(2):50-53,58.*基金项目:四川省教育厅项目（18XB0219）通信作者：韩丽，E-mail：502023年2月第29卷第2期February.2023 Vol.29 No.2黄精炮制过程中的质量评价以颜色、光泽和形态作为评判依据，达到色黑、滋润、味甜即可4。但此种评价方法受主观因素影响过大，无法建立起统一的评价指标，导致市场上一些经“九蒸九晒”的黄精质量参差不齐。因此，利用现代科技手段，对黄精炮制过程中的味道进行量化，使得评价指标客观公正，不受人为因素的影响，是当下研究者关注的一个方向。电子舌（electronic-tongue）通过模拟人的舌头对样品溶液进行分析、识别和判断，采用多元统计方法对数据进行分析，可达到对样品的识别和分类5。利用电子舌技术能够直接输出样品溶液的酸味、甜味、苦味、涩味、鲜味、咸味、苦味回味、涩味回味、丰富度（鲜味回味）等味觉数值，具有客观性强、重复性好、检测响应快、标准化控制、对人体健康无危害等优点6。目前电子舌技术已被广泛应用于食品检测领域。药食同源中药材来源于动植物和部分矿物，故将电子舌应用于评价中药味道有良好的可行性7-8。本研究利用电子舌技术对多花黄精“九蒸九晒”过程中“味”的变化进行研究，依据味觉传感器响应特征区分不同蒸晒次数的黄精炮制品，并结合酶标仪测定多花黄精“九蒸九晒”过程中多糖含量的变化，从而客观描述多花黄精炮制过程中“味”的变化规律。1仪器与材料1.1实验仪器SA-402B型电子舌（日本Insent公司），包括实验中使用AE1传感器、AAE传感器、CTO传感器、COO传感器、CAO传感器、GL1传感器；ME204E型电子分析天平（上海梅特勒-托利多仪器有限公司)；PW135型中草药粉碎机（天津泰斯特仪器有限公司）；101-0AB型电热鼓风干燥箱（北京中兴伟业仪器有限公司）；imark酶标仪（美国伯乐公司）；5810高速离心机（德国艾本德公司）。1.2实验材料20%黄酒（绍兴太和酒业有限公司）；浓盐酸（Sigma-aldrich公司，批号：H1785）；氯化钾（KCl）（批号：20201104）、酒石酸（批号：20200811）、无水乙醇（批号：20200921）、氢氧化钾（KOH）（批号：20200621）均购自湖南民达医药有限公司；水为纯化水；多花黄精（批号：20200601）购于湖南邵阳，经我院中药资源中心王智副教授鉴定为百合科植物多花黄精Polygonatum Cyrtonema Hua.的干燥根茎。2方法2.1样品处理方法2.1.1样品炮制多花黄精原药材用水淋洗5 min，经切药机切片，用黄酒拌匀，置炖药罐内隔水加热2 h，至酒吸尽，取出。将多花黄精药材置于鼓风干燥箱中，70 鼓风干燥24 h，如此反复9次，蒸制内外黑色滋润、味甜无麻味为度。采集黄精生品至“九蒸九晒”多花黄精共10个样品，各样品信息见表1。表 1多花黄精样品信息表样品编号炮制方法样品编号炮制方法PC01黄精生品PC06五蒸五晒PC02一蒸一晒PC07六蒸六晒PC03二蒸二晒PC08七蒸七晒PC04三蒸三晒PC09八蒸八晒PC05四蒸四晒PC10九蒸九晒2.1.2样品制备取多花黄精生品、一蒸一晒多花黄精、二蒸二晒多花黄精、三蒸三晒多花黄精、四蒸四晒多花黄精、五蒸五晒多花黄精、六蒸六晒多花黄精、七蒸七晒多花黄精、八蒸八晒多花黄精、九蒸九晒多花黄精各10 g。热水浸提2次，第一次加水100 mL，提取时间1.5 h；第二次加水80 mL，提取时间1.0 h；合并2次提取液并且4 000 r/min离心10 min，过滤上清液，即得。2.2电子舌分析方法9-112.2.1正、负极清洗液配制（1）正极：精密称定7.46 g氯化钾，用500 mL纯化水搅拌溶解，然后准确加入300 mL无水乙醇溶液，边搅拌边加入精密称定的0.56 g氢氧化钾，溶解完毕后，转移到1 000 mL的容量瓶，定容至刻度。（2）负极：准确量取300mL无水乙醇，与500mL纯化水震荡混合，然后加入8.3mL的浓盐酸，搅拌混合后转移到1 000mL的容量瓶，定容至刻度。2.2.2参比液配制精密称定2.24 g氯化钾和0.045 g酒石酸，用500mL纯化水溶解，转移到1000mL的容量瓶，定容至刻度。2.2.3电子舌测试方法各传感器安装完成后首先在清洗液中清洗90 s，然后用参比液清洗2次，传感器在平衡位置归零30 s，达到平衡条件后，开始测试，测试30 s；在两组参比液中分别短暂清洗3 s，传感器插入新的参比液中测试回味30 s循环测试4次，去掉第一次循环，取后3次平均数据作为测试结果。每次清洗、平衡和测试回味的液体均分布在不同样品杯中。2.3黄精多糖测定方法2.3.1对照品溶液制备配制质量浓度为1 mg/mL葡萄糖对照品溶液：取葡萄糖对照品100 mg，精密称定，置于100 mL容量瓶中，加水溶解并定容至刻度，摇匀，即得。2.3.2供试品溶液制备精密称定PC01PC10多花黄精样品各20.00 g，粉碎，加入100 mL纯化水浸泡0.5 h。100 恒温超声1.5 h，过滤，重复提取1次，合并滤液，4 000 r/min离心10 min，取上清液，减压浓缩至一定体积，向浓缩液中加4倍量无水乙醇，静置12 h后4 000 r/min离心10 min，弃去上清液，沉淀用少量水溶解，用Sevage法（正丁醇-氯仿的体积比为14）除蛋白，取上清液，浓缩至100 mL，得到黄精多糖提取液。黄精多糖提取液稀释20倍，得黄精多糖供试品溶液。2.3.3线性关系考察葡萄糖对照品溶液依次稀释至0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL，分别吸取各葡萄糖对照品溶液2 mL于10 mL离心管中，加入5%苯酚水溶液（现配现用）1 mL，加入浓硫酸5 mL，静置10 min后摇匀，3