大豆科学SoybeanSciencehttp://ddkx．haasep．cn2023，42(2):188-193DOI:10．11861/j．issn．1000-9841．2023．02．0188大豆GmGolS基因高温胁迫应答及启动子活性分析张军1，翟莹2，邱爽2，尹珺伊1，张艳1，金振华1，张勇3，王丽坤1(1．黑龙江省农业科学院畜牧兽医分院，黑龙江齐齐哈尔161005;2．齐齐哈尔大学生命科学与农林学院，黑龙江齐齐哈尔161006;3．黑龙江省农业科学院克山分院，黑龙江齐齐哈尔161606)摘要:肌醇半乳糖苷合成酶(GolS)是棉子糖系列寡糖(ＲFOs)生物合成途径中的关键酶。为探究大豆GmGolS基因的高温胁迫调控机制，通过实时荧光定量PCＲ检测GmGolS在高温胁迫下的表达量，通过PCＲ从大豆基因组DNA中扩增GmGolS基因启动子序列，将其连接到植物表达载体pCAMBIA1301上并转化烟草，通过GUS组织化学染色和实时荧光定量PCＲ检测GmGolS启动子的高温诱导启动活性。结果表明:高温胁迫可以强烈诱导GmGolS的表达。1739bp的GmGolS启动子序列中含1个生长素响应元件、1个干旱诱导的MYB转录因子结合位点、2个厌氧诱导元件、1个防御和胁迫响应元件、1个脱落酸响应元件、1个茉莉酸响应元件和1个缺氧诱导元件。成功获得3棵GmGolSP转基因烟草植株。GmGolS启动子的活性可以被高温胁迫诱导。关键词:大豆;GmGolS;诱导型启动子;肌醇半乳糖苷合成酶;高温胁迫收稿日期:2022-10-18基金项目:齐齐哈尔市科技计划创新激励项目(CNYGG-2022021);黑龙江省省属高等学校基本科研业务费科研项目(145109506)。第一作者:张军(1982—)，男，硕士，助理研究员，主要从事分子遗传育种研究。E-mail:307906439@qq．com。通讯作者:翟莹(1982—)，女，博士，教授，主要从事植物分子遗传育种研究。E-mail:fairy39809079@126．com。ＲesponseofSoybeanGmGolSGenetoHeatStressandPromoterActivityAnalysisZHANGJun1，ZHAIYing2，QIUShuang2，YINJun-yi1，ZHANGYan1，JINZhen-hua1，ZHANGYong3，WANGLi-kun1(1．BranchofAnimalHusbandryandVeterinary，HeilongjiangAcademyofAgriculturalSciences，Qiqihar161005，China;2．CollegeofLifeScienceandAgro-Forestry，QiqiharUniversity，Qiqihar161006，China;3．KeshanBranch，HeilongjiangAcademyofAgriculturalSciences，Qiqihar161606，China)Abstract:Galactinolsynthase(GolS)isakeyenzymeinthebiosynthesispathwayofraffinosefamilyoligosaccharides(ＲFOs)．InordertoexploretheregulatorymechanismofsoybeanGmGolSunderheats...
