不同配伍比例黄连苦参对心律...h_Gli1信号通路的影响_邢冰琪.pdf

第 39 卷第 3 期2023 年 3 月长春中医药大学学报Journal of Changchun University of Chinese MedicineVol.39 No.3Mar.2023273DOI:10.13463/ki.cczyy.2023.03.010不同配伍比例黄连苦参对心律失常模型大鼠心肌组织Shh/Gli1 信号通路的影响邢冰琪1，李 玥1，2，李 娟3*（1.山东省立第三医院药学部，济南 250031；2.山东中医药大学附属医院药学部，济南 250011；3.山东省泰安市中心医院，山东 泰安 271000）摘要：目的目的 研究不同配伍比例黄连苦参对心律失常模型大鼠的治疗作用及对其心肌组织音猬因子（Shh）/胶质瘤相关癌基因同源物 1（Gli1）信号通路的影响。方法方法 120 只大鼠随机分为 12 组，空白组、模型组、黄连:苦参 3:1 组、黄连:苦参 2:1 组、黄连:苦参 3:2 组、黄连:苦参 1:1 组、黄连:苦参 2:3 组、黄连:苦参 1:2 组、黄连:苦参 1:3 组、黄连组、苦参组、单煎混合液组，每组 10 只。空白组灌胃生理盐水 10 mLkg-1，其余各组灌胃等量药液。每天 1 次，连续预防性给药 21 d。末次给药后 1 h 构建心律失常大鼠模型。记录各组 10 min 内心电图改变，统计心律失常出现时间、心律失常持续时间、室速出现时间、室速持续时间，10 s、5 min、10 min 心率及 10 min 死亡率。实时荧光定量 PCR 法检测心肌组织 Shh、Gli1 mRNA 表达量。结果结果 与模型组比较，不同配伍比例黄连、苦参药对水煎液组心律失常出现时间、室速出现时间延长（P 0.05），心律失常持续时间、室速持续时间缩短（P 0.05），10 s、5 min、10 min 心率均增加（P0.05）。与模型组比较，不同配伍比例黄连、苦参药对水煎液组均可降低大鼠 10 min 内死亡率。与模型组比较，不同配伍比例黄连、苦参药对水煎液组心肌组织 Shh、Gli1 mRNA 表达水平均升高（P 0.05）。以黄连：苦参 2:1 时效果最佳。结论结论 黄连与苦参配伍比例为 2:1 时对心律失常大鼠的保护作用最强，可能通过激活 Shh/Gli1 信号通路发挥作用。关键词：黄连；苦参；配伍比例；心律失常；音猬因子；胶质瘤相关癌基因同源物 1中图分类号：R541.7 文献标志码：A 文章编号：2095-6258(2023)03-0273-05Effects of golden thread and lightyellow sophora root in different compatibility Effects of golden thread and lightyellow sophora root in different compatibility proportions on the Shh/Gli1 signal pathway in myocardium of arrhythmia model ratsproportions on the Shh/Gli1 signal pathway in myocardium of arrhythmia model ratsXING Bingqi1,LI Yue1,2,LI Juan3*(1.The Pharmaceutical Department of Shandong Provincial Third Hospital,Jinan 250031,China;2.The Pharmaceutical Department of the Affiliated Hospital of Shandong University of Traditional Chinese Medicine,Jinan 250011,China;3.Taian Central Hospital of Shandong Province,Taian 271000,China)Abstract:ObjectiveAbstract:Objective To study the therapeutic effect of golden thread and lightyellow sophora root in different proportions on the arrhythmia model rats and its effects on the Shh/Gli1signal pathway in myocardial tissues.MethodsMethods One hundred and twenty rats were randomly divided into 12 groups,including a blank group,a model group,a coptis:sophora 3:1 group,a coptis:sophora 2:1 group,a coptis:sophora 3:2 group,a coptis:sophora 1:1 group,a coptis:sophora 2:3 group,a coptis:sophora 1:2 group,a coptis:sophora 1:3 group,a coptis group,a sophora group,and a single decoction mixture group,with 10 rats in each group.The blank group was gavaged with 10 mLkg-1 of normal saline,while the other groups were gavaged with the same amount of corresponding