市售水产品中恩诺沙星残留现状和检测方法_李丽.pdf

2023 年第 1 期文章编号：1671-9646（2023）01b-0053-04第 1 期（总第 568 期）农产品加工No.12023 年 1 月Farm Products ProcessingJan.摘要：对比国内外的恩诺沙星使用情况，调查分析全国各个地区在市售水产品中恩诺沙星的使用、超标情况；并以上海为对象具体统计了解，分析目前恩诺沙星在水产品的残留现状，并综述了恩诺沙星残留现状的快速检测方法，为我国水产品中恩诺沙星残留安全监管提供了技术依据。关键词：市售水产品；恩诺沙星残留；检测方法中图分类号：O621.3文献标志码：Adoi：10.16693/ki.1671-9646（X）.2023.01.046Current Situation and Detection Methods of Enrofloxacin Residues inAquatic Products in the MarketLI Li，*SI Xiaojing，HUANG Yue，ZHANG Luyao，BAI Chen（Department of Food Science，Shanghai Business School，Shanghai 200235，China）Abstract：The use of enrofloxacin at home and abroad was compared，and the use of enrofloxacin in aquatic products sold inthe market in various regions of China，and the situation of exceeding the standard were investigated and analyzed in this pa-per.Taking Shanghai as the object，the present situation of enrofloxacin residues in aquatic products was analyzed.The analy-sis method for enrofloxacin residue status quo was described，and the methods provide technical basis for safety supervision ofenrofloxacin residue in aquatic products in China.Key words：aquatic products；enrofloxacin residue；detection methods市售水产品中恩诺沙星残留现状和检测方法李丽，*司晓晶，黄玥，张路遥，白晨（上海商学院 食品系，上海200235）收稿日期：2022-07-20基金项目：教育部产学研“现代仪器分析”虚拟仿真一流课程设计与建设师资培训项目（202102481044）；上海商学院“现代仪器分析”课程思政示范课程建设项目（SBS-2022-XJKCSZ-05）；上海商学院 大学生创新创业训练计划项目（202112050009，S202112050127）。作者简介：李丽（2000），女，在读本科，研究方向为食品质量安全。*通讯作者：司晓晶（1982），女，博士，副教授，研究方向为食品安全检测。恩诺沙星属于氟喹诺酮类药物，是一种微黄色或淡黄色结晶性粉末，常用于合成抗菌性药物，被国家指定为动物专用药。由于可预防和治疗禽兽的细菌性感染及支原体病，价格低、效果好，而且恩诺沙星在常用鱼类抗生素中不良反应发生率较低。因此，商家为了防治鱼病，降低水产品死亡概率，恩诺沙星被广泛应用于水产养殖业中1-2。但是，抗生素类药物在水产品中的吸收率不高，大部分会残留在水产品体内，这样会导致很多水产品中存有超量的恩诺沙星，对人体造成一定的健康危害。如果长期摄入恩诺沙星药物残留超标的水产品，可引起轻度肠道刺激或不适，如头晕、头疼、失眠等症状，大剂量地摄入还可能引起肝损害；还有可能使人体产生耐药性，影响软骨发育，导致畸形3。超量存放在自然环境中对生态也会有一定的破坏。恩诺沙星进入水体后，使水体中恩诺沙星长期保持低浓度水平，不仅不能显著杀伤水体微生物，还很容易产生耐药性4-5。欧盟、美国、日韩等国家和地区对恩诺沙星在水产品中的使用和残留限量都有明确的标准。我国在农业部 235 号公告 动物性食品中兽药最高残留限量 中做出了对液态奶中恩诺沙星和环丙沙星的最高残留限量（MRL）的明确规定6。同时，在 食品安全国家标准 食品中兽药最大残留限量 （GB 316502019）中规定恩诺沙星的 ADI（每日允许摄入量）为06.2 g/kg。其中，明确恩诺沙星残留标志物为恩诺沙星和环丙沙星的加和，并且规定其在鱼的皮和肉中最大残留限量值为 100 g/kg。在贝类、虾等水产品中肌肉、脂肪部分限量值为 100 g/kg，肝肾为 200 g/kg7。1恩诺沙星残留现象在 2018 年，国家市场监督管理总局发布的水产农产品加工2023 年第 1 期品的监督抽检结果分析报告中发现，鱼类的不合格项目最多的是恩诺沙星。淡水鱼一共有 15 次不合格批次，其中 6 次都是由于恩诺沙星超标，占 40%；海水鱼一共 12 批次，有 9 次是由于恩诺沙星超标。综合来看，鱼类样品共检出 7 个不合格项目，其中恩诺沙星的不合格项次（15 项次）占不合格项次总数（29 项次）的 51.7%。其他水产品如虾、贝类、蟹类也出现了恩诺沙星超标的现象，但数量不多8。水产品的不合格检验项目见图 1，各地区水产品恩诺沙星残留不合格数量见图 2，全国水产品中恩诺沙星检出情况见表 1。在 20202021 年，通过食安通公布的食品抽检信息结果，统计了全国各个地区水产品恩诺沙星不合格的数量（见图 2）。经过统计发现，浙江省数量最多，在 2020 年水产品中检出不合格批次高达 70 例。