基于种植环境对次生代谢产物...响下的广陈皮与陈皮对比研究_石洪超.pdf

药品检验中国医药导报 2 0 2 3 年 1 月第 2 0 卷第 3 期CHINA MEDICAL HERALD Vol.20 No.3 January 2023中药材次生代谢物的含量和各成分间的比例，会因栽培环境条件的变化而变化 1-2，黄璐琦等 3-4 提出道地药材形成的逆境效应理论，也有其他学者 5-6 认为合成和积累次生代谢产物是药用植物适应环境胁迫的策略，常见的环境胁迫包括温度 7、光照 8、水分 9、土壤因子等 1 0。不同产地的陈皮价格存在巨大差异，史料记载1 1-1 2 橘皮以广中来者胜，称为广陈皮，其中以广东新会种植茶枝柑所产的广陈皮质量最优，业内称为“新会陈皮”。随着 2 0 2 0 版 中华人民共和国药典 1 3 对“广陈皮”项的修订，广陈皮产业得到了极大的发展。2 0 2 1 年新会陈皮全行业产值已达 1 4 5 亿 1 4，广东省江门市地基金项目 国家药品监督管理局药品快速检验技术重点实验室开放性课题（K F 2 0 2 1 0 0 5）；广东省中药材产业化基地建设项目陈李济新会陈皮产业化种植基地（粤工信消费函2 0 2 1 7 2 号）。作者简介 石洪超（1 9 6 6-），男，高级工程师；研究方向：中药及药物制剂。通讯作者 陈明权（1 9 8 8-），男，硕士，副主任中药师；研究方向：中药物质基础。基于种植环境对次生代谢产物影响下的广陈皮与陈皮对比研究石洪超1商雪莹1陈明权1罗卓雅2覃仁安1何风雷1孙东11.广州白云山陈李济药厂有限公司，广东广州 5 1 0 2 8 8；2.广东省药品检验所，广东广州 5 1 0 6 6 3摘要目的比较基于种植环境对次生代谢产物影响下的广陈皮与陈皮。方法采用液质联用技术分析并指认不同品种之间陈皮样品中的差异成分，通过比较广陈皮与陈皮在 2 8 3 n m下差异黄酮类成分之间的峰面积比值，分析不同产地陈皮中差异成分峰面积比值规律。结果不同产地陈皮样品共有 6 个差异成分，分别为橙皮苷、甜橙黄酮、6-去甲氧基橘皮素、川陈皮素、橘皮素、5-去甲基川陈皮素。甜橙黄酮/6-去甲氧基橘皮素0.6 0 或橘皮素/5-去甲基川陈皮素7.0 0 为广陈皮，甜橙黄酮/6-去甲氧基橘皮素0.6 0 或橘皮素/5-去甲基川陈皮素7.0 0为陈皮。结论本研究采用 2 8 3 n m波长下峰面积比值甜橙黄酮/6-去甲氧基橘皮素0.6 0 或橘皮素/5-去甲基川陈皮素7.0 0 作为广陈皮的判断依据，该方法可以提高陈皮产地区分指标的便捷性和普适性。关键词陈皮；广陈皮；次生代谢产物；黄酮类成分；峰面积比值中图分类号 R92文献标识码 A文章编号 1673-7210（2023）01（c）-0104-06D O I：1 0.2 0 0 4 7/j.i s s n 1 6 7 3-7 2 1 0.2 0 2 3.0 3.2 4Comparative study of Guangchenpi and Chenpi under the influence ofplanting environment on secondary metabolitesSHI Hongchao1SHANG Xueying1CHEN Mingquan1LUO Zhuoya2QIN Ren an1HE Fenglei1SUN Dong11.G u a n g z h o uB a i y u n s h a nP h a r m a c e u t i c a l C o.C h e n l i j i,G u a n g d o n gP r o v i n c e,G u a n g z h o u 5 1 0 2 8 8,C h i n a;2.G u a n g d o n gI n s t i t u t e F o r D r u g C o n t r o l,G u a n g d o n g P r o v i n c e,G u a n g z h o u 5 1 0 6 6 3,C h i n aAbstract Objective T o c o m p a r e t h e e f f e c t s o f p l a n t i n g e n v i r o n m e n t o n s e c o n d a r y m e t a b o l i t e s b e t w e e nG u a n g c h e n p i a n dC h e n p i.Methods L i q u i d c h r o m a t o g r a p h y-m a s s s p e c t r o m e t r yw a s u s e d t o a n a l y z e a n di d e n t i f y t h e d i f f e r e n t i a l c o m p o n e n t si n C h e n p i s a m p l e s f r o md i f f e r e n t v a r i e t i e s.T h e p e a k a r e a r a t i o o f t h e d i f f e r e n t i a l f l a v o n o i d c o m p o n e n t s b e t w e e n G u a n g c h e n p ia n dC h e n p i a t 2 8 3n m,t h e p e a ka r e a r a t i o o f t h e d i f f e r e n t i a l c o m p o n e n t s i nC h e n p i f r o md i f f e r e n t r e g i o n s w a s a n a l y z e d.Results T h e