芪英颗粒的质量标准研究_陈明.pdf

3 结果与讨论3.1 通过测定18批槐角炭样品的水分、总灰分及浸出物，分别确定了限度，规定水分不得过10.0%、总灰分不得过6.0%、醇溶性浸出物不得低于40.0%。3.2 酸不溶性灰分主要反映药材中泥沙等外源性杂质的含量，槐角炭中酸不溶性灰分结果偏低，表明被泥沙等污染的可能性较小，故暂不将酸不溶性灰分检查项收入标准正文。3.3 参照中国药典2020年版一部药材及饮片项下重金属及有害元素限度规定（铅、镉、砷、汞、铜分别不得过5，0.3，2，0.2，20 mg/kg），18批槐角炭中铅、镉、砷、汞、铜含量均在规定限度以内，重金属及有害元素污染风险较低。因此，本项目暂不收入标准正文。3.4 18批槐角炭样品中槐角苷的含量在1.7%4.2%之间，平均值为3.0%。综合参考各省炮制规范中规定槐角炭的含量限度10-13，结合样品测定结果，规定槐角炭的含量限度为“本品按干燥品计算，含槐角苷（C21H20O10）不得少于2.0%。”参考文献1 国家药典委员会.中国药典S.2020年版一部.北京:中国医药科技出版社.2020:371.2 叶定江,张世臣,吴皓.中药炮制学M.第二版.北京:人民卫生出版社,2011:635.3 王景华,唐于平,楼凤昌.槐角化学成分与药理作用J.国外医药:植物药分册,2002,17(2):58-60.4 孙国东,霍金海,潘五九,等.基于UPLC-Q-TOF/MS技术的槐角药材化学成分分析J.中草药,2019,50(16):3774-3783.5 王笑,王雨,张冰,等.槐不同药用部位本草学、化学成分和药理作用研究进展J.中草药,2018,49(18):4461-4467.6 都盼盼,石延榜,张振凌,等.不同炮制方法对槐角黄酮类成分量的影响J.中草药,2014,45(22):3271-3274.7 山东省药品监督管理局.山东省中药饮片炮制规范 S.2012年版.2012:361-362.8 牛艳,栾永福,许丽丽,等.双标线性校正法用于槐角炭的指纹图谱研究J.药物分析杂志,2022,42(9):1652-1658.9 付允,李小清,张庆贺,等.槐角有效成分的研究进展J.特产研究,2018,4:95-97.10 甘肃省食品药品监督管理局.甘肃省中药炮制规范S.2009年版.2009:184-185.11 湖北省药品监督管理局.湖北省中药饮片炮制规范S.2018年版.2018:102.12 陕西省食品药品监督管理局.陕西省中药饮片标准S.第一册.2009:244.13 云南省食品药品监督管理局.云南省中药饮片标准S.2005年版第二册.2005:170-171.收稿日期：2022-05-19基金项目：山东省重点研发计划（重大科技创新工程）项目（编号：2021CXGC010508）作者简介：陈明，硕士，从事中药新药研发、药物分析工作，E-mail:*通讯作者：王芳，博士，主管中药师，从事中药新药、天然活性产物的分离鉴定与结构修饰研究，E-mail:wangfang_84 ；宋莉，硕士，药师，E-mail: 芪英颗粒的质量标准研究 陈 明1，王 芳1*，袁振海1，王 栋1，贾婵媛1，陈彬合1，宋 莉2*（1.山东省药学科学院 山东省生物药物重点实验室，山东 济南 250101；2.青岛市妇女儿童医院，山东 青岛 266071）摘 要：目的 建立芪英颗粒的质量标准。方法 参照中国药典2020年版，采用薄层色谱法（TLC）定性鉴别芪英颗粒中大黄、肉桂、炙甘草和白及4味药材；同时，应用高效液相色谱法测定方剂中黄芪甲苷的含量；并检测方剂的粒度、溶化性、水分、装量差异等指标。结果 TLC鉴别专属性强，图谱斑点清晰，分离度良好；黄芪甲苷在质量浓度0.10280.5140 mg/ml范围内，线性关系良好（r=0.9997），精密度（n=6）、重复性（n=6）、稳定性（24 h）RSD均小于2%，平均加样回收率为98.08%（RSD=0.60%，n=6）；样品的水分、粒度、溶化性和装量差异均符合要求。结论 本研究建立的质量标准，方法专属性高，重复性好，可用于芪英颗粒的质量评价，为芪英颗粒的质量控制提供可靠方法。关键词：芪英颗粒；薄层色谱法；高效液相色谱法；黄芪甲苷；质量标准中图分类号：R927.1 文献标识码：A 文章编号：1672-979X（2023）01-0030-06DOI：10.3969/j.issn.1672-979X.2023.01.00630 食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期Study on Quality Standard of Qiying GranulesCHEN Ming,WANG Fang,YUAN Zhen-hai,WANG Dong,JIA Chan-yuan,CHEN Bin-he,SONG Li (Shandong Key Laboratory of Biopharmaceuticals,Shandong Academy of Pharmaceutical Sciences,Jinan 250101,China)Abstract:Objective To establish the quality standard of Qiying Granules.Methods Referring to Chinese Pharmacopoeia(2020 edition),thin-layer chromatography(TLC)was used to qualitatively identify Cinnamomi Cortex,Glycyrrhizae Radix et Rhizome Praeparata Cum Melle,Rhei Radix et Rhizome,Bletillae Rhizoma in Qiying Granules.High performance liquid chromatography(HPLC)was used to