冠状病毒引发缅因猫感染猫传染性腹膜炎的诊断与治疗_张永富.pdf

202301 当代畜禽养殖业组稿Email：作者简介：张永富（1984），男，硕士，副教授，研究方向为动物传染病的发病机理及防治。冠状病毒引发缅因猫感染猫传染性腹膜炎的诊断与治疗张永富1，张 恒2，高爱芸3，刘 洋2，贺 莉2，鲍 凯2（1.内蒙古包头广播电视大学，内蒙古 包头014010；2.内蒙古包头远洋刘洋动物疾病医院，内蒙古 包头014010；3.内蒙古包头市昆区农牧局，内蒙古 包头014010）摘要：为确诊一例4岁龄缅因猫所患疾病，根据病猫临床症状进行分析，对病猫进行了DR影像、血常规、血清生化、李凡他试验、fSAA检测以及PCR-荧光探针法核酸检测等实验室检查，并根据综合诊断结果进行治疗。结果表明：该猫所患疾病为由冠状病毒-I感染引发的猫传染性腹膜炎。采用注射三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）治疗为主，其他对症用药治疗为辅的治疗措施。治疗后PCR-荧光探针法核酸复检冠状病毒-I为阴性，治疗效果良好，猫咪痊愈出院。关键词：冠状病毒；猫；传染性腹膜炎；GS-441524中图分类号：S858.293文献标识码：A文章顺序编号：1005-5959（2023）01-059-04猫 传 染 性 腹 膜 炎（feline infectious peritonitis，FIP）是由猫冠状病毒（feline coronavirus，FCoV）所引发的一种进行性、高度致死性传染病。FCoV属于冠状病毒-I的一个亚种，单股正链RNA病毒。FCoV分为2种生物型，即低致病性的猫肠道冠状病毒（felineenteric coronavirus，FECV）和高致病性的猫传染性腹膜炎病毒（feline infectious peritonitis virus，FIPV）1。FCoV在猫群中广泛流行，而由FCoV突变导致的FIP是猫死亡的主要原因之一，发病机理较为复杂，目前没有有效疫苗2。FIPV可感染各年龄段的猫，12岁的猫以及大于11岁的老龄猫发病最多3。不同品种、性别的猫对该病的易感性无明显差异。该病可经消化道感染或经媒介昆虫传播，猫的粪尿中含有大量病毒，也可经胎盘垂直传播。临床上主要表现为渗出型（湿型传染性腹膜炎）和非渗出型（干型传染性腹膜炎）2种类型4-5。有研究表明，超过95%的患猫在诊断后数天至数月内死亡6，其高致死率对猫的健康造成巨大威胁。笔者于2022年2月接诊1例缅因猫患猫传染性腹膜炎，对其进行了准确的诊断和治疗。该病例转归较好，跟踪半年未再复发，挽救了缅因猫的生命，挽回了主人的经济和精神损失，现报告如下。1病例介绍主诉：缅因猫，4月龄，雄性，食欲下降、精神萎靡、消瘦、掉毛严重，未接种疫苗。服用益生菌效果不明显，患猫腹围逐渐增大、呼吸急促，故前来就诊。2诊断2.1临床检查体温40.2，体温升高，呼吸频率为90次/min，脉搏频率为175次/min，腹围增大明显，按压腹部有波动性液体，怀疑是腹水，需进一步做实验室检查。2.2DR影像、血常规、生化检查动物专用数字化X射线摄影系统（派宠DR-X2）检查猫全身正位和侧位，重点检查腹部是否有异常影像。对猫前肢静脉采血，用兽用全自动血液细胞分析仪对血样进行检测。静脉血离心分离血清后，用全自动干式生化分析仪对血清进行检测。2.3fSAA检查、李凡他实验检查fSAA检查采用猫血清淀粉样蛋白A（fSAA）快速检测试剂盒（荧光免疫层析法）。将猫静脉血离心分离血清后，吸取5 L加入稀释液中充分混合，混匀后吸取100L混合液加入检测卡加样孔内，检测卡插入仪器卡槽内5 min后读取结果。腹腔抽取腹水，进行李凡他实验。2.4冠状病毒-I型核酸检测（PCR荧光探针法）将猫静脉血离心分离血清后，采用冠状病毒-I型宠物病原体核酸检测试剂盒（PCR荧光探针法）进行操作。检验原理为：在高效反转录酶的作用下，以RNA为模板，经一步反应合成与RNA模板互补的cDNA链。