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逆转录酶基因过表达或沉默对HL-1细胞钠电流的作用_但晴.pdfVIP免费

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·基础研究·逆转录酶基因过表达或沉默对HL-1细胞钠电流的作用*但晴1陈雅婷2,3庄文娟4刘传斌3白婧3董颖1林琨1李泱3[摘要]目的研究逆转录酶(TERT)基因过表达或沉默对HL-1细胞钠电流(INa)的作用。方法构建TERT基因过表达或沉默慢病毒载体,感染HL-1细胞,分为过表达慢病毒载体(TERT)组、对照载体(Vector)组、TERTRNA干扰慢病毒载体(shTERT)组、对照载体(shNC)组。应用定量荧光原位杂交(Q-Fish)方法测定端粒长度,应用CCK-8法绘制细胞生长曲线,应用全细胞膜片钳技术记录INa。结果TERT组HL-1细胞端粒长度明显延长,从3.33±1.01延长至4.03±0.94(n=5,P<0.01),且增殖能力明显增强;-35mV去极化时,与Vector组比较,TERT组HL-1细胞INa电流密度从(-149.5±12.6)pA/pF增至(-213.3±17.2)pA/pF(n=10,P<0.01)。而与shNC组比较,shTERT组INa电流密度从(-141.3±13.5)pA/pF降至(-87.3±9.8)pA/pF(n=10,P<0.01)。TERT组钠通道稳态失活曲线右移,通道关闭态失活时间延长,失活后恢复加速,shTERT组的效应恰好相反。而TERT组、shTERT组钠通道稳态激活和中间态失活变化不大。结论TERT基因对HL-1细胞INa有明显的调控作用,这可能是其改变心房肌细胞电生理的机制之一。[关键词]心血管病学;逆转录酶基因;HL-1细胞系;钠电流;膜片钳DOI:10.13333/j.cnki.cjcpe.2023.01.007中图分类号R331.3+8文献标识码A文章编号1007-2659(2023)01-0036-07*国家自然科学基金资助(面上项目,No.82070328,81870249)作者单位:1中国人民解放军总医院第一医学中心心血管内科(北京100853)2解放军医学院(北京100853)3中国人民解放军总医院第六医学中心心血管病学部(北京100853)4北京市昌平区沙河医院(北京102206)作者简介:但晴(1984-),女(汉族),四川自贡人,主管技师,硕士,研究方向为心脏基础电生理。通讯作者:李泱,E-mail:liyangbsh@163.com;林琨,E-mail:lk0102008@16...

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