基于TLR3_TRIF通路...性肺炎患儿的疗效与作用机制_常秀.pdf

基于 通路分析重组人干扰素 联合炎琥宁对病毒性肺炎患儿的疗效与作用机制常 秀，赵 静，侯召权，程 娜基金项目：衡水市科技计划项目（）作者单位：河北 衡水，衡水市第四人民医院小儿内科作者简介：常秀，本科，副主任医师。主要从事小儿内科方向研究 摘要 目的 基于 样受体（）干扰素 结构域衔接蛋白（）通路分析重组人干扰素 联合炎琥宁对病毒性肺炎（）患儿的疗效与作用机制。方法 选取 年 月收治的 患儿 例，根据治疗方法不同分为观察组和对照组，每组 例。对照组给予重组人干扰素 治疗，观察组在对照组基础上加用炎琥宁治疗。治疗 后，比较 组临床疗效、临床症状改善时间、住院时间及不良反应发生情况，比较 组治疗前后外周血单个核细胞（）中 通路相关因子、核因子（）表达量、血清免疫球蛋白（、）水平及呼吸功能呼吸频率（）、潮气量（）、呼气达峰时间（）呼气时间（）。结果 观察组临床总有效率高于对照组，退热时间、咳嗽消失时间、呼吸困难消失时间、肺啰音消失时间及住院时间均短于对照组（.）。治疗 后，观察组 中、表达量以及 低于对照组，血清、水平以及、高于对照组（.）。组不良反应总发生率比较差异无统计学意义（.）。结论 重组人干扰素 联合炎琥宁治疗 患儿的效果显著，可改善临床症状、呼吸功能，提高免疫球蛋白含量，其作用机制与抑制 通路活化有关。关键词 病毒性肺炎；儿童；炎琥宁；重组人干扰素；样受体；干扰素 结构域衔接蛋白中国图书资料分类号 文献标志码 文章编号（），（，）（）（）（），（）（），（，），（），（），（）（），（.），（.）（.），；临床误诊误治 23 年 2 月 第 36 卷 第 2 期 ,36,2 Februgary 23；病毒性肺炎（，）是由合胞病毒、流感病毒等感染引起的一种肺部间质性炎症，我国肺部感染疾病中 发病率占，其临床症状主要为咳嗽、发热等，若未及时治疗易引起病情持续性进展，甚至出现咯血等症状。目前临床常采用干扰素、利巴韦林等抗病毒药物治疗，但长期使用具有一定不良反应。重组人干扰素 是一种广谱抗病毒药物，可与细胞表面膜受体结合，抑制 相关病毒复制，并调节机体免疫功能，增强巨噬细胞活性。炎琥宁是一种穿心莲内脂提取物，具有抗感染、抗病毒等作用，可抑制毛细血管通透性及病毒复制，增加肾上腺皮质激素释放量，增强巨噬细胞、中性粒细胞吞噬能力，进而抑炎杀菌、减少炎性渗出，减轻机体炎症反应。有研究表明，炎琥宁对、肺炎支原体肺炎等具有良好治疗效果，可调节患者机体细胞免疫平衡状态，促进 淋巴细胞、淋巴细胞增殖，并灭活呼吸道病毒，减缓气道黏膜炎性损伤。但重组人干扰素 联合炎琥宁治疗 患儿的具体机制尚未明确。体内动物实验研究显示，样受体（）干扰素 结构域衔接蛋白（）通路与 发生发展密切相关，抑制 通路可减轻肺组织损伤。活化可促进 表达，加快病毒扩散，并促进型干扰素、炎性细胞因子生成，加重肺组织炎性损伤。目前 通路与 患儿之间的关系尚未明确。因此，本研究基于 通路，探讨重组人干扰素 联合炎琥宁治疗 患儿的可能作用机制，为 治疗药物研究提供依据。资料与方法.一般资料选取 年 月我院收治的 患儿 例，根据治疗方法不同分为对照组和观察组，每组 例。对照组男 例，女 例；年龄 （）岁；病程 （）；体温 （）；体质量 （）；病原分布：病毒 例，柯萨奇病毒 例，单纯疱疹病毒 例，腺病毒 例，混合病毒 例。观察组男 例，女 例；年龄 （）岁；病程 （）；体温 （）；体质量 （）；病原分布：病毒 例，柯萨奇病毒 例，单纯疱疹病毒 例，腺病毒 例，混合病毒 例。组上述一般资料比较差异无统计学意义（.），具有可比性。本研究经医院医学伦理委员会批准，所有患儿及其家属知情且签署知情同意书。.纳入与排除标准 纳入标准：符合 诊断标准；均有发热、咳嗽、咳痰、呼吸急促甚至呼吸困难等典型肺炎症状；听诊双肺均可闻及湿啰音；肺部 线检查示片状、斑片状浸润性阴影；入院前未接受其他方案治疗；未服用本研究药物或含有本研究药物成分的其他药物；临床病例资料完整。