黎药牛耳枫研究进展_彭政忠.pdf

基金项目:贵州省科技计划项目(黔科合后补助 2020 3003)。作者简介:彭政忠(1989)，男，苗族，在读硕士，副主任药师，研究方向为中药新药、保健食品研发及质量控制研究。E mail:2192681165 通信作者:唐靖雯(1980)，女，苗族，本科，主任药师，研究方向为中药新药、保健食品研发及质量控制研究。E mail:黎药牛耳枫研究进展彭政忠1，2张丽艳2唐靖雯1*潘梅1卢礼平1杨桃11 贵州威门药业股份有限公司，贵州贵阳550018;2 贵州中医药大学药学院，贵州贵阳550025【摘要】从黎药牛耳枫化学成分、药理活性、质量评价、制剂产品开发等方面进行归纳总结，综述了黎药牛耳枫的化学物质基础，抗炎、抗胆碱、抗肿瘤等药理活性，总黄酮类成分、多指标成分、指纹图谱等质量控制方法，以及已上市制剂产品情况，为进一步开发利用提供参考。【关键词】牛耳枫;化学成分;药理活性;质量评价【中图分类号】285【文献标志码】A【文章编号】1007 8517(2023)01 0053 05esearch Progress of Li Medicine Daphniphyllum Calycinum BenthPENG Zhengzhong1，2ZHANG Liyan2TANG Jingwen1*PAN Mei1LU Liping1YANG Tao11 Guizhou Warmen Pharmaceutical Co，Ltd，Guiyang 550018，China;2.School of Pharmacy，Guizhou University of Traditional Chinese Medicine，Guiyang 550025，ChinaAbstract:The chemical composition，pharmacological activity，quality evaluation，as well as pharmaceutical product develop-ment of Daphniphyllum calycinum Benth were summarized in this paper The chemical basis，anti inflammatory，anticholine，anti-tumor and other pharmacological activities，total flavonoids，multi index components，fingerprint and other quality control methods，as well as the development of the preparation were reviewed，providing reference for further development and utilizationKey words:Daphniphyllum Calycinum Benth;Chemical Composition;Pharmacologi cal Activities牛耳枫为虎皮楠科植物牛耳枫 Daphniphyllumcalycinum Benth.的干燥地上部分，收载于 贵州省中药材民族药材质量标准(2019 年版 第一册)，具有清热解毒、活血散瘀、祛风止痛的功效 1。牛耳枫是黎族民间常用药，在黎族地区用其治疗外伤和炎症 2。在 中华本草 3 全国中草药汇编 4 及 福建药物志 5 广西民族药简编 6、海南植物志 7 等均有记载，具有很高的药用价值和开发前景。由牛耳枫和辣蓼组成的复方牛耳枫片，具有理气健胃、除湿化滞等功效，治疗急慢性肠胃炎，临床疗效佳 3。笔者综述了牛耳枫化学成分、药理活性、质量评价、制剂产品开发等方面，为黎药牛耳枫进一步研究及综合利用提供参考。黎药牛耳枫研究进展思维导图如图1 所示。