加味逍遥散主要活性成分在肝癌治疗中的作用机制研究进展_徐丽静.pdf

综 述基金项目:国家自然科学基金(81860805);广西中医药大学第一批“歧黄工程”高层次人才团队培育项目(2018001);广西研究生教育创新计划项目(YCSW2022363)作者简介:徐丽静(1994 )，女，在读硕士研究生，研究方向:中医药防治肝癌。通信作者:夏猛(1979 )，男，博士，教授，研究方向:中医药防治肝癌。加味逍遥散主要活性成分在肝癌治疗中的作用机制研究进展徐丽静李卓娴温小雨孙玉浩夏猛(广西中医药大学基础医学院，广西南宁市530200)【提要】肝癌为临床上较为常见的实体恶性肿瘤，其发病率高、预后差，严重影响人们的身体健康和生活质量。加味逍遥散作为经典中药方剂，方中药材诸多活性成分具有抗肿瘤作用，近年来更是广泛应用于肝癌的临床治疗，其疗效显著。由于加味逍遥散活性成分复杂，其治疗肝癌的作用机制尚不明确。本文以加味逍遥散的抗肿瘤活性成分为切入点，对有关其在肝癌治疗中的作用机制的研究进展做一综述，以期充实加味逍遥散治疗肝癌的理论基础，并为肝癌新药研发提供参考。【关键词】肝癌;加味逍遥散;活性成分;疗效;作用机制;综述【中图分类号】285【文献标识码】A【文章编号】0253-4304(2022)23-2806-06DOI:10 11675/j issn 0253-4304 2022 23 192020 年国际癌症研究中心报告，肝癌为全球排名第六的常见癌症，是第三大癌症死亡原因1。中国每年约有 38 3 万人死于肝癌及其并发症，占全球肝癌死亡病例数的 51%2，肝癌发病率高、预后差，严重威胁我国人民的身体健康和生活质量，加重了社会负担和医疗的压力。因此，探求有效的肝癌治疗方法是癌症研究的热点问题，其中药物治疗是肝癌的主要治疗手段之一。中医药是中华民族的瑰宝，在亚健康状态调理、慢性疾病和恶性疾病的治疗中具有明显优势。从中医药复方中寻找有效的抗癌活性成分是当前肝癌药物研究的重要方向之一。肝癌可归属为中医“积聚”“黄疸”“鼓胀”“胁痛”等病，其病机主要为人体正虚致脏腑功能失调，进而出现气滞血瘀、络脉闭阻、痰邪阻络等3，临床上辨证多为肝郁脾虚和气滞血瘀4。加味逍遥散由逍遥散化裁而成，采用疏肝健脾法为主，配行气活血、清热解毒、软坚散结中药。该方剂及其活性成分具有较明确的抗肿瘤作用5 6。近年来，加味逍遥散应用于肝癌的临床治疗，疗效显著，但其主要活性成分对肝癌的作用机制尚未明确。本文以加味逍遥散的抗肿瘤活性成分为切入点，对有关其在肝癌治疗中的作用机制的研究进展做一综述，以期充实加味逍遥散治疗肝癌的理论依据，并为肝癌新药研发提供参考。1加味逍遥散抗肿瘤的有效活性成分加味逍遥散包括柴胡、白术、白药、陈皮、茯苓、当归、栀子、香附、郁金、枳壳、川芎、半边莲和甘草 13 味草药，以及蜈蚣、全蝎、白僵蚕、鳖甲 4 味动物类药物。一项网络药理学研究表明，在涉及治疗肝癌的 281 味中药中，茯苓、柴胡、白芍、甘草的使用频率排名前四位7;另一项对 313 味抗肝癌中药的研究表明，茯苓、白术、当归、柴胡、赤芍、甘草、鳖甲是临床最常用的抗肝癌药物8。这说明加味逍遥散的主要配伍药物是临床治疗肝癌的主要中药。研究显示，加味逍遥散的抗肿瘤效应主要是通过皂苷类化合物、黄酮类化合物、多糖类化合物、萜类化合物、内酯类化合物、多肽、植物甾醇类化合物、挥发油类化合物及寡肽类化合物等成分发挥作用9。1 1皂苷类化合物111柴胡皂苷:提取自柴胡，可细分为柴胡皂苷 A、B、C、D、E、F 等多种类型 10，其中柴胡皂苷 D 的药理活性最强。研究表明，柴胡皂苷 D 可通过抑制哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mammalian target of rapamycin，MTO)复合物信号通路，促进癌细胞自噬功能9。1 1 2甘草总皂苷:提取自甘草，其可抑制一氧化氮、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor，TNF)-、白细胞介素(interleukin，IL)-6 等炎症细胞的分泌11。