免疫学杂志2023年3月第39卷第3期IMMUNOLOGICALJOURNALVol.39No.3Mar.2023·论著·[文章编号]1000-8861（2023）03-0270-07；[DOI]10.13431/j.cnki.immunol.j.20230035基于PBP2a特异性识别的电化学免疫传感器检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌曹宇，段浩，张珊珊，李郭成，李海波*，刘明*，高英英*［摘要］目的构建一种高性能的电化学免疫传感器用于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）检测。方法制备MWCNT-PDA-AuNPs纳米复合物修饰至金电极表面，将MRSA标志蛋白PBP2a的抗体连接于纳米复合物表面，用牛血清白蛋白（BSA）封闭非特异性位点，得到一种检测MRSA的电化学免疫传感器。通过对传感器构建过程关键因素的考察确定最优条件，考察其线性范围及检出限，最后对传感器性能进行评价。结果通过CV、EIS表征分析确定传感器的成功构建；明确最优构建条件为：MWCNT-PDA∶AuNPs混合比例为1∶2，材料干燥温度为37℃，抗体孵育时间为1h，样本孵育时间为30min；MRSA在20CFU/ml～2.0×107CFU/ml范围内浓度对数值与DPV峰电流值呈良好的线性关系，回归方程为I(µA)=-6.72lgC+84.26(R2=0.9878)，检出限为1CFU/ml；传感器不易被杂质蛋白干扰，其对低、中、高浓度MRSA重复测定结果RSD分别为4.18%、3.59%、4.38%（n=8），保存20d内，传感器电信号不低于初始的92%；传感器对低、中、高浓度MRSA样本检测回收率与平板计数法基本一致。结论该电化学免疫传感器构建简便，检测迅速、准确，灵敏度高，具有良好的特异性、重复性和稳定性，可以作为MRSA临床检测的备选方法。［关键词］电化学免疫传感器；MRSA；PBP2a；MWCNT-PDA-AuNPs[中图分类号]R446.61[文献标识码]AElectrochemicalimmunosensorbasedonPBP2aspecificrecognitionforMRSAdetectionCAOYu1,3,DUANHao1,ZHANGShanshan1,LIGuocheng2,LIHaibo2,*,LIUMing3,*,GAOYingying1,*1.CollegeofClinicalMedicine,JiamusiUniversity,Jiamusi154007,China;2.DepartmentofMicrobiologyandBiochemicalPharmacy,FacultyofPharmacyandMedicalLaboratory,ArmyMedicalUniversity,Chongqing400038,China;3.DepartmentofPharmaceuticalAnalysis,FacultyofPharmacyandMedicalLaboratory,ArmyMedicalUniversity,Chongqing400038,China*CorrespondingAuthors:LIHaibo,E-mail:lihaibo@tmmu.edu.cn;LIUMing,E-mail:lm1859@163.com;GAOYingying,E-mail:happygaoyingying@163.com［Abstract］Thisstudywasdesignedtoconstructedahighperformanceelec...