图 1黎药牛耳枫研究进展思维导图35中国民族民间医药2023 年1 月第32 卷第1 期Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2023，Vol.32，No.11化学成分牛耳枫化学成分主要包括生物碱类化合物和黄酮类化合物，还含有少量的三萜类、甾醇类、胡萝卜苷类和酚酸类等其它化合物，其中槲皮素、芦丁、山奈酚、木犀草素、5，7 二羟基色原酮等均为常见的黄酮类化合物8。目前，在对牛耳枫化合物及其成分含量方面研究相对较多。王永丽等9 从牛耳枫乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离、鉴定出 7 个化合物，其中5 oxymaltol、2，6 dimethyl 3 hydroxychromone 为首次从该植物中分离获得。李晶晶等10 采用柱层析和重结晶等分离技术，从牛耳枫果实甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物中分离、鉴定出 10 个化合物，其中 5，7 二羟基色原酮、对羟基苯甲酸、5，7，4 三羟基 3 甲基黄酮等 9 个化合物首次从该植物的果实中分离得到。张小坡等11 采用多种柱色谱方法从牛耳枫枝叶乙醇提取物中分离、鉴定出 8 个化合物，其中羽扇豆酮首次从交让木属植物中分离得到，以及胡萝卜苷、槲皮素、芦丁为首次从该植物中分离得到。朱文粮等12 采用各种色谱方法从牛耳枫的茎叶乙醇浸提物中分离、鉴定出 8 个生物碱。李晶晶等13 采用柱层析分离技术和重结晶等方法从牛耳枫叶的乙酸乙酯层分离、鉴定出 3个化合物，其中反式对甲氧基肉桂酸、木樨草素为首次从该属植物中分离得到。沈寿茂等14 从牛耳枫的茎和叶中分离得到 4 个新的水飞蓟生物碱，即水飞蓟素 A D。近年来从牛耳枫中分离、鉴定的化合物见表 1。表 1牛耳枫中分离、鉴定的化合物序号来源化合物文献1牛耳枫乙酸乙酯部位和正丁醇部位分离鉴定出 7 个化合物，分别为 5 oxymaltol、secodaphniphylline、2，6 dim-ethyl 3 hydroxychromone、deoxycalyciphylline B、calyciphylline A、daphnezzo-mine M、deoxyisocalyciphylline B 92牛耳枫果实甲醇提取物的乙酸乙酯萃取物分离鉴定出 10 个化合物，分别为对甲氧基苯甲酸、对羟基苯甲醛、5，7 二羟基色原酮、对羟基苯甲酸、反式对羟基肉桂酸、5，7，4 三羟基 3 甲基黄酮、山奈酚、胡萝卜苷、木犀草素和 3，4 二羟基苯甲酸。103牛耳枫枝叶乙醇提取物分离鉴定出 8 个化合物，分别为羽扇豆酮、谷甾醇、胡萝卜苷、deoxycaly-ciphylline B、daphiodhanins D、calyciphylline B、槲皮素、芦丁。114牛耳枫的茎叶乙醇浸提物分离鉴定出 8 个化合物，分别为 Methyl homosecodaphniphyllate、DaphnezomineM、Caldaphni dine E、Calyciphylline F、Calyciphylline B、DeoxycalyciphyllineB、Daphnicyclidin H、Macropodumine C 125牛耳枫叶的乙酸乙酯层 分离鉴定出 3 个化合物，分别为反式对甲氧基肉桂酸、木樨草素、槲皮素。136牛耳枫的茎和叶水飞蓟素 A、水飞蓟素 B、水飞蓟素 C、水飞蓟素 D 142药理活性2.1抗炎作用宋青等15 进行了牛耳枫80%乙醇提取物的体内外抗炎作用及其机制研究，通过建立 LPS 诱导的小鼠巨噬细胞 AW264.7 体外炎症模型，结果显示，牛耳枫提取物抑制了 TNF 、IL 10、IL 1 的分泌，并呈现剂量依赖性。通过 LPS 诱导建立了小鼠内毒素血症模型，结果显示，牛耳枫提取物对小鼠血清细胞因子和炎性细胞因子有抑制作用;牛耳枫提取物呈剂量依赖性抑制了肝脏中 iNOS 和 TNF 蛋白的表达，对小鼠内毒素血症产生较好的预防和治疗作用。