排除标准：合并心、肝、脾、肺等脏器功能不全者；对本研究药物或其成分过敏者；合并其他急性或慢性感染性疾病者；重症肺炎患儿。.方法.治疗方法：组均给予常规治疗，包括化痰止咳、镇静利尿、解痉平喘等相关药物治疗。对照组在此基础上给予重组人干扰素（长春生物制品研究所有限责任公司，国药准字，规格：万单位）治疗，每次 万单位，加 氯化钠注射液至 ，雾化吸入，连续治疗 。观察组在对照组基础上给予炎琥宁（西安利君制药有限责任公司，国药准字，规格：）治疗，（）加入 葡萄糖注射液 静脉滴注，连续治疗 。.采集血液样本：于治疗前后分别采集清晨空腹肘部静脉血 ，其中 以 离心（离心半径 ），分离血清，置于 冰箱待测；另外 血液样本加入等体积淋巴细胞分离液（上海西格生物科技有限公司），采用密度梯度离心法分离外周血单个核细胞（）。.中、核 因 子（）表达量：采用实时荧光定量（）检测，中加入 试剂（美国 公司）充分裂解，室温静置 后加入氯仿 ，离心 后吸取上层无色水相层，加入等体积异丙醇，相同条件下再次离心 ，弃上清，沉于离心管底部。使用反转录试剂盒天根生化科技（北京）有限公司将 反转录合成。、引物由生工生物工程（上海）股份有限公司合成，见表。反应体系：，正反向引物各 ，补足反应体系至 ；反应条件：预变性 ，变性 ，退火 ，延临床误诊误治 23 年 2 月 第 36 卷 第 2 期 ,36,2 Februgary 23伸 （共循环 次）。应用 荧光定量 仪进行扩增，以 为参照，采用 法计算相对表达量。.血清免疫球蛋白、水平：采用免疫散射比浊法检测血清、水平，检测试剂盒由上海一研生物科技有限公司提供。.观察指标 比较 组临床疗效，痊愈为患儿高热、咳嗽、喘息、肺部啰音等症状消失，胸部 线片恢复正常；有效为患儿咳嗽、喘息、肺部啰音等症状明显改善，体温恢复正常，胸部 线片恢复正常；无效为患儿体温、咳嗽、喘息、肺部啰音等症状无改变，胸部 线片无改变。总有效率 （痊愈 有效）总例数。比较 组临床症状改善时间及住院时间，临床症状改善时间包括退热时间、咳嗽消失时间、呼吸困难消失时间、肺啰音消失时间。比 较 组 治 疗 前 后 中、表达量。比较 组治疗前后血清、水平。比较 组治疗前后呼吸功能，使用 肺功能仪（上海聚慕医疗器械有限公司）检测呼吸频率（）、潮气量（）、呼气达峰时间（）呼气时间（）。比较 组不良反应发生情况，包括声嘶、恶心呕吐、腹泻、皮疹。.统计学方法应用 统计学软件处理数据。计量资料以均数 标准差（）表示，比较行 检验；计数资料以率（）表示，比较行 检验。为检验水准。结果.临床疗效比较观察组临床总有效率高于对照组（.）。见表。.临床症状改善时间及住院时间比较观察组退热时间、咳嗽消失时间、呼吸困难消失时间、肺啰音消失时间及住院时间均短于对照组（.）。见表。.治疗前后 中、表达量比较治疗前，组 中、表达量比较差异无统计学意义（.）。治疗 后，组 中、表达量较治疗前下降，且观察组低于对照组（.）。见表。.治疗前后血清免疫球蛋白水平比较 治疗前，组血清、水平比较差异无统计学意义（.）。治疗 后，组血清、水平较治疗前升高，且观察组高于对照组（.）。见表。.治疗前后呼吸功能比较治疗前，组、比较差异无统计学意义（.）。治疗 后，组 较治疗前下降，、较治疗前升高；且观察组 低于对照组，、高于对照组（.）。见表。.不良反应发生情况比较 组不良反应总发生率比较差异无统计学意义（.）。见表。表 、引物序列基因正向引物反向引物 注：为 样受体，为 干扰素 结构域衔接蛋白，为核因子表 组病毒性肺炎患儿临床疗效比较例（）组别例数痊愈有效无效总有效观察组（）（）（）（）对照组（）（）（）（）注：观察组给予重组人干扰素 联合炎琥宁治疗，对照组给予重组人干扰素 治疗；与对照组比较，.表 组病毒性肺炎患儿临床症状改善时间及住院时间比较（，）组别例数退热时间咳嗽消失时间呼吸困难消失时间肺啰音消失时间住院时间观察组 对照组 注：观察组给予重组人干扰素 联合炎琥宁治疗，对照组给予重组人干扰素 治疗；与对照组比较，.