结直肠癌患者血清lncRN...7b水平分析及与预后的关系_陈毅聪.pdf

论著结直肠癌患者血清 及 水平分析及与预后的关系陈毅聪，尚尔波，侯园婷，敖俞广州市增城区中医医院：检验科；肿瘤科，广东广州 ；广州市番禺区中心医院肿瘤科，广东广州 摘要：目的探讨结直肠癌患者血清长链非编码 （）小核 宿主基因（）及微小 （）的表达及与预后的关系。方法将 年月至 年月广州市增城区中医医院收治的 例结直肠癌患者纳入研究作为结直肠癌组，将同期于该院就诊的 例结直肠良性疾病患者纳入研究作为结直肠癌良性疾病组，另选取 例体检健康者作为对照组。比较组血清 、水平。结直肠癌组患者根据临床特征分为不同的亚组，比较亚组间 、水平。随访年，根据患者存活情况分为存活组和死亡组，比较两组 、水平。采用受试者工作特征（）曲线分析 、水平用于评估患者预后的价值。以结直肠癌患者 、水平平均值为界将患者分为高、低表达组，采用 生存曲线分析两组患者累积存活率。结果相较于对照组及结直肠良性疾病组，结直肠癌组患者血清 水平更低，而 水平更高（）；亚组分析结果显示：患者 、水平与淋巴结转移及分期有关（）。相较于存活组，死亡组 水平更低，而 水平更高（）。曲线分析显示：用于评估患者生存预后的最佳截断值为 ，曲线下面积为 ；用于评估患者生存预后的最佳截断值为 ，为 。随访年，高表达组（例）中 例存活，累积存活率为 ，低表达组（例）中 例存活，累积存活率为 ，两组累积存活率比较差异有统计学意义（）；高表达组（例）中 例存活，累积存活率 ，低表达组（例）中 例存活，累积存活率为 ，两组累积存活率比较差异有统计学意义（）。结论结直肠癌患者血清 水平下降，而 水平升高，二者水平与患者淋巴结转移、分期有关，可作为患者生存预后评估的辅助指标。关键词：结直肠癌；长链非编码；小核 宿主基因；预后 ：中图法分类号：文章编号：（）文献标志码：，；，；，：（）（）（），国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，基金项目：广州市科技计划项目（）。作者简介：陈毅聪，男，主管技师，主要从事临床检验研究。，（），（）（），（），（），（），：；结直肠癌是一类常见的消化道恶性肿瘤疾病，其发病率及病死率均居恶性肿瘤前列，且随着社会的发展，结直肠癌的发病率呈逐年上升趋势。早期结直肠癌的临床症状并不明显，多数患者确诊时已进展为中晚期，虽然结直肠癌的诊断、治疗已取得较大进展，但研究表明，结直肠癌患者 年生存率仍不足，而且约有 患者会出现转移或复发。因此，研究结直肠癌生物标志物对疾病的诊断和治疗具有十分重要的意义。长链非编码 （）是一类长度为 的非编码 分子，其可调节组蛋白的修饰、蛋白质功能活性以及染色体重塑等，并通过转录、转录后调控以及表观遗传等过程调控基因的表达。已有研究证实，可参与机体多种生理、病理过程，并在癌细胞的生长、增殖中发挥重 要 作 用。小 核 宿 主 基 因 （）属 家族成员之一，位于人类染色体 上。既往关于 在结直肠癌中表达的研究多集中于组织标本，关于其在血清中的水平及与患者临床特征关系的报道较少。微小 （）是一类内源性非编码小 分子，其主要通过抑制作用调节机体基因表达。在细胞增殖、凋亡、分化等过程中发挥着重要作用。研究表明，与多种肿瘤的发生、发展密切相关，但其在结直肠癌发生、发展中的表达情况尚未明确。基于此，本研究对结直肠癌患者血清 、水平进行分析，并研究这两项指标与结直肠癌患者预后的关系，旨在为结直肠癌的诊断、治疗及预后评估提供新的思路。资料与方法一般资料将 年月至 年月广州市增城区中医医院收治的 例结直肠癌患者纳入研究作为结直肠癌组，男 例、女 例，年龄（）岁；将同期于本院就诊的 例结直肠良性疾病患者纳入研究作为结直肠癌良性疾病组，男 例、女 例，年龄（）岁；另外，选取 例体检健康者作为对照组，男 例、女 例，年龄（）岁。所有纳入研究者均对本研究知情同意并签署知情同意书。本研究经医院伦理委员会批准。纳入及排除标准结直肠癌组纳入标准：（）经病理学检查确诊为结直肠癌；（）既往无手术史；（）拟行外科手术治疗；（）术前未行放化疗；（）年龄 岁。