簕竹属竹叶中黄酮类成分分析及其抗氧化活性_安容苗.pdf

第 43 卷第 1 期2023 年 2 月林产化学与工业Chemistry and Industry of Forest ProductsVol 43 No 1Feb 2023收稿日期:2021-11-22基金项目:国家自然科学基金面上项目(31570345)作者简介:安容苗(1996)，女，河南焦作人，硕士生，主要从事竹叶活性成分开发利用研究*通讯作者:郭雪峰，研究员，硕士生导师，研究领域为天然活性产物的开发利用;E-mail:gxf71622 icbr ac cn。doi:10 3969/j issn 0253-2417 2023 01 012簕竹属竹叶中黄酮类成分分析及其抗氧化活性AN ongmiao安容苗，袁 婷，郭雪峰*(国际竹藤中心，国家林业和草原局竹藤科学与技术重点实验室，北京 100102)摘要:为探索簕竹属主要竹种竹叶提取物中黄酮类成分的开发利用，以簕竹属 10 个竹种的竹叶为原料，提取、分离和纯化后得到竹叶提取物，建立了测定竹叶提取物中 5 种黄酮类成分的 HPLC方法，采用 DPPH 法和 ABTS 法对竹叶提取物的抗氧化活性进行评价。竹叶中 5 种黄酮类成分异荭草苷、荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷和木犀草苷的 HPLC 方法为:采用 YMC-Pack ODS-A 色谱柱(250 mm 4 6 mm，5 m)，以 0 5%乙酸/水溶液(A)和乙腈(B)为流动相，14%B 等梯度洗脱 40 min，进样量 10 L，流速 1 mL/min，柱温30，检测波长 340 nm。此条件下，5 种黄酮类成分在 40 min 内实现完全分离，分离度均大于 1 2，其质量浓度与峰面积具有良好的线性相关性，相关系数 20 999，加标回收率在 94 36%105 37%之间，相对标准偏差(SD)在 0 98%3 48%之间，表明该方法稳定可靠。测得的 10 种簕竹属竹叶提取物中 5 种黄酮类成分的总量为62 30 223 24 mg/g，其中凤尾竹竹叶提取物中的质量分数最高，为 223 24 mg/g。10 种簕竹属竹叶提取物对 DPPH 自由基(DPPH )的半抑制质量浓度(IC50)值为2858 44 37 mg/L，对 ABTS 自由基(ABTS+)的 IC50值为 8 58 11 07 mg/L，清除能力均略弱于 Vc 和 BHT。对 DPPH 清除效果较好的竹种为大眼竹(IC50=28 58 mg/L)、青皮竹(IC50=28 68 mg/L)和凤尾竹(IC50=31 65 mg/L)，对 ABTS+清除效果较好的竹种为凤尾竹(IC50=8 58 mg/L)、银丝竹(IC50=9 11 mg/L)和青皮竹(IC50=9 27 mg/L)。其中青皮竹、凤尾竹是清除效果最好、最具有开发利用价值的 2 个竹种。关键词:HPLC;簕竹属;竹叶提取物;黄酮类;抗氧化活性中图分类号:TQ35文献标志码:A文章编号:0253-2417(2023)01-0097-07引文格式:安容苗，袁婷，郭雪峰 簕竹属竹叶中黄酮类成分分析及其抗氧化活性J 林产化学与工业，2023，43(1):97103Quantification and Antioxidant Activity of Flavonoids in Bamboo LeavesExtract of BambusaAN ongmiao，YUAN Ting，GUO Xuefeng(NFGA Key Laboratory for Bamboo attan Science and Technology，International Center forBamboo and attan，Beijing 100102，China)Abstract:To explore the development and utilization of flavonoids in the leaves of the main bamboo species of Bambusa，extracts ofleaves from ten bamboo species were obtained by extraction，separation and purification，using bamboo leaves from Bambusa as thematerials A HPLC method was established for the determination of 5 flavonoids in extract of bamboo leaves，and the antioxidantactivities of those extracts were evaluated by DPPH and ABTS assays The HPLC method for the determination of 5 flavonoidsisoorientin，orientin，vitexin，isovitexin and luteoside in extract of bamboo leaves was using YMC-Pack ODS-A column(250 mm 46 mm，5 m)with 05%acetic acid/water(A)and acetonitrile(B)as the mobile phases，elution with 14%B for 40 min，theinjection volume 10 L，the flow rate 1 mL/min，the column temperature 30 and the detection wavelength at 340 nm Underthese conditions，the five flavonoids were completely separated