来曲唑片仿制药与原研药溶出一致性评价研究_严家文.pdf

第 卷第 期 年 月广 州 化 工 .来曲唑片仿制药与原研药溶出一致性评价研究严家文，朱 琼（泰州医药高新技术产业园区，江苏 泰州；泰州市药品检验院，江苏 泰州）摘 要：建立来曲唑片溶出曲线测定的方法，评价仿制药与原研药体外溶出曲线的相似性。采用高效液相色谱法，测定来曲唑片在 种介质中的溶出曲线。来曲唑片仿制药与原研药在 .盐酸溶液介质中，溶出 主成分的平均累积溶出量均已达到 以上，在 .醋酸盐缓冲液、.磷酸盐缓冲液及水 种溶出介质中的溶出曲线，经计算相似因子（）均大于，判定仿制药与原研药溶出曲线相似。本文的建立的溶出曲线测定方法验证结果良好。关键词：来曲唑片；溶出度；高效液相色谱法；一致性评价中图分类号：.文献标志码：文章编号：（）第一作者：严家文（），主管药师，主要从事仿制药工艺开发。通讯作者：朱琼（），主管药师，主要从事药物分析工作。，（，；，）：，.，.，.，.，.：；来曲唑片是一种新型芳香化酶抑制剂，适用于绝经后妇女的晚期乳腺癌治疗，对于雌激素受体阴性的患者，如果他们对他莫昔芬有积极的临床反应，可考虑使用该产品；此外还适用于绝经后雌激素受体阳性妇女早期乳腺癌的辅助治疗。来曲唑片原研公司为诺华制药，已在欧盟、美国、日本、中国等国家获批上市，商品名为，目前中国境内有 家仿制药企业上市，家通过一致性评价，但未见相关研究文献。本文参照来曲唑片的国内外药典标准、美国食品药品监督管理局（）溶出度方法数据库方法，在有关文献的基础上，按国家局普通口服固体制剂溶出曲线测定与比较指导原则，建立了一种新的溶出曲线测定方法，并进行了方法学验证，用以对比仿制药和原研药在 种溶出介质中的溶出行为，评价体外溶出的一致性，为后续产品开展仿制药质量与疗效一致性评价提供参考。仪器与试药.仪器及试剂 型溶出仪，安捷伦公司；溶出度测试仪，抚州金时速仪器设备有限公司；高效液相色谱仪（型），安捷伦公司；型高效液相色谱仪，安捷伦公司；紫外检测器，安捷伦公司；型电子天平，梅特勒公司；型 计，梅特勒公司。盐酸（分析纯），国药集团；冰醋酸（分析纯），国药集团；无水乙酸钠（分析纯），国药集团；磷酸二氢钾（分析纯），国药集团；氢氧化钠（分析纯），国药集团；乙腈（色谱纯），国药集团；甲醇（色谱纯），国药集团。.试 药来曲唑对照品（批号：，含量：.），中国 食 品 药 品 检 定 研 究 院；来 曲 唑 原 料 药（批 号：，含量：.），重庆圣华曦药业股份有限公司；来 曲 唑 片（批 号：、，规格：.），自制仿制药；来曲唑片（批号：，规格：.，原研药，执行标准），诺华制药有限公司。第 卷第 期严家文，等：来曲唑片仿制药与原研药溶出一致性评价研究 方法与结果.色谱条件色谱柱：（.，）；流动相：乙腈水（）；检测波长：；柱温：；流速：.；进样量：。.样 品.供试品溶液的配制取来曲唑片仿制药和原研药各 片，照中国药典 年版四部通则 溶出度与释放度测定方法第二法（桨法），将 .盐酸溶液，.醋酸盐缓冲液，.磷酸盐缓冲液和水 作为溶出介质，转速 ，分别在溶出、和 时取样，过滤，取续滤液作为供试品溶液。.对照品溶液的配制线性储备液（）：精密称取来曲唑对照品 ，置 容量瓶中，加流动相溶解并稀释至刻度，摇匀，即得线性储备液。分别移取储备液.、至 容量瓶中，用各溶出介质稀释至刻度，摇匀，即得各介质下的.、.、.、.、.、.线性溶液。.空白溶液的配制照来曲唑片配方，平行称取 份空白辅料（，相当于 片来曲唑片中的辅料用量），在 种溶出介质中分别溶出 时取样，过滤，取续滤液即得。.