第1期第53卷基金项目:国家自然科学基金项目“面向海上聚驱采出水的油滴-微泡团聚机理及其协同动态旋流预除油特性研究”(项目编号U20B2030)*通信作者:张世仑(1984—),男,工程师,博士,研究方向:化学驱、微生物采油等三次采油技术研究。E-mail:zhangshl53@cnooc.com.cn。南海A油田硫酸盐还原菌群落组成分析张世仑1,2*,王大威1,2,黄波1,2,靖波1,2,王秀军1,21.海洋石油高效开发国家重点实验室,北京100028;2.中海油研究总院有限责任公司,北京100028摘要:文章的主要目的是探究南海高温A油田油藏酸蚀的生物学成因,对油藏内源硫酸盐还原菌(sulfate-reducingbacteria,SRB)进行定量分析,同时借助高通量测序技术对SRB群落的组成进行分析。从而证实了在高温油田中SRB的增殖代谢活动,能为治理海上高温油田硫酸盐还原反应引起的酸蚀问题提供依据和指导。关键词:酸蚀;硫酸盐还原菌;定量分析;高通量测序;群落组成;石油doi:10.3969/j.issn.1001-6678.2023.01.029在注水开发的油藏系统中已经分离或检测到了多种不同生理功能的微生物,主要包括好氧菌、硫酸盐还原菌(sulfate-reducingbacteria,SRB)、硝酸盐还原菌、铁还原菌、发酵菌和产甲烷菌[1-3]。其中,SRB是一类原核微生物,包括细菌和古生菌,它们能够在能量代谢的过程中利用硫酸盐作为最终的电子受体生成H2S[4],引起油藏酸蚀,导致一系列严重的环境及生产问题。有研究表明,生命起源早期就已出现了能够还原硫酸盐中的嗜热古菌和细菌,例如闪烁古球菌(Archaeoglobusfulgidus)、深海古球菌(Archaeoglobusprofundus)和热球菌(Thermococcus)等[5]。在硫酸盐被还原为H2S的过程中,ATP与硫酸盐在ATP硫酸化酶的催化下生成了腺苷酰硫酸(APS),APS还原酶(APR)将APS还原成亚硫酸盐,而亚硫酸盐会在异化型亚硫酸盐还原酶(DSR)的作用下,产生硫化物[6]。鉴别油藏环境中特定功能的微生物群落结构对于分析内源菌群的酸蚀作用是十分必要的。1材料与方法1.1材料1.1.1菌种来源南海高温A油田X区块(油藏温度为63~75℃,埋深为1100~1400m)注水井X1水样、生产井X2采出液。1.1.2试剂及仪器设备ABIGeneAmp9700PCR仪(AppliedBiosystems,美国)、AxyPrep细菌基因组DNA试剂盒(AxygenBiosciences,美国)、BestarSybrGreenqPCR反应混合物(DBIBioscience,德国)、CFX96实时荧光定量PCR仪(Bio-Rad,美国)、EmeraldAmpPCR反应混合物(TakaraBio,日本)、IlluminaMiseq测序平台(武...