53卷南方农业学报·3020·收稿日期：2022-04-09基金项目：国家自然科学基金项目（32160494）；新疆农业大学生物学创新团队开放项目（ITB202106）通讯作者：李月（1984-），https://orcid.org/0000-0002-8394-8926，博士，副教授，主要从事作物逆境分子生物学研究工作，E-mail：liyue6905@126.com第一作者：代培红（1979-），https://orcid.org/0000-0003-0806-1361，副教授，主要从事作物抗逆分子生物学研究工作，E-mail：40836520@qq.com棉花黄萎病相关基因GhMYB6的克隆与功能分析代培红1，胡子曜1，李秀青2，雷建峰2，刘超1，刘晓东1，李月1*（1新疆农业大学生命科学学院，新疆乌鲁木齐830052；2新疆农业大学农学院/教育部棉花工程研究中心/农业生物技术重点实验室，新疆乌鲁木齐830052）摘要：【目的】克隆陆地棉MYB家族基因GhMYB6，并对其在棉花抗黄萎病反应中的功能进行初步探究，为挖掘棉花抗病相关基因及棉花抗病育种提供参考。【方法】基于棉花转录组测序数据，筛选并克隆了响应黄萎病菌侵染的基因GhMYB6，对其序列进行生物信息学分析，采用实时荧光定量PCR（qRT-PCR）检测其在黄萎病诱导下的表达模式，并利用病毒诱导的基因沉默（VIGS）技术初步验证棉花抗黄萎病中的生物学功能。【结果】克隆获得的GhMYB6基因开放阅读框（ORF）为258bp，编码85个氨基酸残基，理论等电点（pI）为9.34，脂肪系数为73.41，平均疏水性为-0.793，相对分子质量为9.86kD，不稳定指数为73.41，为亲水性、碱性的非跨膜蛋白，无信号肽，定位于细胞核，在第11~63氨基酸处含有1个SANT结构域。GhMYB6蛋白与雷蒙德氏棉GrMYB6聚在同一小分支上，说明二者的亲缘关系较近。GhMYB6基因在V991侵染后6和12h时相对表达量较对照（未侵染处理，CK）极显著下调（P<0.01），72h时显著上调（P<0.05，下同），24和48h时与CK无显著差异（P>0.05）。与阴性对照植株TRV：00相比，GhMYB6基因沉默植株萎蔫程度和叶片黄化更严重，病情指数显著升高，茎秆的褐变程度更严重，且茎段在培养基上生长的真菌菌丝数量明显增多。【结论】GhMYB6基因响应黄萎病菌V991侵染，当抑制GhMYB6基因表达后，棉花对黄萎病菌的敏感性增强，抗性明显降低，推测GhMYB6是棉花抗黄萎病防御的一个正向调节因子。关键词：棉花黄萎病；MYB家族基因；基因克隆；病毒诱导的基因沉默（VIGS）；功能验证中图分类号：S562.035.3文献标志码：A文章编号：2095-1191（2022）11-3020-08CloningandfunctionalanalysisofGhMYB6gen...