专属性取“.”项下 种溶出介质的各溶液，照“.”项下条件测定，结果见图，结果表明，来曲唑出峰处.无干扰，.，.，为来曲唑主峰保留时间，为理论塔板数，为分离度，本方法专属性良好。图 专属性典型图谱.线性与范围取“.”项下对照品溶液，照“.”项下色谱条件测定，以峰面积（）为横坐标，浓度（）为纵坐标绘制标准曲线，线性回归方程见表。结果表明，来曲唑在各介质中.浓度范围内线性良好。表 线性回归方程与线性范围 溶出介质线性回归方程线性范围（）.盐酸溶液.醋酸盐缓冲液.磷酸盐缓冲液.水.重复性取来曲唑片（批号：），照“.”项下配制供试品溶液，份供试品在溶出 时取样，溶出度的 值为.。结果表明，该方法重复性良好。.中间精密度在不同的时间，由不同的试验人员，采用不同型号的溶出仪和高效液相色谱仪，测定与重复性相同批次来曲唑片的溶出度。样品配制方式同重复性项下，照“.”项色谱条件测定，两名实验员共 份样品在溶出 时取样，溶出度 值为.。结果表明，该方法中间精密度良好。.准确度试验来曲唑片在 种溶出介质中溶出曲线第一个时间点的累积溶出量均大于，故以来曲唑片全部溶出浓度的、三个水平考察准确度，包含整个溶出曲线的浓度范围。精密称取来曲唑原料药.、.、.，空白辅料 ，置 容量瓶中，加溶出介质稀释至刻度，过滤，取续滤液为供试品溶液，每个浓度平行配制 份，照“.”项色谱条件测定。每个浓度的平均回收率均在.，三个浓度共 份供试品溶液回收率的 值为.，结果表明，来曲唑片在“.”项中所述 种溶出介质中准确度良好。.耐用性取 片来曲唑片（批号），以水为溶出介质进行溶出试验，溶出 ，自动取样 ，过滤，取续滤液作为供试品溶液，固定除流速外的色谱条件，流速在.范围内变化，或固定除柱温外的色谱条件，柱温在 范围内变化，变化色谱条件下考察耐用性，溶出度（）与初始色谱条件下的测定结果 值为.。结果表明，本方法耐用性良好，当色谱条件发生微小变化时，不影响测定结果。.稳定性分别将“.”项下供试品溶液与“.”项下对照品溶液，在室温下放置 、，照“.”项色谱条件测定，来曲唑供试品溶液和对照品溶液的峰面积 值分别为.，.。结果表明，来曲唑溶液在室温条件下 内稳定。.溶出曲线相似度测定采用非模型依赖法中的相似因子（）法，进行来曲唑仿制 广 州 化 工 年 月药与原研药的溶出曲线相似性比较，计算公式为：（）（）.式中：和 分别为各取样时间点原研药和仿制药的平均累计溶出率，为取样点个数。选取 批样品（批号：、）进行测试。按照“.”项下制备样品，照“.”项下测定，结果见表。表 来曲唑仿制药与原研药在不同时间点取样的溶出度结果（“”表示无需计算）（“”）介质批号不同时间点取样溶出度测定结果 溶出 溶出 溶出 溶出 溶出 溶出 .盐酸溶液（）.（）.（）.（）.醋酸盐缓冲液（）.（）.（）.（）.磷酸盐缓冲液（）.（）.（）.（）.水（）.（）.（）.（）.图 来曲唑片四种介质的溶出曲线.结果显示，批来曲唑片仿制药与原研药在 .盐酸介质中，溶出 主成分的平均累积溶出量均达到 以上，见表 和图（），可判定仿制药与原研溶出曲线相似，不再进行相似因子 的计算。批来曲唑仿制药与原研药在 .醋酸盐缓冲液、.磷酸盐缓冲液及水三种溶出介质中，溶出曲线相似因子 均大于，可判定仿制药与原研溶出曲线相似，因此来曲唑片仿制药与原研药的体外溶出行为一致，结果见表 及图（）。结 论本文中的溶出度测定方法，其系统适应性、专属性、线性、重复性、中间精密度、准确度、稳定性均良好，适用于来曲唑片的体外溶出评价。