六味地黄丸治疗肾脏疾病的实验研究近况_刘少芳.pdf

2023，Vol.26 No.1Journal of Guangxi University of Chinese Medicine成都中医药大学，2017.40GILCHRIST A.Chemokines and bone J.Handb Exp Pharmacol，2020，262：231-258.41PAN Z，ZHU T，LIU Y，et al.Role of the CXCL13/CXCR5 Axis in autoimmune diseasesJ.Front Immunol，2022，13：850998.42TAO S，WANG X，LIAO C，et al.The efficacy of moxibustionon the serum levels of CXCL1 and beta-EP in patients withrheumatoid arthritisJ.Pain Res Manag，2021，2021：7466313.43余泽芸.艾灸对RA患者血清中LTB4/MMP-9含量影响的研究 D.成都：成都中医药大学，2021.（编辑陈明伟/蒙健林）六味地黄丸治疗肾脏疾病的实验研究近况刘少芳1，黄国东1*，陈峰2，莫超1，陈宇1，王慧玲1（1.广西中医药大学附属国际壮医医院，广西南宁530201；2.广西中医药大学第一附属医院，广西南宁530023）关键词：六味地黄丸；肾脏疾病；实验研究；综述中图分类号：R289.5文献标识码：A文章编号：2095-4441（2023）01-0062-03引文格式：刘少芳，黄国东，陈峰，等.六味地黄丸治疗肾脏疾病的实验研究近况 J.广西中医药大学学报，2023，26（1）：62-64.收稿日期：2022-07-02*通信作者：黄国东，医学博士，主任医师，从事肾脏病研究工作；E-mail：六味地黄丸出自宋代儿科名医钱乙的 小儿药证直诀，是补肾填精的经典方剂，配伍上具有“三补三泻”的特点，深受广大医者的青睐。因其疗效显著，广泛应用于肾脏疾病的治疗中。中医学认为肾藏先天之精，是脏腑阴阳之本，也是生命之源，因此称为“先天之本”。肾脏疾病属中医学“水肿”“关格”“癃闭”等范畴1。现代医学中慢性肾炎、肾病综合征、肾小球疾病、狼疮性肾炎等都属于肾脏疾病的范畴。近年来六味地黄丸治疗肾脏疾病的实验研究方面取得较大的进展。研究表明六味地黄丸具有调节免疫、抗衰老、改善肾功能等多种作用2-3。笔者现将近年来六味地黄丸治疗肾脏疾病的实验研究近况综述如下。1抗炎作用不同的炎症因子相互作用可引起炎症级联反应，因此增加了血管发生炎症以及纤维化的概率，从而导致了肾小球基底膜变厚、尿蛋白排泄增多、肾小管间质纤维化，加重了肾小球的硬化程度，最终进展至终末期肾脏疾病4-5。Wang等6研究六味地黄丸对d-半乳糖（D-Gal）诱导的亚急性衰老模型大鼠的抗衰老作用，通过观察发现六味地黄丸在激活AMPK/SIRT1后对衰老大鼠具有抗衰老作用，研究结果表明六味地黄丸可抑制转化生长因子的表达，从而进一步减轻睾丸的炎症反应。陶鹏宇等 7 基于核因子kappa B（NF-B）及转化生长因子/Smad双信号通路，观察六味地黄丸对糖尿病肾病炎症及纤维化的影响。将30只SD大鼠随机分为3组，每组10只。中药组给予大鼠六味地黄丸灌胃，正常组、模型组给予大鼠等体积生理盐水灌胃。给药12周后取材，检测各组大鼠空腹血糖、尿素氮、血肌酐、24 h尿蛋白定量值，研究显示中药组NF-B、单核细胞趋化蛋白1、转化生长因子、alpha平滑肌抗体、Smad2、Smad3表达下调，Smad7表达上调（均P0.05），结果表明六味地黄丸具有肾脏保护作用，其机制可能与通过调控NF-B及转化生长因子/Smad双信号通路，从而减轻糖尿病肾病炎症损伤有关。2抗肾纤维化肾纤维化是各种病因导致的慢性肾脏病进展至终末期肾病的共同病理变化，其治疗研究一直受到广 622023 年 第 26 卷 第 1 期广西中医药大学学报泛关注，改善肾纤维化所致的肾功能障碍被认为是治疗慢性肾脏病的重要策略8。