TGF-β1与Smad4在...腺导管癌组织中的表达及意义_刘楠楠.pdf

第 卷 第 期北华大学学报（自然科学版）年 月 （）文章编号：（）：与 在乳腺导管癌组织中的表达及意义刘楠楠，姜 晶，齐冬雪，董 营，于春艳（北华大学基础医学院，吉林 吉林；北华大学附属医院，吉林 吉林；连云港市第一人民医院，江苏 连云港）摘要：目的 探讨 和 在乳腺导管癌组织中的表达，分析其与乳腺导管癌发生发展的关系及意义方法 选取 例乳腺导管癌组织标本，应用免疫组织化学 法检测 和 在乳腺导管癌组织中的表达水平，并评估二者的表达与各种临床病理参数间的关系、与 的表达是否具有一致性结果 和 蛋白表达均与乳腺导管癌 分期呈负相关关系（，；，）；而与患者年龄、肿瘤直径、肿瘤组织学级别、是否淋巴结转移、雌激素受体（）、孕激素受体（）以及人表皮生长因子受体（）的表达无关（）此外，分析表明，与 的表达具有一致性（，）结论 评估乳腺导管癌组织中 和 的表达可能有助于预测乳腺导管癌的进展关键词：乳腺导管癌；中图分类号：文献标志码：收稿日期：基金项目：吉林省教育厅科学技术研究项目（）；吉林省科技发展计划项目（）；吉林省高等教育科研课题（）；北华大学大学生创新创业训练项目（）作者简介：刘楠楠（），女，博士，副教授，主要从事肿瘤病理学研究，：；通信作者：于春艳（），女，博士，教授，硕士生导师，主要从事肿瘤病理学研究，：，（，；，；，）：，（，；，），（），（，）：；乳腺癌是最常见的恶性肿瘤，也是女性因癌症死亡的主要原因尽管目前临床诊断乳腺癌的方法很多，但乳腺组织活检仍然是确诊乳腺癌的最佳方法虽然对于乳腺癌进展的确切分子机制目前仍不清楚，但许多研究表明，调节细胞生长、分化、增殖和凋亡的 信号通路在乳腺癌进展中具有重要作用（）是转化生长因子 超家族的多肽成员，通过与特异性跨膜丝氨酸 苏氨酸激酶受体 （）结合而发挥其效应，活化的 招募并激活，而活化的 又进一步结合并激活细胞内 家族成员，如、和 等，启动信号级联，诱导 蛋白在细胞核内聚集并作为转录因子发挥转录调控作用本研究利用免疫组化法检测 和 在乳腺导管癌组织中的表达，分析二者间的表达关系以及与各临床病理参数间的关系，探讨 和 的表达对乳腺导管癌进展的意义 材料与方法 标本来源收集 年 月 年 月北华大学附属医院 例乳腺导管癌存档蜡块标本，均为手术切除标本肿瘤均为原发、单侧，临床病理资料记录详细完整患者均为女性，术前均未经放疗、化疗或内分泌治疗患者年龄 岁，中位年龄 岁 主要试剂兔抗人 多克隆抗体（）与兔抗人 单克隆抗体（）（公司，英国）；通用型 免疫组织化学试剂盒（）、试剂盒（）（福州迈新生物技术开发有限公司）病理诊断标准乳腺癌病理诊断参照 年 乳腺病理学分类（简称 分类）形态学标准；恶性肿瘤国际临床分期（和 分期）根据 年美国癌症联合会分期指南（）标准确定 免疫组织化学染色取乳腺导管癌组织蜡块，行连续切片，厚 ，染色，光镜观察，确定病理诊断留取白片，用于做免疫组织化学染色，检测其 和 蛋白表达染色操作步骤：白片脱蜡至水，应用枸橼酸盐修复液（）高压修复 ，将正常非免疫血清（羊血清）封闭 ，加 抗（两种抗体均为 