目前来曲唑片原研药执行标准为，该标准中溶出度测定方法是紫外分光光度法，本文采用了高效液相色谱法，可以在线分离并准确定性定量，结果直观显示，测定结果更稳定。来曲唑片已收载在中第 卷第 期严家文，等：来曲唑片仿制药与原研药溶出一致性评价研究 国药典 年版二部，目前药典中仅提出以.盐酸溶液一种溶出介质，未涵盖药物在人体吸收的全过程，而本文使用的几种溶出介质，可以模拟药物经过胃肠道排空的全过程，相对而言对于生物等效性评价有相对较强的指导意义。美国 组织对于一些药品，认可使用体外溶出度实验替代体内生物利用度实验。相对于其他方式，体外溶出度和体内生物利用度实验相对简便，可控性强，易重复，。体外溶出度实验能够对药物制剂、生物利用度、药物动力学情况加以初步评价，在比较国产及原研药的生物利用度方面有着广泛应用。目前评价体外溶出方法有等效限法和相似因子法相比，后者计算更为简单，可以在最大程度上确定对照药物和实验药物溶出度差异情况，另外，等效限法无法计算出等效限，前者以后者为基础，可以显示出实验以及对照样本溶出相似情况。值得注意的是，相似因子法也能够视为研究药物生物利用度以及等效性的体外评价方式，对于 的药物，经体内评价大都为等效，但对于 的药物，则一般需要开展体内生物等效性评价，。就固体药物制剂体外溶出度统计学分析而言，相较于其他方式，相似因子法计算精准，简单易行，能够全面确定实验试剂和对照样本之间的差异情况，且在确定和评价国产药物和原研药差别方面，具有相当重要临床意义，值得在临床中进一步推广使用。我国仿制药数量巨大，正全面开展仿制药一致性评价工作，随着我国加入国际人用药品注册技术协调会（），国家药品监督管理局对仿制药的监管也日趋严格，因此本文借鉴国际上的先进的经验，绘制仿制药与原研药在不同 下的溶出曲线，评价药品的内在质量，预测生物等效性。但本次只选择了自制的来曲唑片进行研究，后期可针对不同厂家的来曲唑片，开展溶出行为一致性研究，并推广到其他制剂的体外溶出对比试验中，为顺利通过仿制药质量和疗效一致性评价提供参考。参考文献 尹茜，于磊，徐珽.他莫昔芬预防乳腺癌超药品说明书用药分析中国药业，（）：.孙婧，王琴，汪麟，等.绝经后早期乳腺癌接受芳香化酶抑制剂治疗后骨丢失的前瞻性研究中华肿瘤杂志，（）：.，.：，（）：.邓华，刘婕，雷招宝.张门诊处方来曲唑片应用分析中国医院用药评价与分析，（）：.，.（）.（），（）：.施磊，叶隽，宋磊.脂必泰胶囊溶出度测定的方法研究药学实践杂志，（）：.杨锐，李玲玲，李婷，等.阿齐沙坦片体外溶出方法上海医药，（）：.陆颖，徐子寒.姜黄素固体分散体处方工艺优化及体外溶出度评价中国药业，（）：.周静.固体药物制剂的体外溶出度的统计学评价分析中西医结合心血管病电子杂志，（）：.国家药典委员会.中华人民共和国药典 年版.四部北京：中国医药科技出版社，：.，.，（）：.，（）：.周璟明，陈秀明，林斌，等.法测定不同溶出介质中的阿莫西林胶囊溶出曲线福建分析测试，（）：.孙晓阳，王彬杰，张瑜，等.法测定阿那曲唑片溶出度及与原研产品的一致性评价沈阳药科大学学报，（）：.，.，（）：.邹舒鹏，何正，黄镇，等.法测定患者血浆中替考拉宁浓度及临床实践中国药师，（）：.李敏，杨文智，黄晓龙，等.国际人用药品注册技术协调会仿制药国际协调进展中国临床药理学杂志，（）：.张兰平，王媛.现行国内外药品工艺验证指南解读中国医药工业杂志，（）：.任璐彤，周刚，高佳丽.呋塞米片原研药与仿制药溶出曲线的研究中国现代应用药学，（）：.李雅倩，黄洁，杨双，等.吉非替尼片的药代动力学和生物等效性研究中国临床药理学杂志，（）：.，.：“？”，（）：.