第４３卷，第３期光谱学与光谱分析Ｖｏｌ．４３，Ｎｏ．３，ｐｐ８９０－８９６２０２３年３月ＳｐｅｃｔｒｏｓｃｏｐｙａｎｄＳｐｅｃｔｒａｌＡｎａｌｙｓｉｓＭａｒｃｈ，２０２３多光谱法、分子对接模拟和生物膜干涉研究槲皮素与小窝蛋白－１的相互作用侯倩宜１，２，董壮壮１，２，原红霞１，２＊，李青山１，２＊１．山西中医药大学中药与食品工程学院，山西晋中０３０６１９２．山西中医药大学，基于炎性反应的重大疾病创新药物山西省重点实验室，山西晋中０３０６１９摘要小窝蛋白－１（ＣＡＶ－１）在动脉粥样硬化等心血管疾病的发生发展中发挥关键作用。为了解槲皮素与ＣＡＶ－１的相互作用，在模拟生理环境和不同温度条件下，采用多光谱法、同源模建、分子对接模拟和生物膜（ＢＬＩ）技术进行研究。荧光猝灭数据结果显示，猝灭速率常数Ｋｑ值远大于２．０×１０１０Ｌ·ｍｏｌ－１·ｓ－１，且猝灭常数ＫＳＶ随温度升高而降低，证明槲皮素和ＣＡＶ－１相互作用的猝灭过程为静态猝灭；而热力学参数，焓变ΔＨ＜０、熵变ΔＳ＜０且ΔＧ＜０，表明二者的结合过程是自发、焓驱动的，其相互作用的主要类型为范德华力和氢键作用。通过对槲皮素与ＣＡＶ－１相互作用的同步荧光光谱和三维荧光光谱分析，随着槲皮素的加入，ＣＡＶ－１的荧光强度逐渐降低，证明二者之间发生了相互作用。进一步分析发现，同步荧光光谱中槲皮素使ＣＡＶ－１中的芳香族氨基酸残基的最大发射波长发生了轻微红移，周围的微环境极性增强，亲水性增加，表明槲皮素的加入使ＣＡＶ－１的蛋白质构象发生了改变。紫外－可见光谱结果显示，ＣＡＶ－１与槲皮素之间形成了一个基态复合物，进一步证实了ＣＡＶ－１与槲皮素之间的静态猝灭机制。采用同源模建技术建立ＣＡＶ－１的Ｘ射线晶体结构模板。分子对接模拟结果显示两者结合力为－７．３７２ｋｃａｌ·ｍｏｌ－１。对接结果表明槲皮素结合点位于由ＧＬＵ２０，ＡＳＰ７０，ＶＡＬ１６和ＡＲＧ１９等氨基酸形成的活性口袋中，与ＧＬＮ２１，ＶＡＬ１６和ＡＲＧ１９位点产生范德华力作用，与ＧＬＵ２０，ＡＳＰ７０位点存在氢键作用力。各种作用力影响了ＣＡＶ－１的微环境变化，导致其荧光猝灭，是参与复合物形成的关键因素。最后，利用ＢＬＩ技术对槲皮素和ＣＡＶ－１的结合进行定量研究，研究结果显示，二者具有良好的的结合活性，结合解离平衡常数ＫＤ值为２．５０×１０－５ｍｏｌ·Ｌ－１；其响应信号值随槲皮素浓度的...