结直肠良性疾病组纳入标准：（）确诊为炎性疾病、损伤性疾病或非肿瘤的息肉性疾病等结直肠良性疾病；（）既往无手术史；（）年龄 岁。对照组纳入标准：（）近个月内体检健康；（）年龄 岁。排除标准：（）有其他系统或组织的恶性肿瘤；（）合国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，并感染性疾病、心肺功能障碍性疾病等其他严重疾病；（）近个月服用过免疫功能调节药物等可能影响实验结果的药物；（）依从性差；（）处于妊娠期或哺乳期；（）同时参加了其他研究项目。方法指标的检测所有纳入研究者于入组时抽取静脉血，以 离心 ，分离血清，根据 提取试剂盒说明书提取血清，并根据反转录试剂盒进行反转录，采用 实时荧光定量聚合酶链反应（）试剂盒（中国杭州博日科技有限公司）进行 检测。反应条件：，循环 次。采用 法计算各组 、相对表达水平，内参为 ，每个标本重复检测次，取平均值。引物由中国北京鼎国生物科技有限公司合成，序列见表。表引物序列检测指标序列 ：观察指标（）比较结直肠癌组、结直肠良性疾病组及对照组血清 、水平；（）以结直肠癌患者 、水平平均值为界将患者分为高表达组和低表达组，随访年，采用生存曲线分析两组患者累积存活率。（）根据结直肠癌组患者年龄、性别、有无淋巴结转移、有无远处转移、病理类型、分期、肿瘤最大径及分化程度将其分为不同亚组，比 较亚组 间 、水平；（）采用受试者工作特征（）曲线分析 、水平用于评估患者生存预后的价值；（）根据随访年后患者是否存活，将其分为存活组和死亡组，比较两组患者的血清 、水平。统计学处理采用 软件进行数据分析。计数资料以例数或百分率表示，组间比较采用检验。采用 检验对计量资料进行正态分布检验，符合正态分布的计量数据以表示，两组间比较采用独立样本检验，多组间的比较采用方差分析，进一步两两比较采用 检验。呈偏态分布的计量资料以（）表示。绘制 曲线来分析 、水平用于评估患者生存预后的价值。采用 生存曲线分析 、高表达组和低表达组患者的累积存活率，累积存活率的比较采用 检验。为差异具有统计学意义。结果组血清 、水平比较相较于结直肠良性疾病组及对照组，结直肠癌组血清 水平更低（），而 水平更高（），见表。表组血清 、水平比较（，）组别 结直肠癌组 结直肠良性疾病组 对照组 注：与对照组比较，；与结直肠良性疾病组比较，。不 同 临 床 特 征 结 直 肠 癌 患 者 血 清 、水平比较相较于无淋巴结转移或 分 期 为 期 患 者，有 淋 巴 结 转 移 或 分期为期患者血清 水平更低（），而 水平更高（），见表。表不同临床特征结直肠癌患者血清 、水平比较指标 年龄 岁 岁 国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，续表不同临床特征结直肠癌患者血清 、水平比较指标 性别 男 女 淋巴结转移 有 无 远处转移 有 无 病理类型 溃疡型 隆起型 浸润型 分期 期 期 肿瘤最大径 分化程度 低 中 高 存活组和死亡组 、水平比较存活组 、相对表达水平分别为 、，死亡组 、相 对 表 达 水 平 分 别 为 、，两组比较差异均有统计学意义（、，）。、水平用于评估结直肠癌患者生存预后的价值 曲线分析显示：用于评估患者生存预后的最佳截断值为 ，曲线下面积（）为 ；用于评估患者生存预后的最佳截断值为 ，为 ，见表。表 、水平用于评估结直肠癌患者生存预后中的价值指标截断值 灵敏度特异度 高表达组及低表达组累积存活率的比较随访年，高表达组（例）中 例存活，累积生存期为 （，）个月，累积存活率为 ，低表达组（例）中 例存活，累积生存期为 （，）个月，累积存活率为 ，两组累积存活率比较差异有统计学意义（，）。高表达组及低表达组累积存活率比较随访年，高表达组（例）中 例存活，累积生存期为 （，）个月，累积存活率为 ，低表达组（例）中 例存活，累积生存期为 （，）个月，累积存活率为 ，两组累积存活率比较差异有统计学意义（，）。讨论虽然结直肠癌的早期检出率已有所提高，并为手术根治提供了时间窗口，但仍有一定比例的患者死于复发或者转移。