临床误诊误治 23 年 2 月 第 36 卷 第 2 期 ,36,2 Februgary 23表 组病毒性肺炎患儿治疗前后 中、表达量比较（）组别例数治疗前治疗 后治疗前治疗 后治疗前治疗 后观察组 对照组 注：观察组给予重组人干扰素 联合炎琥宁治疗，对照组给予重组人干扰素 治疗；为外周血单个核细胞，为 样受体，为 干扰素 结构域衔接蛋白，为核因子；与治疗前比较，.；与对照组比较，.表 组病毒性肺炎患儿治疗前后血清免疫球蛋白水平比较（，）组别例数治疗前治疗 后治疗前治疗 后治疗前治疗 后观察组 对照组 注：观察组给予重组人干扰素 联合炎琥宁治疗，对照组给予重组人干扰素 治疗；与治疗前比较，.；与对照组比较，.表 组病毒性肺炎患儿治疗前后呼吸功能比较（）组别例数（）治疗前治疗 后（）治疗前治疗 后（）治疗前治疗 后观察组 对照组 注：观察组给予重组人干扰素 联合炎琥宁治疗，对照组给予重组人干扰素 治疗；为呼吸频率，为潮气量，为呼气达峰时间，为呼气时间；与治疗前比较，.；与对照组比较，.表 组病毒性肺炎患儿不良反应发生情况比较例（）组别例数声嘶恶心呕吐腹泻皮疹总发生观察组（）（）（）（）（）对照组（）（）（）（）注：观察组给予重组人干扰素 联合炎琥宁治疗，对照组给予重组人干扰素 治疗 讨论 病毒侵袭下呼吸道可引起呼吸道上皮、黏膜损伤，促使气管、支气管黏膜水肿，降低呼吸道防御功能，同时随着炎性渗出、炎性细胞浸润导致呼吸道管腔阻塞，炎性介质进入肺间质，进而促进 发生发展。重组人干扰素 具有疗效确切、靶向性强等特点，可抑制多种病毒合成，研究表明干扰素 可提高病变部位抗病毒感染能力，增强机体免疫功能，并通过干预 淋巴细胞等因子表达，降低机体炎性细胞浸润。炎琥宁还可抑制宿主细胞中病毒复制，抑制流感病毒神经氨酸酶，提高机体免疫球蛋白水平，并能抑制单核细胞、中性粒细胞所致呼吸道炎症反应。炎琥宁还可抑制白细胞介素（）、肿瘤坏死因子（）等炎性细胞因子生成，调节 淋巴细胞亚群水平，提升细胞免疫功能。本研究显示，观察组临床总有效率高于对照组，且临床症状改善时间、住院时间短于对照组，表明相较于单独使用重组人干扰素，联合炎琥宁治疗可提高 患儿治疗效果，改善临床症状。外源性给予重组人干扰素 可增强 患儿抗病毒感染能力，联合炎琥宁治疗可发挥协同作用，增强患儿免疫功能，减轻炎症反应程度，减缓病情发展进程。免疫球蛋白合成、释放有利于灭活病毒，、分布于呼吸道上皮、黏膜，可中和病毒，降低感染发生风险，患儿早期存在体液免疫紊乱情况，免疫球蛋白水平可反映机体免疫功能，若、水平降低表明病毒尚未完全清除。本研究显示，治疗 后，观察组血清、水平高于对照组，表明联合治疗清除病毒能力强于单独使用重组人干扰素。同时本研究发现，治疗 后，观察组 低于对照组，、高于对照组。重组人干扰素 可产生抗病毒蛋白，刺激临床误诊误治 23 年 2 月 第 36 卷 第 2 期 ,36,2 Februgary 23免疫细胞，增强机体杀伤病毒能力，并能改善患儿气道功能。炎琥宁可进一步降低炎性因子水平，缓解呼吸道症状，进而改善肺功能。结合本研究结果可知联合治疗可调节 淋巴细胞等免疫细胞水平，增强抗病毒能力，有利于及时清除感染，减轻炎症反应，进而提升 患儿呼吸功能。同时本研究发现联合治疗后不良反应总发生率并未明显增加，提示联合治疗安全性高。可识别病毒相关分子，并能激活细胞内相关信号转导途径，促进特异性基因、趋化因子表达。有研究表明，调节 信号通路可能成为治疗炎性疾病的新靶点，仅募集接头蛋白，可通过 激活下游炎性细胞因子。还可激活 信号途径，与 结合形成 三聚体，以无活性状态存在，病毒感染后 磷酸化促使三聚体分离，促使 形成，可促进、等炎性因子表达，促使单核细胞浸润，进而促进间质性肺炎产生。另外抑制、表达可降低该信号转导途径活化程度，进而发挥抗病毒感染作用。本研究显示，治疗 后，观