宫颈机能不全孕妇阴道微生物...特征及其与早产的相关性研究_邓洪.pdf

中国现代医学杂志China Journal of Modern MedicineVol.33 No.7Apr.2023第 33 卷 第 7 期2023 年 4 月宫颈机能不全孕妇阴道微生物菌群特征及其与早产的相关性研究*邓洪1，唐冬梅1，魏璐1，刘丹丹1，邓耀2，罗丹1电子科技大学医学院附属妇女儿童医院（成都市妇女儿童中心医院）1.产科，2.检验科，四川 成都 610091摘要：目的探讨宫颈机能不全孕妇阴道微生物菌群特征及其与早产的关系。方法选取 2017 年1月2022年1月电子科技大学医学院附属妇女儿童医院收治的249例宫颈机能不全孕妇作为研究组，另选取同期该院97例健康孕妇作为对照组。检测并比较两组孕妇孕晚期阴道微生物菌群。多因素Logistic逐步回归分析宫颈机能不全孕妇阴道微生物菌群特征与早产的关系。结果研究组的厚壁菌门相对丰度低于对照组（P 0.05）。研究组的乳酸菌属相对丰度低于对照组（P 0.05），阴道加德纳菌属、普雷沃菌属相对丰度高于对照组（P 0.05）。研究组的卷曲乳酸菌、惰性乳酸菌、半格/格氏乳酸菌相对丰度低于对照组（P 0.05），加德纳菌相对丰度高于对照组（P 0.05）。多因素Logistic逐步回归分析结果显示：阴道pH OR=5.414（95%CI：2.228，13.158）、Chaol指数 OR=7.745（95%CI：3.187，18.822）、Shannon指数 OR=7.523（95%CI：3.096，18.284）、乳酸菌属相对丰度 OR=6.495（95%CI：2.672，15.784）、卷曲乳酸菌相对丰度 OR=6.841（95%CI：2.815，16.627）、惰性乳酸菌相对丰度OR=5.430（95%CI：2.234，13.197）是影响宫颈机能不全孕妇早产的独立因素（P 0.05）。结论宫颈机能不全孕妇阴道微生物菌群失调，其阴道pH、Chaol指数、Shannon指数、乳酸菌属、卷曲乳酸菌、惰性乳酸菌与早产风险有关。关键词：宫颈机能不全；孕妇；阴道菌群；早产中图分类号：R714.2文献标识码：ACharacteristics of vaginal microbiota in pregnant women with cervical insufficiency and its correlation with preterm birth*Deng Hong1,Tang Dong-mei1,Wei Lu1,Liu Dan-dan1,Deng Yao2,Luo Dan11.Department of Obstetrics;2.Laboratory,Womens and Childrens Hospital of University of Electronic Science and Technology of China Medical College(Chengdu Womens and Childrens Central Hospital),Chengdu,Sichuan 610091,ChinaAbstract:Objective To investigate the characteristics of vaginal microbiota in pregnant women with cervical insufficiency and its relationship with premature delivery.Methods From January 2017 to January 2022,249 pregnant women with cervical insufficiency admitted to the hospital(study group)were selected,and 97 healthy pregnant women admitted to the hospital during the same period were selected as clinical control group(control group).Vaginal microbiota was measured in the third trimester of pregnancy.The vaginal microbiota was compared 临床研究 论著DOI:10.3969/j.issn.1005-8982.2023.07.015文章编号：1005-8982（2023）07-0090-07收稿日期：2023-01-12*基金项目：四川省科技计划项目（No：21ZDYF0494）通信作者 罗丹，E-mail：；Tel：13678166676 90第 7 期邓洪，等：宫颈机能不全孕妇阴道微生物菌群特征及其与早产的相关性研究between the two groups,and the relationship between the characteristics of vaginal microbiota and preterm birth in pregnant women with cervical insufficiency was analyzed by multivariate Logistic regression.Results The relative abundance of Firmicutes in the study group was lower than that in the control group(P 0.05).The relative abundance of Lactobacillus in the study group was lower than that in the control group(P 0.05),and the relative abundance of