现代生物医学进展biomed.cnjournals.comProgressinModernBiomedicineVol.23NO.2JAN.2023doi:10.13241/j.cnki.pmb.2023.02.008基于肝癌细胞线粒体功能受损和caspase-3信号通路探讨罗哌卡因促进肝癌细胞凋亡的作用机制研究*王侃1程志1吕刚飞2刘志飞3张蕾1刘星汝1（1枣庄矿业集团中心医院检验科山东枣庄277800；2枣庄矿业集团中心医院肝病科山东枣庄277800；3山东省立医院病理科山东济南250021）摘要目的：基于肝癌细胞线粒体功能受损和天冬氨酸蛋白水解酶3（caspase-3）信号通路探讨罗哌卡因促进肝癌细胞凋亡的作用机制。方法：选用细胞株人肝癌细胞BEL-7402进行实验研究。用不同浓度罗哌卡因处理BEL-7402细胞后，采用溴化噻唑蓝四氮唑（MTT）法检测肝癌细胞的增殖情况，光镜及4，6-二苯胺-2-苯吲哚二盐酸盐（DAPI）溶液染色观察细胞形态，台盼蓝染色法测定细胞活力，流式细胞术分析BEL-7402细胞的凋亡情况，电子显微镜下观察细胞线粒体，激光共聚焦显微镜观察caspase-3在BEL-7402细胞中的细胞核迁移情况，蛋白免疫印迹试验评价罗哌卡因对细胞质凋亡相关蛋白、线粒体凋亡相关蛋白、BEL-7402细胞和线粒体凋亡相关蛋白表达的影响。结果：罗哌卡因能够抑制肝癌细胞的生长，并呈剂量依赖性和时间依赖性。罗哌卡因可诱导BEL-7402细胞发生凋亡，显著增加BEL-7402细胞的凋亡率。罗哌卡因能够损伤肝癌细胞线粒体功能。激光共聚焦显微镜观察显示caspase-3分子迁移到细胞核。罗哌卡因与caspase-3相互作用，促进caspase-3向细胞核内迁移，刺激caspase-3和聚腺苷二磷酸核糖聚合酶（PARP-1）、天冬氨酸蛋白水解酶9（caspase-9）蛋白的表达，抑制B细胞淋巴瘤-2基因（Bcl-2）的表达，促进凋亡酶激活因子（Apaf-1）的表达，促进线粒体释放细胞色素C（CytochromeC），激活caspase-3活性。结论：罗哌卡因具有促进肝癌细胞凋亡的作用，其作用机制可能与破坏肝癌细胞线粒体功能和激活caspase-3信号通路有关。关键词：罗哌卡因；肝癌细胞；线粒体；caspase-3；凋亡中图分类号：R-33；R735.7文献标识码：A文章编号：1673-6273（2023）02-244-07ToInvestigatetheMechanismofRopivacainePromotingApoptosisofHepatocellularCarcinomaCellsBasedonMitochondrialFunctionImpairmentandCaspase-3SignalingPathway*WANGKan1,CHENGZhi1,LÜGang-fei2,LIUZhi-fei3,ZHANGLei1,LIUXing-ru1(1DepartmentofClinicalLaboratory,CentralHospitalofZaozhuangMiningGroup,Zaozhuang,Shandong...