结合表 1，在同阶段，各个地区恩诺沙星不合格批次中水产品占比较大，大多地区水产品在恩诺沙星不合格项目中为主要产品类别。沿海地区浙江省在20202021 年恩诺沙星不合格率有所下降，但是水产品的检出率还是高达 80%以上，居高不下。2021 年北京市恩诺沙星不合格检出量有所下降，但是水产品在其中的检出率高达 96%。通过上述的分析，可以发现水产品兽药超标的批次中，大部分都是由于恩诺沙星超标造成，氟喹诺酮类药物数量更高。同时，发现上海市 20152021 年市售水产品抽查情况中，不合格项目恩诺沙星的抽查结果相比于国内其他地区，残留不合格检出量不是很高，最高是在 2017 年，总检出量为 23。但是，每年检出的不合格批次，水产品一直都是主要检出产品。在2019 年后，国家对于食品安全更加严格监测，食品安全受到高度重视，不合格的数量有所下降，基本是个位数，但是水产品在其中的检出率仍然很高。我国规定恩诺沙星的残留量100 g/kg，在检测结果中显示，一些批次检测到的检测残留量超过界限值 10 倍高，滥用的现象仍然存在。在 2015 年，一批鳊鱼中检出的恩诺沙星残留量为 5 491.3 g/kg，远远超过国家限量。若这批产品没有被检测或者检测方法不准确，将会对消费者的健康和生态环境产生很大的危害。上海市水产品恩诺沙星检测结果见表 2。目前，国内外对于恩诺沙星等氟喹诺酮类药物的使用量有了明确的限制，而且在美国、加拿大、图 1水产品的不合格检验项目表 1全国水产品中恩诺沙星检出情况图 2各地区水产品恩诺沙星残留不合格数量80706050403020100残留不合格数量/%省份北京天津河北山西内蒙古辽宁吉林黑龙江上海江苏浙江安徽福建江西山东河南湖北湖南广东广西海南重庆四川贵州云南西藏陕西甘肃青海宁夏新疆-2020；-2021地区水产品中恩诺沙星不合格项目2020 年检出率/%（占总检出量）2021 年检出率/%（占总检出量）北京天津河北山西内蒙古辽宁吉林黑龙江上海江苏浙江安徽福建江西山东河南湖北湖南广东广西海南重庆四川贵州云南西藏陕西甘肃青海宁夏新疆274134061541370615210126163591242111109401158.7100.012.560.066.70100.078.9100.076.581.450.075.0100.030.335.375.088.959.369.210.055.853.842.37.7075.040.0020.04.3.02503322813544222371053061991725107200020196.2050.060.033.325.088.976.562.593.681.585.270.090.925.014.30100.061.390.085.064.162.563.625.000040.009.1表 2上海市水产品恩诺沙星检测结果年份检出量检出率/%含量/g kg-1201520162017201820192020202112112214148100799682501063132.25 491.3664.5710.0166.41 723.8158.02 640.0291.0146.7828.0150.01 036.0542023 年第 1 期中国台湾、中国香港等国家或地区均未允许将恩诺沙星等喹诺酮类药物用于水产养殖，因此这几个国家和地区的限量均为不得检出。在国内，通过分析各个地区，发现恩诺沙星残留超标的现象仍然存在，而且恩诺沙星属于不合格项目中的主要项目，其中水产品在产品类别中数量超过 50%。水产品中恩诺沙星残留问题在未来几年仍将存在，所以为了给广大消费者提供安全保障，保证我国的食品安全，水产品中恩诺沙星残留量检测需要准确、快速的分析方法。2恩诺沙星分析方法目前，已有一些常见分析方法能够快速准确地检测出食品中恩诺沙星残留的含量，如荧光法、酶联免疫吸附法、高效液相色谱法、微生物检测法和电化学分析法等9。其中，目前能够实现快速方便检测的电化学方法已经成为了确保食品和药物质量安全的主题之一。2.1荧光法由于恩诺沙星的结构中含有具有荧光特性的苯环刚性平面结构，可采用荧光法进行检测。刘小鸣等人10将荧光法结合化学计量学法建立了一种快速检测恩诺沙星的分析方法，荧光光谱检测的恩诺沙星的含量数据通过偏最小二乘法和偏最小二乘判别分析可较好地预测牛乳中恩诺沙星的含量，且回收率在 96.0%111.4%。近年来，新型荧光功能材料的应用也大大丰富了恩诺沙星的荧光检测方法。Guo X J 等人11以苹果酸和甘氨酸为原料制备了表面富含羧基和氨基的氮掺杂的碳量子点（N-CDs），研究显示该 N-CDs 荧光可被 Cu2+以电子转移方式猝灭，加入恩诺沙星后，N-CDs 荧光得到恢复，基于该原理设计了一种基于 N-CDs-Cu2+体系的快速、灵敏的荧光传感策略，用于选择性检测恩诺沙星，最优条件下该方法的线性范围为1.015.0 g/mL，最低检出限（LOD）为 0.16 g/mL，结果令人满意。符东等人12以 CdTe 量子点为反应底物，在一定技术上制备成 CdTe-Al 荧光探针，与恩诺沙星结合形成 CdTe-Al-恩诺沙星体系，对小龙虾中恩诺沙星残留检测具有效果较好，在最佳因素条件下，该探针的荧光强度对恩诺沙星质量浓度在 7.1910-43.5910-3mg/kg 时线性良好，检出限为 1.4410-4mg/kg，具有灵敏度高、成本低等优点。2.2酶联免疫吸附法酶联免疫吸附法是食品安全快速检查常用方法之一，在测定时，把受检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体表面的抗原与抗体发生反应后显色，颜色的深浅与受检物质的量呈正比，可以用于定性或者定量测定。该测定方法快速灵敏、操作方便，在食品等各个领域广泛应用。赵秋伶等人13建立了酶切信号转导的酶联适配体比色法检测牛奶中恩诺沙星残留量。波长 450 nm 处的吸光度与恩诺沙星浓度呈线性关系，线性范围为36254 g/L，检测限为 15 g/L。在样品验证