r ew e r es i xd i f f e r e n t i a l c o m p o n e n t s C h e n p i s a m p l e s f r o md i f f e r e n t r e g i o n s,i n c l u d i n gh e s p e r i d i n,s i n e n s e t i n,6-d e m e t h o x y h e s p e r e t i n,n o b i l e t i n,h e s p e r e t i n,a n d5-d e m e t h y l n o b i l e t i n.T h er a t i os i n e n s e t i n/6-d e m e t h o x y-h e s p e r i d i n0.6 0o r h e s p e r i d i n/5-d e m e t h o x y h e s p e r i d i n 7.0 0w a s G u a n g c h e n p i,a n dt h er a t i os i n e n s e t i n/6-d e m e-t h o x y h e s p e r i d i n0.6 0o rh e s p e r i d i n/5-d e m e t h o x y h e s p e r i d i n 7.0 0w a sC h e n p i.Conclusion I nt h i ss t u d y,t h ep e a ka r e ar a t i oo fs i n e n s e t i n/6-d e m e t h o x y h e s p e r i d i n 0.6 0 o r h e s p e r i d i n/5-d e m e t h y l n o b i l e t i n 7.0 0 a t 2 8 3 n mw a v e l e n g t h i s u s e d a s t h e b a s i sf o r t h ed e t e r m i n a t i o no f G u a n g c h e n p i,w h i c hc a ni m p r o v et h ec o n v e n i e n c ea n du n i v e r s a l i t yo f t h ec l a s s i f i c a t i o ni n d e xo fC h e n p i o r i g i n.Key words C h e n p i;G u a n g c h e n p i;S e c o n d a r y m e t a b o l i t e s;F l a v o n o i d s c o n s t i t u e n t;P e a k a r e a r a t i o104中国医药导报 2 0 2 3 年 1 月第 2 0 卷第 3 期药品检验CHINA MEDICAL HERALD Vol.20 No.3 January 2023方标准 D B 4 4 0 7/T 7 0-2 0 2 1 地理标志产品新会陈皮 1 5 中规定，在新会地理标志产品保护范围内栽培并储存陈化 3 年以上的称为“新会陈皮”。鉴于新会地区独特的水土环境 1 6，“广陈皮”与其他产地的“陈皮”中次生代谢产物有所差别。目前研究已证实，新会陈皮中橙皮苷含量低于其他陈皮，但川陈皮素和橘皮素较高，且多氧基黄酮的含量较多 1 7-1 8。因此，本研究从次生代谢产物的角度出发，探索通过比较黄酮类成分间的比值区分不同产地陈皮的可行性。1材料与方法1.1材料1.1.1仪器T h e r m o Q Ep l u s 液相色谱串联高分辨质谱仪（赛默飞世尔科技有限公司）；Wa t e r s H-C l a s s U P L C-P D AD e t e c t o r 超高效液相色谱（美国沃特世公司）；Wa t e r sX S e l e c t C S HC1 8色谱柱（2.5 m，3.0 m m1 0 0 m m，美国沃特世公司）；Wa t e r s X S e l e c t H S S T 3 色谱柱（2.5 m，3.0 m m 1 5 0 m m，美国沃特世公司）；Wa t e r s C O R T E C SC1 8色谱柱（2.7m，3.0m m 1 5 0m m，美国沃特世公司）；X P R2 6/A百万分之一电子天平（瑞士梅特勒-托利多公司）；S a r t o r i u s B S 4 2 0 S 万分之一电子天平；M i l l i-QR e f e r e n c e 纯水机（法国 M i l l i p o r e）；S B-5 2 0 0D T 超声波清洗仪（宁波新芝生物科技股份有限公司）；WX J型粉碎机（上海凯旋中药机械制造有限公司）。1.1.2试剂与试药维采宁-2（纯度：9 9.5 7%，批号：1 9 1 2 1 2 0 1，成都格利普生物科技有限公司）；橙皮苷（纯度：9 6.1%，批号：1 1 0 7 2 1-2 0 1 6 1 7，中国食品药品检定研究院）；川陈皮素（纯度：9 8.0%，批号：A F 7 1 2 2 1 0 5，成都莱宝科技有限公司）；橘皮素（纯度：9 8.0%，批号：A F 8 0 1 2 6 0 3，成都莱宝科技有限公司）；甜橙黄酮（纯度9 8.0%，批号：P S 0 1 1 2 7 2，成都普思生物科技股份有限公司）；6-去甲氧基橘皮素（纯度9 8.0%，批号：P S 0 1 1 2 7 4，成都普思生物科技股份有限公司）；5-去甲基川陈皮素（纯度9 8.0%，批号：P S 0 2 0 3 6 0，成都普思生物科技股份有限公司）；色谱级甲醇（德国 M e r c k）、超纯水、甲醇（广州化学试剂厂）、