在Taq酶的作用下，以DNA为模板，经高温变性、中温退火及延伸的循环，使特异性目的片段的拷贝数放大。经荧光标记的特异性探针与扩增的目的片段杂交，利用Taq聚合酶的53外切活性，使荧光探针的报告基团与淬灭基团分离，发出特异性荧光信号，利用荧光PCR仪检测特异性荧光信号，根据样品Ct值的大小及扩增曲线的形成情况判定结果。诊疗报告59DOI:10.14070/ki.15-1150.2023.01.016当代畜禽养殖业 202301组稿Email：诊疗报告3结果与分析3.1DR影像、血常规、生化检查DR检查腹部正、侧位，结果显示患猫腹部有均匀高密度白色显影，呈毛玻璃样，除胃肠外，其他脏器较难分辨，表明存在腹腔积液（图1），胸部正常无积液。血常规检查结果显示，白细胞、中性粒细胞、中性粒细胞百分比及平均红细胞血红蛋白浓度升高，嗜酸性粒细胞、淋巴细胞百分比、单核细胞百分比与嗜酸性粒细胞百分比下降，其他各项指标均正常（表1）。血常规结果提示，病猫存在局部感染及全身性感染，机体存在炎症反应。血清生化检查结果显示，TP、GLOB升高，A/G比降低（表2）。TP、GLOB升高，提示机体有炎症，猫可能患有传染性腹膜炎，白蛋白与球蛋白的比值（A/G比）对于猫传染性腹膜炎有诊断价值，而且A/G小于0.4时，高度怀疑猫患传染性腹膜炎7，具有临床诊断意义。图1DR检查结果表1血常规检查结果检测项目 检测结果 参考范围 提示 白细胞/(10?/L)19.94 5.5019.50 中性粒细胞/(10?/L)18.28 3.1212.58 淋巴细胞/(10?/L)1.45 0.737.86 单核细胞/(10?/L)0.19 0.071.36 嗜酸性粒细胞/(10?/L)0.02 0.061.93 嗜碱性粒细胞/(10?/L)0.00 0.000.12 中性粒细胞百分比/%91.7 38.080.0 淋巴细胞百分比/%7.3 12.045.0 单核细胞百分比/%0.9 1.08.0 嗜酸性粒细胞百分比/%0.1 1.011.0 嗜碱性粒细胞百分比/%0.0 0.01.2 红细胞/(10?/L)7.49 4.6010.20 血红蛋白/(g/L)110 85153 红细胞压积/%30.0 26.047.0 平均红细胞体积/fL 40.1 38.054.0 平均红细胞血红蛋白含量/pg 14.7 11.818.0 平均红细胞血红蛋白浓度(g/L)366 290360 红细胞分布宽度变异系数/%18.5 16.023.0 红细胞分布宽度标准差/fL 30.8 26.443.1 血小板/(10?/L)361 100518 平均血小板体积/fL 12.8 9.916.3 血小板分布宽度 14.5 12.017.5 血小板压积/%0.461 0.0900.700 60202301 当代畜禽养殖业组稿Email：表2血清生化检查结果测试项目 检测结果 参考范围 提示 TP/(g/L)106 5072 ALB/(g/L)27 2640 GL0B/(g/dL)7.9 1.63.7 ALB/GLB 0.3 0.71.9 ALP/(U/L)26 1383 ALT(GTP)/(U/L)32 1778 3.2fSAA检测、李凡他实验结果猫血清淀粉样蛋白A（fSAA）检测数据为10.3 mg/L。根据试剂盒判定标准：10 mg/L为明显炎症，结果提示猫有炎症。李凡他试验结果为阳性，表明该猫腹腔积液为渗出液。3.3冠状病毒-I型核酸检测结果当FAM检测通道有典型S形扩增曲线，且Ct值38时，结果判断为阳性，反之无典型S形扩增曲线，即无Ct值或Ct值38时，结果判断为阴性。冠状病毒-1型宠物病原体核酸检测结果显示，扩增曲线明显，Ct值37.15，判定为阳性（图2）。图2冠状病毒-I型核酸检测结果4治疗及转归治疗原则以治疗原发病为主，防止继发感染及提高机体免疫力为辅，对症治疗为消炎。使用三磷酸核苷竞争性抑制剂（GS-441524）皮下注射治疗原发病FIP，同时配合干扰素协同抵抗病毒。