妊娠后期母猪接种猪繁殖与呼...疫苗的安全性和生产性能评估_李树纯.pdf

动物医学进展,2 0 2 3,4 4(2):4 6-5 0P r o g r e s s i nV e t e r i n a r yM e d i c i n e妊娠后期母猪接种猪繁殖与呼吸综合征V R-2 3 3 2株疫苗的安全性和生产性能评估 收稿日期:2 0 2 1-1 2-2 4 基金项目:扬州大学高端人才支持计划项目(2 0 1 8)N o.1 0;江苏高校“青蓝工程”人才支持计划项目(2 0 2 1)N o.1 1;江苏高校优势学科建设工程项目(P A P D)作者简介:李树纯(1 9 8 6-),男,吉林白山人,博士研究生,主要从事猪传染病防控及临床兽医学研究。*通讯作者李树纯1,2,秦 涛1,2,陈素娟1,2,彭大新1,2*(1.扬州大学兽医学院,江苏扬州2 2 5 0 0 9;2.江苏省动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心,江苏扬州2 2 5 0 0 9)摘 要:为了解不同免疫背景的妊娠后期母猪免疫V R-2 3 3 2株疫苗的安全性及对其生产性能的影响,在华东地区选择A、B、C、D4个不同免疫背景的规模场,每个场随机选1 0头妊娠后期母猪免疫猪繁殖与呼吸综合征(P R R S)V R-2 3 3 2株疫苗,1 0头未免疫的作为对照,统计试验猪的流产数、产仔数、死胎数、弱仔数及产后2 0d抗体水平。结果显示,4个规模场免疫组和对照组妊娠后期母猪均未出现流产情况,产仔数差异不显著;但其中首次免疫P R R S疫苗的A猪场,死胎数和弱仔数明显高于对照组;其他猪场免疫组和对照组生产性能无显著差异;免疫组母猪群抗体水平均好于对照组。因此,P R R SV R-2 3 3 2株疫苗可用于免疫猪场妊娠后期母猪,为规模场母猪群P R R S疫苗免疫提供了依据。关键词:猪繁殖与呼吸综合征;妊娠后期母猪;V R-2 3 3 2株疫苗;安全性;生产性能中图分类号:S 8 5 2.4;S 8 5 7.2文献标识码:A文章编号:1 0 0 7-5 0 3 8(2 0 2 3)0 2-0 0 4 6-0 5 猪繁殖与呼吸综合征(P o r c i n e r e p r o d u c t i v ea n dr e s p i r a t o r ys y n d r o m e,P R R S)是由猪繁殖与呼吸综合 征 病 毒(P o r c i n er e p r o d u c t i v ea n dr e s p i r a t o r ys y n d r o m ev i r u s,P R R S V)引起的一种高度接触性传染病,主要临床表现为妊娠母猪的繁殖障碍以及各年龄段猪的呼吸困难和发热等症状1-2,P R R S V具有变异性强、毒株种类多、流行面广等特点,该病的出现给世界养猪业带来了巨大的经济损失3-4。目前临床防控P R R S的主要措施是采取疫苗免疫配合抗菌药物治疗继发的细菌感染,疫苗以P R R S减毒活疫苗最为普遍。但由于国内疫苗生产厂家多,使用的疫苗毒株不同,再加上P R R S V复制具有中和抗体依赖性增强(a n t i b o d yd e p e n d e n t e n h a n c e m e n t,A D E)作用和各个猪场免疫程序的差异,导致P R R S减毒活疫苗的安全性和有效性在养猪行业内一直存在着较大争议5-6。目前国内规模猪场常见的P R R S减毒活疫苗免疫程序为母猪和商品猪一起免疫,母猪群普免每年3次4次,1次1头份;仔猪1 4日龄左右免疫1次,1次1头份。由于规模猪场母猪群体免疫P R R S减毒活疫 苗 的 比 例 较 高,而 不 同 猪 场 背 景 和 不 同P R R S疫苗毒株等因素都导致了各种各样的P R R S减毒活疫苗母猪群免疫安全性问题,母猪群初次免疫P R R S减毒活疫苗或者更换P R R S减毒活疫苗免疫导致的妊娠后期母猪(妊娠8 0d1 0 0d)流产是最常见问 题 之 一。