任守忠等16 以牛耳枫和辣蓼为原料制备枫蓼提取物，分析其抗炎机制，研究表明枫蓼提取物 23.4、46.8g/kg 均能明显抑制小鼠耳肿胀，枫蓼提取物16.2 g/kg、32.4 g/kg 均能显著抑制角叉菜胶致大鼠足跖肿胀，且均能不同程度地降低炎足组织中TNF 、IL 1、PGE2 和 MDA 的含量，但对 NO无明显影响。结果表明，枫蓼提取物可降低小鼠腹腔毛细血管通透性、减少渗出，减轻小鼠耳肿胀和大鼠足肿胀，具有良好的抗炎作用。刘洪梅等17 以牛耳枫和辣蓼为原料制备枫蓼发酵提取液，45中国民族民间医药2023 年1 月第32 卷第1 期Chinese Journal of Ethnomedicine and Ethnopharmacy，2023，Vol.32，No.1探究其镇痛、抗炎、抗胃溃疡作用，研究表明，枫蓼发酵提取液显著抑制乙酸致小鼠扭体反应，在一定程度上能抑制乙酸致小鼠毛细血管通透性的升高，还能显著抑制二甲苯致耳肿胀和蛋清致足肿胀，减弱乙醇对胃黏膜的损伤以及减少血清中 IL 1、IL 1 的水平，同时抑制组织中 HIS渗出，对 PED2 渗出也有一定抑制作用。结果表明，枫蓼发酵提取液质量稳定可控，具有良好的抗炎、镇痛、抗胃溃疡作用。2.2抗胆碱酯酶活性王永丽等9 从牛耳枫中得到的 deoxycalyciphylline B、deoxyisocalyciphylline B具有抗乙酰胆碱酯酶(AChE)活性，secodaph-niphylline、deoxyisocalyciphylline B 具有较强的抗丁酰胆碱酯酶(BChE)活性。见表 2。表 2牛耳枫抗胆碱酶活性牛耳枫中化学成分作用靶点IC50/mol/Ldeoxycalyciphylline B抗乙酰胆碱酯酶(AChE)128.83 21.41deoxyisocalyciphylline B56.15 11.02secodaphniphylline抗丁酰胆碱酯酶(BChE)0.31 0.15deoxyisocalyciphylline B8.13 0.78吴裕红等18 以牛耳枫和辣蓼为原料分别制备枫蓼提取物，在乙酰胆碱引起的家兔小肠平滑肌痉挛模型中，对空肠而言，乙酰胆碱使小肠平滑肌收缩活动加强，给予枫蓼水提物、醇提物各剂量(0.125 g/mL、0.25g/mL、0.5 g/mL)均可使平滑肌收缩张力下降，进而抑制乙酰胆碱引起的小肠平滑肌痉挛;对于回肠平滑肌，枫蓼醇提物各剂量对乙酰胆碱引起的痉挛均有明显的颉颃作用，最低有效浓度为 0.125 g/mL，而水提物的最低有效浓度为 0.5 g/mL。见表 3。该抑制作用可能是通过阻断乙酰胆碱与 M 受体的结合，降低细胞中钙离子浓度，从而降低小肠平滑肌的兴奋度。表 3枫蓼提取物抗乙酰胆碱作用提取物作用部位最低有效浓度/g/mL醇提物乙酰胆碱引起的小肠平滑肌痉挛0.125水提物0.52.3抗肿瘤活性王永丽19 从牛耳枫中提取 16种生物碱进行体外抗肿瘤活性筛选，结果显示，2 hydroxyyunnandaphnine D 在体外具有较强的抗肿瘤活性，其对人宫颈癌细胞(HeLa)、人肺腺癌细胞(A 549)、人乳腺癌细胞(MCF 7)、人肝癌细胞(HePG 2)和人神经胶质瘤(U 251)等5 种肿瘤细胞株均有一定的抑制作用，其中对HePG 2 细胞的抑制增殖作用最强，且具有量效和时效关系。曹志然等20 从牛耳枫的茎叶乙醇浸提物中采用正相硅胶，反相材料(C18，MCI)以及凝胶(Sephadex LH 20，Toyopearl HW 40C)分离得到牛耳枫生物碱 F21，并进行了该成分对HePG 2 细胞的抑制作用及机制研究，结果表明，牛耳枫生物碱 F21 在体外对 HepG 2 细胞具有显著的抑制作用，其作用机制并非通过激活胱天蛋白酶途径而诱导肿瘤细胞的凋亡。王蓓等21 进行了牛耳枫生物碱 2 hydroxyyunnandaphnine D 体外抗肿瘤活性及作用机制研究，结果显示，该生物碱在体外对 HepG 2 细胞、MCFh7 细胞及 HeLa