动物医学进展,2023,44(2):35-40ProgressinVeterinaryMedicine山羊支原体山羊肺炎亚种MCCG-0521乳酸脱氢酶基因的克隆表达及其编码氨基酸的生物学分析刘威1,蒋鹏程1,2,杨克礼1,袁芳艳1,周丹娜1,刘泽文1,高婷1,郭锐1,孙裴2*,田永祥1*(1.湖北省农业科学院畜牧兽医研究所/农业农村部畜禽细菌病防治制剂创制重点实验室/畜禽病原微生物学湖北省重点实验室,湖北武汉430064;2.安徽农业大学动物科技学院,安徽合肥230036)摘要:旨在获得山羊支原体山羊肺炎亚种MCCG-0521乳酸脱氢酶(L-lactatedehydrogenase,LDH)的蛋白表达产物,分析其编码氨基酸的生物学特性,为进一步研究LDH蛋白的功能奠定基础。试验完成了LDH基因的克隆和密码子改造,成功将LDH基因中473、761、779nt处的A突变为G,使改造后的LDH基因能在大肠埃希氏菌Rosetta中正确表达。SDS-PAGE电泳结果显示,IPTG诱导目的蛋白表达后获得一条大小约34ku的蛋白条带,Westernblot结果表明获得的原核表达产物可与抗6×Histag的单克隆抗体发生特异性反应,研究采用DNAStarProtean模块分析了LDH的二级结构、蛋白骨架柔性区域和可能的B细胞抗原优势表位,为进一步研究其功能奠定了基础。关键词:山羊支原体山羊肺炎亚种;MCCG-0521;乳酸脱氢酶;密码子改造;二级结构中图分类号:S852.62文献标识码:A文章编号:1007-5038(2023)02-0035-06山羊传染性胸膜肺炎(Contagiouscaprinepleu-ropneumonia,CCPP)是山羊的一种急性或慢性高度接触性传染病,感染羊常发生高热、胸外膜炎和纤维素性肺炎等症状[1-2],世界动物卫生组织(WOAH)收稿日期:2022-02-17基金项目:国家重点研发计划项目(2016YFD0501506);湖北省农业科技创新中心资助项目(2019-620-000-001-17)作者简介:刘威(1985-),男,湖北武汉人,副研究员,博士,主要从事动物传染病研究工作。*通讯作者EstablishmentofReverseGeneticPlatformofNewcastleDiseaseVirusStrainMukteswarWEIJia-yang1,2,LILi2,WANGGuo-kang2,XUYing-ying2,ZENGZhe2,LUOQing-ping2,SHAOHua-bin2,WENGuo-yuan2,SHANGYu2,PANZi-shu1(1.CollegeofLifeScience,WuhanUniversity,Wuhan,Hubei,430072,China;2.KeyLaboratoryofPreventionandControlAgentsforAnimalBacteriosis,MinistryofAgricultureandRuralAffairs&HubeiProvincialKeyLaboratoryofAnimalPathogenicMicrobiology,InstituteofAnimalHusbandryandVet...