目前临床上针对结直肠癌的诊断及评估病情的方法包括筛查试验、结肠镜检查、直肠指国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，检、粪便隐血检查、双重对比剂钡灌肠造影、组织病理学检查等，其中诊断的金标准为结肠镜检查联合组织病理检查。“金标准”采用的检查方法具有较高的灵敏度和特异度，有助于医师在疾病进展前期进行根治治疗，但均包含了侵入性操作且花费较高，导致患者依从性较差。而其他几类方法虽操作简便、成本较低，但因灵敏度和特异度不高，应用受限。因此寻找一种容易检测、灵敏度高的生物学标志物具有十分重要的意义。既往的研究表明，结肠上皮细胞中的遗传以及表观遗传学变化的累积是促进结直肠癌发生、发展的因素 。随着分子生物学的发展，与肿瘤的关系逐渐受到广大医学研究者的关注，研究取得一定进展 。大量 参与了结直肠癌的发生、发展过程，并发挥重要作用。在结直肠癌发生的早期阶段已有所升高，患者血标本中其水平也有所升高。等 的研究发现，可对 信号通路以及调亡信号产生抑制作用，进而促进结直肠癌的发生发展，并提示 可作为评估结直肠癌患者预后指 标 之 一。为 小 核 宿 主 基 因（）之一，既往有研究报道，其在结直肠癌组织中的表达水平与淋巴结转移、分期、远处转移密切相关。等 的研究则提示，血浆 可作为结直肠癌早期诊断及预后评估的生物学标志物。本研究则采用较易获得的血清作为检测标本。结果显示，相较于结直肠良性疾病患者或健康者，结直肠癌患者血清 水平有所下降。进一步根据患者临床特征进行亚组分析，结果显示，相较于无淋巴结转移或 分期为期患者，有淋巴结转移或分期为期患者血清 水平更低（）。这与既往研究结果较为一致，但本研究结果发现血清 水平在有无远处转移的亚组间比较差异无统计学意义（），这可能与标本来源不同、检测方式不同有关。是一类长度为 个核苷酸的非编码 ，其不能编码蛋白质，主要作用机制为通过与靶基因的 端非翻译区相结合从而对靶基因的表达进行抑制，在疾病的发生发展、过程中发挥着关键作用。位于人号染色体上，在多种肿瘤组织中存在异常表达，可能参与癌症的发生、发展。本研究结果显示，相较于结直肠良性疾病患者或健康人群，结直肠癌患者血清 水平显著升高。进一步根据患者临床特征进行亚组分析，结果显示，相较于无淋巴结转移或 分期为期患者，有淋巴结转移或 分期为期患者血清 水平更高，这提示 表达 水 平 与结直肠癌 患 者病 情存在 一 定联系。本研究还通过 曲线分析了血清 、水平用于评估结直肠癌患者生存预后的价值。结果显示，的最佳截断值为 ，为 ；的最佳截断值为 ，为 ；上述两项指标均具有较高的灵敏度和特异度。随 访 结 果 显示，相较于 低 表 达 或 高 表 达 患 者，高表达或 低表达患者累积存活率更高，说明血清 水平较低或 水平较高患者预后较差。本研究也存在以下不足：（）为单中心研究，样本量较小；（）未进一步分析血清 水平与患者病理组织 表达的相关性，难以从分子生物学角度进行分析。综上所述，结直肠癌患者血清 水平有所下降，而 水平有所上升，其水平在诊断患者淋巴结转移、分期中具有一定价值，并可作为辅助指标用于评估患者预后。参考文献 ，（）：，（）：，：，（）：刘晓雪，宇传华，周薇，等 中国近 年间结直肠癌死亡趋势分析中国癌症杂志，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：梁思远，徐艳松，陆绍龙，等 在结直肠癌中的表达及功能预测 结直肠肛门外科，（）：国际检验医学杂志 年月第 卷第期 ，（）：胡秀秀，孙慧玲，潘玉琴 在结直肠癌诊断、治疗及预后中的研究进展 临床检验杂志，（）：，（），（）：，（）：，（）：，（），（）：，：，（）：，：，（）：，（）：梁思远，徐艳松，陆绍龙，等 在结直肠癌中的表达及功能预测结直肠肛门 外科，（）：，（）：，（），（）：，（）：（收稿日期：修回日期：）（上接第 页），（）：高彦军，林红卫，王在强，等 途径在 诱导肺泡上皮细胞凋亡中的作用及机制山西医科大学学报，（）：戴芳，林泽森，买鹏宇，等 基因