within 40 min，the degree of separation was greater than 1 2，andthe concentration had a good linear correlation with the peak area(20999)The recovery rate was 94 36%105 37%，andthe relative standard deviation(SD)was 098%348%These results indicated that the method was stable and reliable Thetotal contents of 5 flavonoids in extract of leaves from 10 bamboo species of Bambusa measured under these conditions were98林产化学与工业第 43 卷62 30 223 24 mg/g，and the mass fraction of bamboo leaves extract from Bmultiplex ffernleaf was the highest(223 24 mg/g)The half inhibitory mass fraction(IC50)values of DPPH and ABTS+were 28 58 44 37 mg/L and 8 58 1107 mg/L，respectively，slightly higher than those of Vc and BHT The bamboo species with better DPPHscavenging ratewere B eutuldoides(IC50=2858 mg/L)，B textilis(IC50=2868 mg/L)and B multiplex f fernleaf(IC50=3165 mg/L)Thebamboo species with better ABTS+scavenging rate were B multiplex f fernleaf(IC50=8 58 mg/L)，B multiplex f silverstripe(IC50=9 11 mg/L)and B textilis(IC50=9 27 mg/L)The IC50values of B multiplex f fernleaf and B textilis of two kindsof radicals were lower，which were the two bamboo species with the best removal effect and the most value of development andutilizationKey word:HPLC;Bambusa;bamboo leaves extract;flavonoids;antioxidant activity簕竹属(Bambusa)为禾本科竹亚科丛生竹类植物，在热带和亚热带地区广泛分布。世界范围内的簕竹属植物有 100 余种，我国共有 71 种之多，多产于华南和西南等地1。竹叶中含有丰富的次生代谢产物，包括黄酮类及酚类、多糖、氨基酸以及挥发性物质等2。竹叶提取物的功能因子主要是黄酮糖苷，并以碳糖苷为主，4 种主要的竹叶碳苷黄酮分别是荭草苷、异荭草苷、牡荆苷和异牡荆苷3 4。竹叶提取物有着显著的抗自由基、抗氧化5 6、抑菌7 8、调节血糖和血脂9 10、抗衰老11 以及食品保鲜12 等功能，可作为天然功能性药物、食品添加剂和抗氧化剂等，应用于医药和食品等领域13，具有广阔的开发应用前景。因此，有必要建立一种竹叶提取物中主要成分含量的测定方法，为其质量评价提供参考依据。分光光度法和高效液相色谱(HPLC)法是常用的成分及含量分析测定方法，但是分光光度法准确度不高且专一性差，通常用于黄酮类含量的测定;而 HPLC 法具有准确、高效、操作简单等特点，适于对竹叶提取物中的主要成分进行快速分析检测14。本研究以簕竹属 10 个竹种的竹叶为原料，对有效成分进行提取分离，采用 HPLC 法测定竹叶中 5 种黄酮类成分的含量，并通过 DPPH 法和 ABTS 法评价竹叶提取物的抗氧化能力，以期为竹叶资源的合理开发与利用提供参考。1实 验1 1原料、试剂和仪器竹叶于 2019 年 11 月在江西省林科院竹种园，采摘鲜竹叶样品各 200 g，经江西省林科院专家鉴定为簕竹属(Bambusa)，具体竹种信息见表 1。竹叶样品于室内自然阴干，去梗后经流水式粉碎机粉碎，保表 1实验所用簕竹属各竹种信息Table 1 Information of bamboo species of Bambusaused in the experiment编号No竹子种类species of bamboo1凤尾竹 B multiplex f fernleaf(A Young)T P Yi2小琴丝竹 B multiplex(Lour)aeusch ex Schult et Schultf Alphonse-Karr3青皮竹 B textilis McClure4桃枝竹 B glaucescens(Willd)Siebold ex Munro var shimadai(Hayata)L C Chia et But5河边竹 B multiplex T H Wen6黄金间碧竹 B vulgaris Schrad ex J C Wendl Vittata7小佛肚竹 B ventricosa McClureNana8大眼竹 B eutuldoides McClure9凤凰竹 B multiplex(Lour)aeusch ex Schult et Schult f10银丝竹 B multiplex f silverstripe(A Young)T P Yi存备用。木犀草苷标准品(纯度