FIP导致机体免疫力低下，容易受到其他病原体的侵入而引起继发感染，氨苄西林钠消炎、防止继发感染。静脉注射复方氨基酸以补充能量，同时皮下注射黄芪多糖，帮助猫咪快速提升免疫力（表3）。表3治疗措施用药目的 药物 用法与用量 抗病毒 GS-411524 干扰素 皮下注射 2.5 mL,连用 42 d 干扰素 100 万单位,连用 7 d 消炎、防止继发感染 氨苄西林钠 皮下注射 150 mg,2 次/d,连用 7 d 补充能量 提高免疫力 复方氨基酸 黄芪多糖 静脉注射 10%葡萄糖 40 mL+氨基酸 40 mL,连用 7 d 皮下注射 0.3 mL,连用 14 d 治疗7 d后，患猫食欲好转、精神状态逐渐恢复。治疗10 d后，精神状态、食欲恢复正常。治疗14 d后，腹水明显减少，血常规、生化各项指标恢复正常范围。治疗21 d后，腹水消失。治疗35 d后，PCR-荧光探针法核酸 复 检，Ct值0，结 果 为 阴性（图3），GS-411524继续使用7 d，予以巩固。经过42 d的精心治疗，猫咪康复出院，治疗效果良好。跟踪病例6个月，健康无异常，预后良好。5讨论FIP是猫重要的致死性传染病之一，主要是由猫冠状病毒变异后引起的，对猫的健康造成巨大威胁。正常情况下，巨噬细胞在炎症因子的引导下会吞噬炎症区域的感染组织，把病原体通过特殊结构予以包围，用消化酶将病原体消化掉。冠状病毒突变后进入血液，不会被巨噬细胞消灭，而且可以继续复制，促使巨噬细胞分泌多量炎性物质，炎性物质聚集更多的单诊疗报告61当代畜禽养殖业 202301组稿Email：诊疗报告核细胞，同时损伤血管上皮、漏出许多蛋白和液体。炎症不断加重，巨噬细胞不断聚集，血管不断损伤，逐渐形成血管周围的肉芽肿性病变以及黄色黏稠积液，引起胸腔或腹腔积液，出现典型的猫传染性腹膜炎。随着对该病的不断研究，抗病毒药GS-441524有较好的疗效8。GS-441524是临床治疗中较为有效的靶向抗病毒药，它对多种RNA病毒具有强大的抗病毒活性。研究表明，GS-441524的活性形式通过干扰病毒编码过程，抑制RNA聚合酶介导的转录，导致新生病毒转录提前终止，便可阻断病毒的合成9。GS-441524对FIP（干性和湿性）治疗效果更加理想和可靠10，使用该药治疗1周后患猫的临床症状得到明显的改善11。该病例患病猫主人及时就诊为猫的存活争取了时间，经综合诊断，该病例为渗出性（湿性）猫传染性腹膜炎，治疗过程中使用GS-411524为主，配合应用干扰素。干扰素主要作用是其进入机体后，与细胞表面受体结合产生抗病毒蛋白，抑制病毒增殖。氨苄西林钠用于消炎、防止继发感染。由于该患猫蛋白流失，进行了静脉补液，氨基酸为其提供能量。黄芪多糖具有益气固本、诱导产生干扰素、调节机体免疫功能及促进抗体形成等良好功效。通过综合性的治疗，起到了良好的效果。虽然目前还没有针对FIP的疫苗，但临床上猫常用的妙三多疫苗应按时接种，以提高机体免疫力，未接种疫苗的猫咪避免外出到处乱走，以免感染病原体而发病。同时，要给猫咪创造良好的生活环境，控制养猫数量，不要轻易改变猫的生活环境，及时清理猫舍粪便，搞好猫舍卫生，定期做好消毒工作。参考文献：1 TEKES G,THIEL H J.Feline coronaviruses：pathogenesis offelineinfectiousperitonitisJ.Advances in Virus Research,2016（96）：193-218.2高芦兰.猫传染性腹膜炎的临床调查和治疗效果分析D.呼和浩特：内蒙古农业大学，2021.3中国农业科学院哈尔滨兽医研究所.动物传染病学M.北京：中国农业出版社，2008.4尹伊娅，刘晓雅，王朝好，等.猫传染性腹膜炎研究进展J.畜牧兽医学报，2020，51(5)：933-942.5 FELTEN S,HARTMANN K.Diagnosis of feline infectiousperitonitis:Areviewofthecurrentliterat