liquid medicines.The prophylactic administration was performed once a day for 21 days.An arrhythmia rat model 基金项目：山东省中医药科技发展计划项目（2019-0077）作者简介：邢冰琪（1988），女，硕士，主管药师，主要从事中药学制剂方面研究*通信作者：李 娟，女，主管药师，电子信箱-实验研究第 39 卷第 3 期2023 年 3 月长春中医药大学学报Journal of Changchun University of Chinese MedicineVol.39 No.3Mar.2023274 心律失常是临床常见的心血管疾病，指心律起源部位、心脏搏动频率与节律、传导速度及激动次序等任一项出现异常，常见于多种器质性心脏病如冠心病、心肌炎及风湿性心脏病，表现为心悸、乏力及出汗等，并加重原有心脏疾病，严重时可导致患者晕厥、猝死1。该病影响 1%2%的成年人及超过 10%的 70 岁以上老年人群，危险度极高2。我国每年心源性猝死中 80%以上为恶性心律失常引发，近年来我国人口不断向老龄化发展，其已对现代医学和卫生经济学构成了巨大威胁3。目前临床治疗心律失常多采用射频消融结合抗心律失常药，其中以 III 类钾通道阻滞剂如胺碘酮最为常用，其可阻滞 Na+、K+、Ca2+等多种离子通道，降低心血管高危因素患者病死率，但其在抑制心律失常的同时，易导致胃肠道不适、肺部及甲状腺功能损伤，且可增加用药前未曾出现的心律失常或使原心律失常恶化的风险4。黄连、苦参均为中医常用治心中药，二者活性成分丰富，具有保护心肌缺血、抗心律失常及抗心肌纤维化等多种功效，且安全性较高5-6。但其最优配伍比例目前尚无一致结论。本研究通过建立心律失常大鼠模型，观察不同配伍比例黄连苦参抗心律失常的作用，并探讨可能机制。1 材料与方法1.1 实验动物实验动物 8 周龄 SPF 级 SD 大鼠 120 只，雌雄各半，体质量 180220 g，由山东中医药大学实验动物中心提供，动物许可证号：SCXK（鲁）20050015。饲养于山东中医药大学附属医院，山东省实验动物中心检测报告编号：DH20080047。饲养环境：温度（232）、湿度（505）%、12 h/12 h 明暗周期，允许大鼠自由摄食、饮水，饲喂全价营养鼠饲料，山东省实验动物中心提供，合格证号：SCXK（鲁）20040014。1.2 主要试剂、仪器主要试剂、仪器 黄连、苦参药材购自于山东中医药大学附属医院。黄连为毛茛科植物黄连Coptis chinensis Franch 的干燥根茎。苦参为豆科植物苦参Sophora flavescens Ait.的干燥根。盐酸肾上腺素注射液（规格：1 mL:1 mg10 支/盒，生产批号：国药准字号H12020526，生产厂家：天津金耀氨基酸有限公司）。FUKUDA 心电图机，北京福田电子医疗仪器有限公司；StepOne Puls 实时荧光定量 PCR 仪，美国 ABI公司。1.3 药物制备药物制备 1）黄连煎液制备：取黄连 100 g 煎液；2）苦参煎液制备：取苦参 100 g 煎液；3）黄连、苦参单煎混合液的制备：取黄连、苦参各 50 g 单煎后混合。4）黄连、苦参合煎液的制备：取黄连、苦参各 50 g 配制成 1:1 比例的合煎液，取黄连 75 g，苦参 25 g 配置成 3:1 比例的合煎液，取黄连 66.6 g，苦参 33.3 g 配置成 2:1 比例的合煎液，取黄连 60 g，苦参 40 g 配置成 3:2 比例的合煎液，取黄连 40 g，苦参 60 g 配置成 2:3 比例的合煎液，取黄连 33.3 g，was established 1 h after the last administration.The ECG changes within 10 min were recorded in each group,and the occurrence time of arrhythmia,the duration of arrhythmia,the occurrence time of tachycardia,the duration of tachycardia,the heart rate of 10 s,5 min and 10 min,and the mortality rate of 10 min were analyzed.The mRNA expression levels of Shh and Gli1 in myocardium were detected by real-time fluorescence quantitative PCR.ResultsResults Compared with the model group,the occurrence time of arrhythmia and the occurrence time of ventricular tachycardia in all the medicine groups with different compatibility ratios of coptis and sophora were prolonged(P0.05),the duration of arrhythmia and the duration of ventricular tachycardia were shortened(P0.05),and the heart rates were increased at 10 s,5 min and 10 min(P0.05).Compared with the model group,coptidis and sophora of different compatibility ratios could reduce the mortality of rats with