1 1 3甘草次酸:提取自甘草，其能够上调与凋亡相6082Guangxi Medical Journal，Dec 2022，Vol 44，No 23关的 Caspase 家族部分蛋白(Caspase-3、Caspase-8、Caspase-9 等)和 B 细胞淋巴瘤-2 相关 X 蛋白(B-celllymphoma-2 associated X protein，Bax)的表达，诱导肝癌细胞凋亡12，亦可通过抑制 T 淋巴细胞的凋亡和促进 T 细胞的免疫功能来增强细胞免疫，从而调节肿瘤微环境，抑制肝癌细胞的增殖13。1 2黄酮类化合物1 2 1山柰酚:提取自柴胡，其通过抑制基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase，MMP)9 和蛋白激酶 B(protein kinase B，AKT)信号传导来抑制人肝癌细胞的迁移14。122槲皮素:(1)提取自柴胡，其可通过调控磷脂酰肌醇 3-激酶(phosphatidylinositol 3-kinase，PI3K)/AKT 信号通路的转导，促进 Caspase-9 表达，从而抑制肝癌SMMC-7721 细胞生长，同时可促进癌细胞凋亡15。(2)提取自僵蚕，其能够上调 Bax 蛋白表达，并抑制Bcl-2 蛋白表达，从而促进肝癌细胞凋亡16。1 2 3光甘草定:提取自甘草，其可调节激活蛋白 1和核因子 B(nuclear factor kappa B，NF-B)活性，通过转录抑制 MMP9 表达，抑制人肝癌细胞 Huh7、SK-Hep-1的迁移和侵袭能力17。1 2 4甘草黄酮:提取自甘草，其可影响 BEL-7404细胞的细胞周期，明显减少处于 S 期的细胞比例，并显著抑制其生长增殖，且该抑制效果存在剂量和时间依赖性18。1 2 5甘草素:提取自甘草，其可通过多种机制促进肝癌 SMMC-7721 细胞凋亡，包括增强 Caspase-3 活性，上调 p53 蛋白水平，下调 Bcl-2 蛋白水平，以及影响活性氧簇的生成等19。1 2 6川陈皮素:提取自枳壳，其既可抑制小鼠肝癌细胞 H22 移植瘤的生长，又能抑制肝癌 SMMC-7721细胞增殖，但相关机制尚不明确20。1 3多糖类化合物1 3 1白术多糖:提取自白术，其能够影响 AKT 和糖原合成酶激酶 3 蛋白的磷酸化，使肝癌细胞中-连环蛋白表达下调，进而降低与肝癌转移高度相关的 MMP2 的表达水平21，也可以通过激活 NF-B 依赖机制来调节巨噬细胞活性22。132茯苓多糖:提取自茯苓，其可通过激活 NLP3焦亡经典通路(GSDMD/Caspase-1)发挥对 HepG2 肝癌细胞的抑制作用23。1 3 3全蝎多糖:提取自全蝎，其在细胞实验中表现出较显著的抗 TNF 相关炎症反应作用，且该药物在浓度为 1 5 mg/mL 时抗炎效果最好24。1 3 4金头蜈蚣多糖:提取自蜈蚣，其可抑制肝癌HepG2 细胞的生长和增殖，也可通过促进 IL-2 和抑制 IL-10 和转化生长因子表达来调节肝癌细胞 H22荷瘤小鼠的免疫功能，从而抑制小鼠的肝肿瘤生长25。1 4萜类化合物1 4 1芍药苷:提取自白芍，其抗炎机制可能与血清和大脑皮质-内啡肽水平升高、大脑皮质前列腺素E2 产生或释放减少有关26。此外，芍药苷可通过阻止 NF-B 抑制蛋白(NF-B inhibitor alpha，IKB-)磷酸化以减少 NF-B 核转位，从而促进 5-氟尿嘧啶诱导的肿瘤细胞凋亡27。1 4 2白芍总苷:提取自白芍，其可通过抑制人组蛋白去乙酰化酶 3 的表达，引起多药耐药基因 1 表达下调，从而逆转肝癌 BEL-7402/ADM 细胞的耐药性28。14 3茯苓三萜:提取自茯苓，其不仅对肝癌 HepG2细胞的增殖抑制率高，促凋亡作用强29，而且能下调诱导型一氧化氮合酶和环氧合酶(cyclooxygenase，COX)-2 的表达，发挥抗炎作用30。