本 研 究 通 过 对 华 东 地 区 不 同P R R S免 疫 背 景 的 规 模 猪 场 妊 娠 后 期 母 猪 免 疫P R R SV R-2 3 3 2株弱毒疫苗进行试验研究,评价妊娠后期母猪免疫P R R SV R-2 3 3 2株疫苗的安全性及对其生产性能的影响,为母猪群P R R S疫苗免疫提供参考。1 材料与方法1.1 材料1.1.1 疫苗来源 V R-2 3 3 2株减毒活疫苗(批号2 4 5 1 2 9 4 A),勃林格殷格翰动物保健(美国)有限公司产品;T J M-F 9 2株减毒活疫苗(批号2 0 1 7 0 5 0 1 3),华威特(江苏)生物制药有限公司产品;R 9 8株减毒活疫苗(批号1 7 0 2 0 3),瑞普(保定)生物药业有限公司产品;J X A 1株减毒活疫苗(批号1 5 1 2 6 8),广东大华农动物保健品股份有限公司产品。1.1.2 试验母猪来源 试验母猪分别来自华东地区A、B、C、D4个试验猪场,均为二胎新美系长大二元品种,各猪场母猪群猪瘟、猪伪狂犬病等常规疫苗免疫背景清楚,免疫方案类似,均为普免,1年3次免DOI:10.16437/ki.1007-5038.2023.02.023疫,其中A和D猪场试验母猪未免疫P R R S疫苗,B猪场试验母猪试验前3个月免疫过T J M-F 9 2株P R R S疫苗,C猪场试验母猪试验前3个月免疫过R 9 8株P R R S疫苗。1.1.3 试验猪场背景 A、B、C、D4个试验猪场规模分别为18 0 0、15 0 0、9 0 0、6 8 0头基础母猪,4个猪场生产模式类似,均为两点式饲养,外来人员进生产区需隔离洗浴。4个猪场试验前妊娠母猪均无明显P R R S临床症状,其中C场此阶段产房初生弱仔脐带血有经 典毒株P R R S V阳 性检出,同时 母 猪 群P R R S抗体离散度平均超过6 0%。A场猪群未免疫过P R R S疫苗;B场母猪群最开始使用J X A 1株高致病性P R R S减毒活疫苗,目前更换使用T J M-F 9 2毒株1年时间,母猪群普免,3次/年,1次1头份2m L,仔猪不免疫P R R S疫苗;C场母猪群一直使用R 9 8株P R R S减毒活疫苗,母猪群普免,4次/年,1次1头份2m L,仔猪不免疫P R R S疫苗;D场母猪群未免疫P R R S疫苗2年,2年前一直用T J M-F 9 2株P R R S减毒活疫苗,普免,3次/年,1次1头份2m L,仔猪不免疫P R R S疫苗。1.1.4 主要试剂和仪器 P R R S抗体E L I S A检测试剂盒(批号4 0 9 5 9-V 9 3 1),美国I D E X X公司产品;MK 3酶标仪,美国T h e r m o公司产品;单道、多道微量移液器,美国T h e r m o公司产品。1.2 方法1.2.1 疫苗免疫方案 对4个猪场母猪群试验前2个月 的P R R S抗 体 抽 样 检 测 报 告 及 各 场 异 常 猪P R R S抗原检测报告进行分析,了解各场母猪群试验前的P R R S感 染 状 态,参 照 文 献 7 标 准 猪 群P R R S V的感染状态进行分类。每个猪场选取抽样检测中正常生产状态的怀孕后期母猪(妊娠8 0d1 0 0d)2 0头,约为4 5 0日龄,随机分成2组(试验组1 0头,对照组1 0头),其所处的环境和饲养管理条件基本一致。试验组怀孕后期母 猪 免 疫P R R S减 毒 活 疫 苗V R-2 3 3 2株,1头份/头,对照组不免疫。跟踪所有试验组和对照组母猪的流产数、产仔数、死胎数、弱仔数和分娩后2 0dP R R S抗体水平。1.2.2 P R R S V血清抗体检测 参照美国I D E X XP R R S V抗体E L I S A检测试剂盒说明书,对送检样品血 清 进 行 抗 体 检 测。