Gardnerella and Prevotella in the study group was higher than that in the control group(P 0.05).The relative abundance of Lactobacillus crimped,Lactobacillus indolent,and Lactobacillus semiglesteri/Lactobacillus grigni in the study group was lower than that in the control group(P 0.05),and the relative abundance of Gardnerella vaginalis was higher than that in the control group(P 0.05).Multivariate stepwise Logistic regression analysis showed that vaginal pH OR=5.414(95%CI:2.228,13.158),Chaol index OR=7.745(95%CI:3.187,18.822),Shannon index OR=7.523(95%CI:3.096,18.284),lactic acid bacteria OR=6.495(95%CI:2.672,15.784),curly lactic acid bacteria OR=6.841(95%CI:2.815,16.627),inert lactic acid bacteria OR=5.430(95%CI:2.234,13.197)relative abundance was an independent factor affecting preterm birth in pregnant women with cervical insufficiency(P 0.05），具有可比性，见表 1。纳入标准：研究组符合 宫颈机能不全与宫颈环扎术临床实践指南 的诊断标准11，对照组为足月分娩的健康孕妇；单胎头位妊娠者；自然受孕者；年龄 18岁。排除标准：合并甲亢、宫颈癌等其他肿瘤疾病者；合并免疫缺陷、传染性疾病、血液系统疾病者；伴有外周神经疾病、精神性疾病、宫颈炎者；重要脏器功能障碍、医患沟通障碍者；生殖器官畸形者；胎儿发育异常或停止发育者；近1个月使用抗生素、抗病毒、抗真菌等药物者；伴有高渗昏迷、酮症酸中毒及妊娠糖尿病、妊娠高血压等妊娠并发症者；分娩结局缺失者。本研究经医院医学伦理委员会批准，患者及家属签署知情同意书。1.2方法1.2.1 资料收集 收集所有研究对象的基本资料 91中国现代医学杂志第 33 卷 及生化指标，包括年龄、孕前体质量指数、孕次、产次、婚姻状况、受教育程度、阴道清洗习惯（经常：每周 3次，偶尔：1次 每周 3次）、孕期吸烟或被动吸烟、孕期饮酒史、孕期产检次数、自然流产史、阴道出血史、早产史、分娩间隔时间、宫颈管长度、宫颈扩张程度、行紧急环扎、环扎时孕周，孕晚期血压、血糖、甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）、阴道pH、阴道微生物菌群。1.2.2 阴道微生物菌群检测 孕晚期采用无菌拭子在阴道中段以顺时针方向刮抹 5 圈，采用 Qiagen QIAamp DNA Stool Mini Kit 试剂盒（德国 Qiagen 公司）提取样本 DNA，通过电泳、qRT-PCR 法扩增 16 S rRNA V3V4 区，98 预 变 性 1 min，97 变 性30 s，52 退火 30 s，71 延伸 30 s，共 25 个循环，341正向：5-CTAGGYGRBGCAGCAG-3，806反向：5-GGACTACNACGTAGCTGAT-3，引物长度为35 bp；电泳后回收目标条带，采用 GeneJET 胶回收试剂盒（美国 Thermo Scientific 公司）回收 DNA 片段；使用高通量测序分析仪（美国 Thermofishe 公司，IonS5TM XL Ion 530 Chip 型）对 PCR 产物测序，得到约 600 bp的单端序列；DNA 提取、文库构建及测序的具体操作均委托天津诺禾致源生物信息科技有限公司，每个样本无放回抽样抽取序列，以获得菌群多样性分析标准化特征表，采用UCLUST算法获取样品多样性指标，即Chaol指数、Shannon指数12。1.2.3 随访分组 所有孕妇随访至分娩，将妊娠37周前出生记为早产，否则为足月分娩。1.3统计学方法数据分析采用 SPSS 18.0 统计软件。计量资料以均数标准差（xs）表示，比较用t 检验；计数资料以构成比或率（%）表示，比较用2检验；影响因素的分析采用多因素Logistic逐步回归分析模型。P 0.05）；研究组与对照组的厚壁菌门相对丰度比较，经t检验，差异有统计学意义（P 0.05），研究组的厚壁菌门相对丰度低于对照组。见表2。研究组与对照组的乳酸菌属、加德纳菌属、普雷沃菌属相对丰度比较，经t检验，差异有统计学意义（P 0.05）。见表3。研究组与对照组的卷曲乳酸菌、惰性乳酸菌、阴道加德纳菌、半格/格氏乳酸菌相对丰度比较，经t检验，差异有统计学意义（P 0.05）。见表4。2.2早产与足月分娩孕妇基本资料的比较研究组中早产与足月分娩孕妇的年龄、孕前体质量指数、孕次、产次、婚姻状况、受教育时表 1研究组与对照组基本资料比较（xs）组别对照组研究组t 值P 值n97249年龄/岁26.894.2827.744.041.7290.085孕前体质量指数/（kg/m2）22.421.3522.271.230.9910.322孕次2.430.342.470.360.9430.347产次1.470.251.520.231.7720.077表 2研究组与对照组孕妇阴道微生物菌群门相对丰度的比较（xs）组别对照组研究组t 值P 值n97249