Xu等9的研究表明六味地黄丸可通过上调细胞珠蛋白，抑制 TGF-/SMADS、NF-kB信号通路等多种途径，预防肾纤维化并保护肾小球系膜细胞。王学敏等10将24只小鼠随机分为假手术组8只和结扎组16只，结扎小鼠随机分为模型组和六味地黄丸组，每组8只。造模开始给予六味地黄丸灌胃给药至2周末，实验结束留取肾组织样本，检测肾组织病理学。结果表明，六味地黄丸可显著抑制巨噬细胞激活，可能与其有效抑制肾纤维化的作用机制有关，为其治疗肾纤维化提供依据。Shu等11通过观察糖尿病肾病动物模型，发现六味地黄丸可通过干扰TGF-/Smad3通路，从而阻碍肾纤维化的产生。3抗氧化损伤抗氧化是指抗氧化自由基的简称，自由基对机体组织产生损害，与丙二醛含量（MDA）及超氧化物歧化酶（SOD）活性的变化密切相关12。李彩虹等13将30只雄性大鼠随机分为对照组、模型组、六味地黄丸组，每组10只，予注射用顺铂7.5 mg/kg单次腹腔注射建立模型。结果显示，与模型组比较，六味地黄丸组大鼠SOD活力显著升高，MDA含量明显下降（P0.05），提示六味地黄丸可增强急性肾损伤大鼠抗氧化酶的活性。谭颖颖等14采用10%六味地黄丸含药血清处理高糖诱导的HK-2细胞24 h和48 h，结果发现10%六味地黄丸含药血清可通过减轻肾小管上皮细胞的氧化损伤，从而延缓糖尿病肾病的间质纤维化的进展。郝艳鹏等15将24只大鼠随机分为正常对照组、模型组、六味地黄丸组，每组8只。予腹腔注射庆大霉素造模，正常对照组与模型组予生理盐水灌胃。结果提示：与正常对照组比较，模型组大鼠体质量显著下降，肾脏指数、肾功能、肾皮质氧化产物MDA含量与NOS酶活性显著增高，SOD酶活性显著降低，NF-B蛋白表达显著增高；与模型组比较，治疗第1周末六味地黄丸组大鼠肾功能、肾皮质NOS活性显著降低，SOD活性显著增高，NF-B蛋白表达显著降低（P0.05）。结果表明六味地黄丸能调节NF-B的表达，从而改善庆大霉素所致的肾脏氧化损伤。4改善肾功能肾功能检查主要指标有血肌酐、血尿酸、血尿素氮、内生肌酐清除率及2微球蛋白等，可直接反映肾脏滤过、排泄及维持电解质平衡的能力16。有研究发现，六味地黄丸能减轻肾小球滤过功能损伤，保护肾单位，防止肾小管变性坏死17。张瑞义等18选取Balb/c小鼠27只，分为正常组7只、模型组10只、六味地黄丸组10只，六味地黄丸组给予六味地黄丸，正常组和模型组给予生理盐水，均持续灌胃28 d。监测小鼠24 h尿总蛋白含量以及血总蛋白、白蛋白、尿素氮、血肌酐、胆固醇、甘油三酯水平；光镜电镜观测肾组织形态变化；检测肾组织超氧化物歧化酶活性、丙二醛含量；观察小鼠肾组织p38MAPK及NF-B的蛋白表达水平。结果与模型组比较，六味地黄丸组小鼠肾系数、24 h尿总蛋白、血总蛋白、白蛋白水平显著升高；胆固醇、尿素氮、甘油三酯水平均显著降低（P16.7 mmol/L为造模成功，随后分为模型组21只、六味地黄丸治疗组21只、白黎芦醇治疗组21只，均治疗1周。结果提示与正常组大鼠比较，模型组大鼠的血肌酐、尿素氮、血糖和尿蛋白水平明显升高（P0.05），与模型组大鼠比较，六味地黄丸组大鼠和白黎芦醇组大鼠的血肌酐、尿素氮、血糖和尿蛋白水平明显降低（P0.05）。表明六味地黄丸能够较好地降低糖尿病大鼠的血糖水平，改善肾功能。蛋白印迹结果提示六味地黄丸可通过改善体内能量代谢异常，抑制磷脂酰肌醇 3-激酶（PI3K）、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）和蛋白激酶 B（AKt）的表达，同时激活沉默信息调节因子 1（SIRT1）和AMP依赖的蛋白激酶（AMPk）的表达。6结语综上，近年来实验研究表明，六味地黄丸在肾脏疾病的治疗中，具有抗炎、抗肾纤维化、抗氧化损伤、改善肾功能、降血糖等作用。