determine the content of astragaloside IV.In addition,the indicators such as particle size,solubility,moisture and loading difference of the formula were detected.Results TLC identification was specific,with clear spots and good resolution.With the concentration range of 0.1028-0.5140 mg/ml,the linear relationship of astragaloside IV was good(r=0.9997).RSDs of precision(n=6),repeatability(n=6)and stability(24 h)tests were all less than 2%.The average recovery was 98.08%with RSD of 0.60%(n=6).The moisture,particle size,solubility and loading difference of the three batches of samples were all in line with the requirements.Conclusion With high specificity and good repeatability,the quality standards established in this study can be used for the quality evaluation of Qiying Granules,and can provide a reliable method for the quality control of Qiying Granules.Key Words:Qiying Granules;TLC;HPLC;astragaloside IV;quality standard胃痛，中医学称胃脘痛，以上腹部胃脘处疼痛为主，主要表现为胀痛、嗳气、泛酸、恶心、呕吐、腹泻等症状1-2。芪英颗粒由黄芪、大黄、肉桂、炙甘草、白及等七味药材组成，具有健脾补气、和胃散寒之功效，可用于治疗脾胃虚寒的胃脘痛病症。其中，君药黄芪味甘性温，有补气升阳、行滞通痹之效3；大黄、肉桂有清热解毒、利湿散结之功效4；炙甘草、白及具有健脾和胃、燥湿益气之功效。目前，芪英颗粒制剂虽明确了处方组成、比例、制备工艺等，但尚未建立完善的质量标准。为了有效控制制剂质量，本研究参考中国药典2020年版5，采用薄层色谱（TLC）法建立芪英颗粒中大黄、肉桂、炙甘草、白及的定性鉴别方法；并应用高效液相色谱法（HPLC）测定黄芪甲苷的含量，经方法学验证，建立的方法准确可靠，可用于测定芪英颗粒中黄芪甲苷的含量。同时依据中国药典2020年版通则0104颗粒剂6相关规定，检测了芪英颗粒的粒度、溶化性、水分、装量差异等指标，为后续该新药质量标准的制订提供参考。1 仪器与试药1.1 仪器岛津LC-10ATVP型高效液相色谱仪（日本岛津），配Alltech 2000型蒸发光散射检测器（美国奥泰）；UV-2550紫外分光光度计（日本岛津）；AE240S电子天平（梅特勒-托利多）；双列四孔水浴锅（上海树立）；超声波清洗仪（宁波新芝）；旋转蒸发仪（上海中生）；电热恒温鼓风干燥箱（上海树立）；硅胶G薄层板（默克化工）等。1.2 试药黄芪甲苷对照品（批号：110704-200217，纯度98.2%），大黄素对照品（批号：110756-201913，纯度96.0%），桂皮醛对照品（批号：110710-201821，纯度99.6%），甘草酸铵对照品（批号：110731-202021，纯度96.3%），黄芪对照药材（批号：120974-201311），大黄对照药材（批号：120902-201912），肉桂对照药材（批号：121363-201703），甘草对照药材（批号：121303-201704），白及对照药材（批号：121262-201706），均购自中国食品药品检定研究院。课题组自制芪英颗粒（批号：171010，171012，171013，包装规格5 g/袋），同法自制缺黄芪的阴性样品，缺大黄的阴性样品，缺肉桂的阴性样品，缺炙甘草的阴性样品，缺白及的阴性样品。食品与药品 Food and Drug 2023年第25卷第1期 312 方法与结果2.1 薄层色谱鉴别2.1.1 芪英颗粒中大黄的薄层鉴别 参照中国药典2020年版一部大黄药材鉴别方法，称取芪英颗粒粉末（过4号筛）4.0 g，精密加入甲醇20 ml，放置1 h，过滤，精密移取续滤液5 ml，水浴蒸干，残渣加水10 ml溶解，加入盐酸1 ml，加热回流30 min，放冷至室温，乙醚振摇提取2次，每次20 ml，合并乙醚层，挥干，残渣加入1 ml氯仿溶解，作为待鉴定供试品溶液，平行制备2份。取大黄药材粉末0.1 g、缺大黄的阴性样品4.0 g，同法制备大黄对照药材溶液、缺大黄阴性样品溶液。精密称取大黄素对照品适量，加甲醇制备浓度为1.0 mg/ml的对照品溶液。依据中国药典2020年版通则0502，分别吸取缺大黄阴性样品溶液、芪英颗粒供试品溶液（1）、芪英颗粒供试品溶液（2）、大黄对照药材溶液、大黄素对照品溶液10，10，10，4 l，点于同一个黏合剂为羧甲基纤维素钠的硅胶H板上，以石油醚（3060）-甲酸乙酯-甲酸（15:5:1）为展开剂，展开，取出，晾干，置于紫外灯（365 nm）下检视。薄层色谱结果见图1，供试品色谱，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色荧光斑点；在与对照品色谱相应的位置上，显相同的橙黄色荧光斑点，阴性样品无干扰。2.1.2 芪英颗粒中肉桂的薄层鉴别