２０２３年２月第４８卷第３期Ｖｏｌ.４８，Ｎｏ.３Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２０２３［收稿日期］２０２２⁃０７⁃０９［基金项目］国家自然科学基金项目（８１９７３５０５，８２１７４００８）；中央高校基本科研业务费项目［通信作者］∗曾克武，研究员，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ＺＫＷ＠ｂｊｍｕ．ｅｄｕ．ｃｎ；∗张贵民，研究员，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｌｕｎａｎｚｈａｎｇｇｕｉｍｉｎ＠ｙｅａｈ．ｎｅｔ［作者简介］赵眉眉，Ｅ⁃ｍａｉｌ：ｍｅｉｍｅｉｚｈａｏ＠ｐｋｕ．ｅｄｕ．ｃｎ荆防颗粒抗感染性肺炎的靶点发现及分子机制研究赵眉眉１，姚璐１，姚景春２，孙成宏２，张贵民２∗，曾克武１∗（１．北京大学药学院天然药物及仿生药物国家重点实验室，北京１００１９１；２．鲁南制药集团股份有限公司中药制药共性技术国家重点实验室，山东临沂２７６００６）［摘要］基于靶点“钩钓”策略鉴定荆防颗粒发挥抗感染性肺炎的直接药理靶点群，基于靶点相关药理学信号通路探究荆防颗粒治疗感染性肺炎的分子机制。制备荆防颗粒药效成分键合的磁性微球，并与细菌脂多糖（ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ，ＬＰＳ）诱导的小鼠肺炎组织裂解液进行孵育，通过高分辨质谱对捕获的蛋白进行分析，筛选与荆防颗粒提取物存在特异性结合的作用靶点群。利用京都基因与基因组百科全书（ＫｙｏｔｏＥｎｃｙｃｌｏｐｅｄｉａｏｆＧｅｎｅｓａｎｄＧｅｎｏｍｅｓ，ＫＥＧＧ）分析靶点蛋白群相关信号通路。在此基础上，进一步构建ＬＰＳ诱导的小鼠感染性肺炎模型，通过苏木精⁃伊红（ｈｅｍａｔｏｘｙｌｉｎ⁃ｅｏｓｉｎ，ＨＥ）染色、免疫组化染色等方法对靶点蛋白群可能的生物学功能进行验证。累计从肺组织中鉴定到１８６个荆防颗粒特异性结合的蛋白，基于ＫＥＧＧ通路分析发现这些靶点蛋白作用的信号通路主要包括沙门菌感染、血管和肺上皮黏着连接、核糖体相关的病毒复制、病毒的内吞作用和脂肪酸降解相关信号通路；反映荆防颗粒的靶点功能主要与肺部炎症与免疫、肺能量代谢、肺微循环和病毒感染有关。最后，基于体内炎症模型发现，荆防颗粒显著改善ＬＰＳ所致感染性肺炎模型小鼠的肺泡结构并下调炎症标志蛋白肿瘤坏死因子α（ＴＮＦ⁃α）和ＩＬ⁃６表达；上调线粒体功能关键蛋白细胞色素Ｃ氧化酶４（ＣＯＸⅣ）表达量及ＡＴＰ含量；上调微循环相关蛋白ＣＤ３１与Ｏｃｃｌｕｄｉｎ表达；上调病毒感染相关蛋白ＤＤＸ２１与ＤＤＸ３表达，提示荆防颗粒能够抑制肺部炎症、改...