尽管众多学者做了大量的临床和实验研究，但是更确切的机制仍未完全阐明，如六味地黄丸中的哪些成分参与了疾病的治疗，对机体的哪些靶细胞产生了作用，尚不够清楚。所以 632023，Vol.26 No.1Journal of Guangxi University of Chinese Medicine六味地黄丸治疗肾脏疾病的机理还有待进行更系统、更深入的实验研究，尤其是需要从细胞、分子水平进一步开展，以期更好地指导临床，发挥经典名方的临床应用价值。参考文献1李季，蒙向欣，吴立友.略述 内经 理论在肾系疾病诊治中的应用 J.中医药学报，2018，46（5）：122-124.2刘妍，王蕾.六味地黄及金匮肾气方的现代药理研究进展J.中华中医药杂志，2008，23（11）：996.3吴梅艳，李平.六味地黄丸的药理作用及临床运用综述 J.世界中西医结合杂志，2014，9（9）：1023.4PREZ-MORALES R E，DEL PINO M D，VALDIVIELSO J M，et al.Inflammation in diabetic kidney diseaseJ.Nephron，2019，143（1）：12-16.5黎妞，马东红.炎症因子与糖尿病肾脏疾病的研究进展 J.医学综述，2021，27（14）：2870-2874.6WANG Y X，YANG Z J，YANG L L，et al.Liuweidihuang pillalleviates inflammation of the testis via AMPK/SIRT1/NF-Bpathway in aging rats J/OL.Evidence-Based Complementaryand Alternative Medicine，2020.2022-06-20.https:/doi.org/10.1155/2020/27927387陶鹏宇，张悦.六味地黄丸通过调控NF-B及TGF-/Smad双信号通路减轻糖尿病肾病炎症及纤维化 J.广州中医药大学学报，2019，36（2）：245-250.8黄衍恒，叶霖，黄小荣，等.肾脏固有细胞自噬对肾纤维化作用的研究进展 J.中华肾脏病杂志，2022，38（3）：247-253.9XU Z J，SHU S，LI Z J，et al.Liuwei Dihuang pill treats diabetic nephropathy in rats by inhibiting of TGF-/SMADS，MAPK，and NF-B and upregulating expression of cytoglobinin renal tissues J/OL.Medicine，2017.2022-06-20.https:/doi.org/10.1155/2020/506363610王学敏，崔亚钦，王静，等.六味地黄丸抑制巨噬细胞激活抗肾纤维化实验研究 J.南京中医药大学学报，2015，31（4）：353-356.11SHU S，ZHANG Y，WANG Q，et al.Liuwei Dihuang pill attenuates diabetic nephropathy by inhibiting renal fibrosis viaTGF-/Smad2/3 pathway J.Computational and Mathematical Methods in Medicine，2022，15：506636.12董矜，田亚平.一氧化氮代谢异常和糖尿病 J.军医进修学院报，2004，25（1）：74-76.13李彩虹，崔亚萌，曾超，等.六味地黄丸对顺铂诱导大鼠急性肾损伤的保护作用 J.现代药物与临床，2019，34（1）：15-19.14谭颖颖，屈直，张琪.六味地黄丸含药血清减低高糖诱导的肾小管上皮细胞的氧化损伤和凋亡的研究 J.时珍国医国药，2015，26（7）：1566-1569.15郝艳鹏，张悦，刘煜敏，等.六味地黄丸对庆大霉素肾中毒大鼠肾核因子B的影响 J.中药材，2010，33（1）：86-89.1