1 4 4郁金二萜:提取自郁金，其能拮抗脂多糖的致炎作用，通过增加抑制因子的表达而抑制 NF-B 的活化，从而减少炎症介质的分泌，起到抗炎作用31。1 5内酯类化合物白术内脂提取自白术，其可抑制肝癌 SMMC-7721 细胞和 HepG2 细胞的活性32，白术内酯、可显著抑制巨噬细胞中 TNF-、IL-1、IL-6 的表达，发挥抗炎作用33。16多肽蝎毒多肽提取自全蝎。在肝癌细胞 H22荷瘤小鼠化疗过程中，蝎毒多肽提取物通过抑制肿瘤血管生成和阻碍肿瘤血管恢复正常来减弱 H22 细胞的再增殖作用34。此外，蝎毒多肽提取物联合雷帕霉素能通过抑制 MTO 的活性，增强自噬相关蛋白的表达(如 Unc-51 样自噬激活激酶 1、微管相关蛋白 1轻链 3、Beclin1)以促进细胞自噬，从而抑制肝癌的进展，降低癌细胞转移的发生风险35。1 7植物甾醇类1 7 1谷甾醇:提取自当归，其能够介导细胞分裂周期 25B 蛋白表达来促进肝癌细胞系 HepG2 和 Hep3B的凋亡36，并可调节 IL-6、-干扰素和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)水平，发挥对肝癌细胞 H22 荷瘤小鼠的抗癌作用37。1 7 2麦角甾醇:提取自僵蚕38，其可通过上调 p21蛋白抑制 HepG2 细胞的增殖39。在动物实验中，麦角甾醇表现出较明显的肿瘤抑制效果，其可能是通过抑制血管生成发挥抑癌作用40。7082广西医学2022 年 12 月第 44 卷第 23 期1 8挥发油类化合物1 8 1白术挥发油:提取自白术，其可提高巨噬细胞的抗炎作用，增强机体的非特异性免疫功能41。研究表明，白术挥发油能显著降低肝癌淋巴管转移模型小鼠的血清 MMP9 含量，通过抑制 MMP9 的分泌来发挥抑制肿瘤侵袭和转移的作用42。1 8 2柠檬烯:提取自枳壳，其可抑制肝癌细胞BEL-7402 的生长，这种抑制效果可能与其降低肝脏中的谷胱甘肽巯基转移酶活性有关43 44。19寡肽类化合物鳖甲寡肽提取自鳖甲。有研究报告，鳖甲寡肽 I-C-F-6 可减少肝纤维化大鼠及 HSC-T6 细胞中 NF-B p65 的表达，从而抑制 Wnt/-catenin 信号通路的激活，影响下游靶基因的表达，进一步抑制肝星状细胞的活化，缓解肝纤维化大鼠肝损伤，减少细胞外基质的沉积，达到抗纤维化的目的45。1 10其他提取物1 10 1姜黄素:提取自郁金46，其可经 Fas/Fas 配体及 NF-B 通路诱导肿瘤细胞凋亡，抑制癌细胞增殖47，亦可通过介导内质网应激通路，下调 Bcl-2 蛋白和上调活化型 Caspase-3 蛋白，进而抑制人肝癌SMMC-7721 细胞移植瘤的生长48。1 10 2蜈蚣提取物:提取自蜈蚣，其通过调控信号转导子和转录激活因子 3、丝裂原活化蛋白激酶及PI3K/AKT 信号通路，抑制人肝癌 HepG2 细胞的增殖，减缓肝癌细胞原位移植瘤的生长49。2加味逍遥散有效活性成分对肝癌的作用机制2 1抑制肿瘤细胞增殖细胞增殖是生物体生长、发育、繁殖及遗传的基础，干预肿瘤可通过抑制细胞生长这一途径实现。加味逍遥散方中的光甘草定、茯苓三萜、蜈蚣提取物、白芍总苷、多糖等成分对肝癌细胞增殖具有显著抑制作用。研究显示，光甘草定可通过调节 Hedgehog 信号通路阻止肝癌 Hep3B 细胞增殖50，茯苓三萜和蜈蚣提取物能在一定程度上抑制肝癌 HepG2 细胞增殖29，51。此外，白芍总苷可抑制癌细胞增殖，且浓度越高其抑制癌细胞增殖的作用越强52。而白术多糖可抑制肝癌细胞 H22 荷瘤小鼠体内肿瘤生长，且中等剂量的作用显著高于高剂量和低剂量53 2 2调节炎症因子最新研究表明，炎症介质可通过下调 DNA 修复通路和调节细胞周期检查点，诱导和破坏癌细胞基因组的稳定性，从而调节肿瘤细胞的侵袭、免疫逃逸及增殖54。现有实验数据显示，茯苓中的三萜类化合物可通过下调诱导型一氧化氮合酶、COX-2 的表达，抑制 IL-1、IL-6、TNF-等炎症介质的产生，从而发挥抗炎作用55。