该 试 剂 盒 只 检 测 针 对P R R S V的N蛋白抗体,严格按照说明书进行。将样品稀释液4 0倍稀释待检样品(对照无需稀释),取出抗体包被板,在记录表上记录样品的位置。加入1 0 0L没有稀释的阴性和阳性对照,每个检测加2孔;对应孔中加入稀释好的样品1 0 0L,2 5孵育3 0m i n,弃各孔液体,使用约3 0 0L洗涤液洗涤板孔4次,每孔加入1 0 0L酶标抗体,2 5孵育3 0m i n,用洗涤液再次洗涤;每孔加入1 0 0LTMB底物液,2 5孵育1 5m i n,每孔加入1 0 0L终止液,终止反应。测量样本和对照在6 3 0n m处的吸光值,计算结果。结果判定标准:S/P值0.4为阴性,S/P值0.4为阳性。1.2.3 数据分析 试验结果用M i n i t a b 1 9进行统计学分析,用单变量方差分析比较,当P0.0 5)。表明怀孕后期母猪免疫P R R SV R-2 3 3 2株弱毒疫苗后对其产仔数无显著影响。图1 四个猪场妊娠后期母猪窝均产仔数跟踪结果F i g.1 T r a c k i n gr e s u l t so f a v e r a g e l i t t e r s i z eo f t h e l a t ep r e g n a n c ys o w s i nf o u r f a r m s2.4 死胎数跟踪结果4个猪场中,A场试验组和对照组的母猪平均死胎数分别为1 4头和3头;B场试验组和对照组的母猪平均死胎数分别为6头和5头;C场试验组和对照组的母猪平均死胎数分别为8头和1 2头;D场试验组和对照组的母猪平均死胎数分别为3头和4头。死胎数结果分析表明,A场试验组怀孕母猪分娩后死胎数显著高于对照组(P0.0 5),其他场试验组和对照组平均死胎数差异不显著(图2)。2.5 弱仔数跟踪结果4个猪场中,A场试验组和对照组的母猪平均弱仔数分别为2 6头和8头;B场试验组和对照组的母猪平均弱仔数分别为1 1头和1 3头;C场试验组和对照组的母猪平均弱仔数分别为1 4头和1 8头;D场试验组和对照组的母猪平均弱仔数分别为1 5头和1 0头。弱仔数结果分析表明,A场试验组母猪平均弱仔数显著高于对照组(P0.0 5),其他场试验组和对照组平均弱仔数差异不显著(图3)。2.6 各试验猪场母猪分娩后2 0dP R R S抗体水平检测结果 4个猪场试验组母猪的S/P值阳性率为1 0 0%且离散度较小,对照组母猪的S/P值离散度较大,其中A场试验组母猪和对照组母猪P R R S抗体临床参数差异显著(P0.0 5),其他猪场试验组与对照组母猪P R R S抗体参数均无显著差异。4个场试验组母猪的S/P值阳性率、S/P平均值及离散度等P R R S抗体参数均优于对照组,其中A场试验组和对照组的P R R S抗体参数差异最大,A场对照组母猪P R R S抗体阳性率和S/P值均值最低,分别为6 0%和0.7 2,同时离散度最大为7 6.8 1%;D场试验组母猪P R R S抗体离散度最低,为2 8.0 6%;试验组母猪S/P值基本都在0.4S/P2.5的区间。各猪场试验组和对照组怀孕后期母猪分娩后2 0dP R R S抗体检测结果表明,免疫P R R SV R-2 3 3 2疫苗的试验组母猪的抗体参数明显优于未免疫的对照组(表2)。*差异显著(P0.0 5)*R e p r e s e n t ss i g n i f i c a n td i f f e r e n c e(P0.0 5)图2 各试验猪场妊娠后期母猪平均死胎数统计结果F i g.2 S t a t i s t i c a l r e s u l t so f t h ea v e r a g en u m b e ro f s t i l l b i r t h so f t h e l a t ep r e g n a n c ys o w s i ne a c he x p e r i m e n t a l f a r m*差异显著(P0.0