天津中医药大学学报JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine第42卷第1期2023年2月Vol.42No.1Feb.2023·实验研究·摘要:[目的]探讨丹蛭降糖胶囊调控β-链蛋白(β-catenin蛋白)在高磷诱导的糖尿病大鼠下肢血管内皮细胞钙化中的作用。[方法]分离糖尿病大鼠和健康大鼠下肢股动脉内皮细胞进行体外培养,分为空白组、高磷组、丹蛭组、氯化锂(LiCL)组;调整稳转内皮细胞(EC细胞)状态,除空白组外,其余各组加入高磷培养基(含有10mmol/Lβ-甘油磷酸盐、50mg/mL维生素C和1×10-7mol/L胰岛素)诱导细胞钙化,同时丹蛭组和LiCL组给予10%含药血清(丹蛭降糖胶囊)干预,48h后LiCL组给予20mmol/LLiCl继续干预48h。采用DNA断裂的原位末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡,噻唑蓝(MTT)法检测细胞增殖,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、β-catenin、碱性磷酸酶(ALP)、骨桥蛋白(OPN)、骨形态发生蛋白2(BMP2)、卷曲同源物1(FZD1)mRNA表达水平;激光共聚焦显微镜观察细胞β-catenin蛋白定位。[结果]与空白组比较,高磷组细胞凋亡数、钙离子含量、α-SMA、β-catenin、ALP、OPN、BMP2及FZD1表达量增多,细胞增殖数量减少(P<0.01);激光共聚焦显微镜观察结果表明β-catenin多表达于细胞核内。与高磷组比较,丹蛭组细胞凋亡数、钙离子含量、α-SMA、β-catenin、ALP、OPN、BMP2及FZD1表达量减少,细胞增殖数量增多(P<0.01),激光共聚焦显微镜下观察显示细胞核内β-catenin表达量减少。与丹蛭组比较,LiCL组细胞凋亡数、钙离子含量、α-SMA、β-catenin、ALP、OPN、BMP2及FZD1表达增加,细胞增殖数量减少(P<0.01),激光共聚焦显微镜下观察显示细胞核内β-catenin表达量增加。[结论]丹蛭降糖胶囊可以减轻糖尿病大鼠下肢内皮细胞钙化,机制是通过下调β-catenin在细胞核内的表达,减少β-catenin蛋白合成,抑制下游细胞表型基因的转录,达到防治内皮细胞血管钙化的目的。关键词:糖尿病;丹蛭降糖胶囊;β-catenin;内皮细胞钙化中图分类号:R285.5文献标志码:A文章编号:1673-9043(2023)01-0081-06丹蛭降糖胶囊调控β-catenin蛋白在高磷诱导的糖尿病大鼠下肢血管内皮细胞钙化中的作用*倪英群1,方朝晖1,李居一1,施慧2,余丹丹2,刘光菊2,陈文娟2(1.安徽中医药大学第一附属医院,合肥230031;2.安徽中医药大学,合肥230038)*基金项目:国家自然科学基金资助项目(82274468);安徽省...