不同提取因子对发酵藤茶黄酮和多糖提取效果的影响_张延芹.pdf

134试 验 研 究农业开发与装备 2023年第3期不同提取因子对发酵藤茶黄酮和多糖提取效果的影响张延芹，肖 浩，张 帅（石首市自然资源和规划局，湖南石首 434499）摘要：以发酵型藤茶为试验材料，探讨黄酮和多糖的综合提取工艺，并进行分离纯化，希望为藤茶有效成分的综合开发利用提供技术指导。关键词：发酵型藤茶；提取因子；黄酮；多糖1 材料与方法1.1 试验材料以发酵型藤茶为原料。于60鼓风干燥箱中烘干，粉碎，过60筛，石油醚脱脂，保存备用。1.2 试验方法1）黄酮含量测定。取藤茶浸提液0.2 ml，用70%乙醇稀释100倍后在292 nm下测定吸收度值，根据标准曲线计算样品溶液中的总黄酮含量。2）多糖含量测定。取藤茶浸提液5 ml，加入3倍体积无水乙醇，摇匀，静置过夜，离心取沉淀，加水溶解定容至100 ml。取1 ml溶液参与反应，方法同标准曲线。根据标准曲线，计算样品中的多糖含量。2 结果与分析2.1 不同浸提温度的影响设定料液比120，提取时间为2 h，提取1次（下同），不同浸提温度下的总黄酮和多糖提取得率（表1）。随提取温度的升高，提取的得率增加，且增加的幅度较大。当温度达到85后，增幅开始降低，考虑到生产成本及黄酮成分的稳定性，选择85为最合适提取温度。2.2 不同浸提时间的影响设定料液比120，提取温度为85，不同浸提时间下的总黄酮和多糖提取得率（表2）。随提取时间的延长，含量增加，但增加的幅度不大。当时间达到2.5 h后，虽然多糖提取得率增大，但黄酮提取得率开始下降，可能是提取时间的延长增加了杂质的溶出量，或是黄酮成分结构发生了变化。另外，提取时间的延长降低了生产的效率。综合考虑，选择2.5 h为最佳提取时间。表1 试验因子因素与水平温度A（）时间B（h）料液比C-1752.01：150852.51：201953.01：25表2 试验结果试验号ABC总黄酮提取得率（%）多糖提取得率（%）1-1-1021.661.6021-1022.481.933-11022.781.67411022.322.045-10-120.881.63610-121.501.897-10123.071.45810122.942.1490-1-121.991.662.3 不同液料比的影响设定提取温度为85，提取时间为2.5 h，不同液料比下总黄酮和多糖提取得率（表3、表4）。可以看出，随着液料比的增加，总黄酮和多糖提取得率均升高，在液料比为201时达到最大值，随后开始下降，因此选择201为最佳液料比。3 结论1）提取温度和料液比对多糖影响显著。经分析，提取温度95.5、时间1.63 h、料液比121.05为提取藤茶总黄酮的最佳工艺条件。在此条件下，总黄酮提取得率预测值为22.49%，多糖提取得率为2.03%。2）提取时间与料液比对黄酮影响显著。经分析，提取温度84.84、时间为2.53 h、料液比110.65为提取藤茶多糖的最佳工艺条件。在此条件下，多糖提取得率预测值为1.62%，总黄酮提取得率为20.15%。3）不同因子最佳提取配比。采用提取总黄酮的最佳工艺对黄酮和多糖的提取得率均较高，可作为两者同时提取的最佳工艺。由此确定，综合提取藤茶总黄酮和多糖的最佳工艺条件为浸提温度95.5，时间 1.63 h，料液比121。参考文献1 陈玉琼，向班贵，倪德江，等.恩施富硒藤茶安全性毒理学实验研究J.茶叶科学，2005，25（3）：295-299.2 Cryglewski RJ，Korbut R，Robak J，et al.On the mechanism of antithrombotie action of flavonoidsJ.Bioehem Pharlllacol，1987（36）：317-322.3 王文采.葡萄科的新发现J.植物分类学报，1979，17（3）：135试 验 研 究农业开发与装备 2023年第3期110-112.4 易诚.显齿蛇葡萄研究进展J.经济林研究，2004，22（3）：51-56.5 易诚，宾冬梅.湖南藤茶资源开发现状及发展对策J.中国林副特产，2002（4）：56-57.6 广西植物研究所.广西药用植物名录M.南宁：广西民族出版社，1974.7 全国中草药汇编编写组.全国中草药汇编下册M.北京：人民出版社，1978.8 陈少卿，张桂才.广东药用植物手册M.广州：中国科学院华南植物研究所，1982.9 周天达，周雪仙.藤茶中双氢黄酮醇的分离，结构鉴定及其药理活性J.中国药学杂学，1996，31（8）：458-461.10 张友胜，宁正祥，胡闫勇，等.黄酮类化合物二氢杨梅素的研究利用现状J.中成药，2002（12）：970-972.11 张秀桥，李全红，舒志元，等.蛇葡萄属民族民间药研究开发进展J.长春中医学院学报，2001，17（1）：60-61.12 陈杖洲.野生天然类茶植物代用茶-野藤茶J.广西热带农业，2003（3）：27-28.表3 方差分析表多糖提取得率方差来源（Source）平方和（Sum of squares）自由度（Df）均方（Mean square）F值（F-value）P值（P-value）显著性（Significance）Model0.4990.05520.250.002*A0.3410.34125.650.0001*B0.01710.0176.320.0536C0.00010.0000.0001.0000AB4.000E-00414.000E-0040.150.7166AC0.04610.04617.070.0091*BC3.025E-00313.025E-0031.120.3389A20.08410.08431.020.0026*B24.741E-00314.741-0031.750.2431C24.103E-00514.103E-0050.0150.9068残差（Residual）0.01452.708E-003失拟项Lack of fit0.01033.425E-0032.100.3391纯误差Pure Error3.267E-00321.633E-003总和0.5114表4 方差分析表黄酮提取得率方差来源（Source）平方和（Sum of squares）自由度（Df）均方（Mean square）F值（F-value）P值（P-value）显著性（Significance）Model7.1090.7918.640.0025*A0.09010.0902.140.2038B0.2210.225.230.0710C4.9314.93116.560.0001*AB0.4110.419.680.0265*AC0.1410.143.320.1278BC0.7010.7016.480.0097*A20.3410.348.120.0358*B20.02110.0210.490.5147C20.3110.317.220.0435*残差（Residual）0.2150.042失拟项（Lack of fit）0.1730.0552.410.3066纯误差（Pure Error）0.04620.023总和7.3114