稀释），冰箱内过夜；次日取出后用 冲洗（），滴加抗（生物素标记的羊抗兔），室温孵育 ，用 冲洗（）；滴加抗（链霉菌抗生物素蛋白过氧化酶），室温孵育 ，用 冲洗（）；行 显色，显微镜下控制显色强度，苏木素复染，梯度酒精脱水，以中性树胶封片；以正常动物血清代替一抗作阴性对照，用已知阳性片作阳性对照 结果评估评估采用盲法阅片方式，随机选取 个高倍视野（），以染色强度和阳性细胞率的得分之乘积进行评估 与 蛋白阳性染色主要分布于细胞质染色结果按每张切片的阳性细胞数比例及着色深浅赋分，行半定量分析阳性细胞数百分率（）评估：赋 分，赋 分，赋 分，赋 分，赋 分染色强度（）评估：无着色或背景均匀一致的浅黄色赋 分，浅棕黄色赋 分，棕黄色赋 分，棕褐色赋 分 与 乘积数为 （），即 为此切片最终记分结果，分值越高，代表蛋白表达水平越高 统计学分析应用 对数据进行处理与统计学分析乳腺癌组织中 与 蛋白表达与各临床病理参数间的关系应用 相关分析；一致性检验评估在乳腺癌组织中 与 的表达是否具有一致性以 为差异具有统计学意义 结 果 和 在乳腺导管癌组织中的表达本研究结果显示，与 在乳腺导管癌组织中的阳性表达率分别为 （）和（），且主要呈弥漫性分布于细胞质中见图 图（）和（）蛋白在乳腺癌组织中的表达 （）（）与 蛋白与乳腺导管癌临床病理参数的关系本研究结果显示，与 蛋白表达与患者的年龄、肿瘤直径、肿瘤的分化程度、淋巴结转移、（雌激素受体）、（孕激素受体）以及（人表皮生长因子受体）表达无相关性（北华大学学报（自然科学版）第 卷），但 和 蛋白与乳腺导管癌 分期呈负相关关系（，；，）见表 与 蛋白表达的关系本研究结果显示，例乳腺导管癌组织中有 例 和 蛋白同时呈阴性表达，有 例同时呈阳性表达；（）（）例，（）（）例值得注意的是，一致性检验表明 与 的分类具有一致性（，）见表 表 乳腺导管癌患者临床病理参数与 和 表达的关系 项目年龄 岁组织学级别高分化中分化低分化 分期期期肿瘤直径 淋巴结转移无有阴性阳性阴性阳性阴性阳性 注：期与期比较 表 和 表达间的一致性 注：与 表达比较 讨 论目前，人类共检测到 种 亚型，即、和，具有调节乳腺导管和腺泡发育的生理功能在乳腺癌中，信号对肿瘤生长和转移具有正负双向调节作用，这些作用可能取决于肿瘤所处的微环境在本研究中，的表达与乳腺导管癌的 分期呈负相关关系，即随着 分期的升高，的阳性表达率呈降低趋势而在临床上，分期较高往往提示预后相对不好，这说明在预后较差的患者中更易出现 失表达现象虽然本研究无法得出这种现象的具体机制，但鉴于 在肿瘤的进展中可能发挥抑制作用，推测在本研究中 可能作为一种抑癌基因存在，随着乳腺导管癌恶性度的增高呈现出失表达现象也是合理的 发现之初就被认定为肿瘤抑制基因，其失表达或表达降低通常出现在结直肠癌和胰腺癌中而关于 在乳腺癌中的作用研究相对较少有研究发现，在乳腺癌组织中的表达低于周围正常乳腺上皮组织，但 阴性患者的生存时间更长，也就是说 在乳腺癌中第 期刘楠楠，等：与 在乳腺导管癌组织中的表达及意义可能并非只发挥抑癌基因的作用，其在乳腺癌进展中的作用可能更复杂在本研究中，的表达与乳腺导管癌 分期也呈负相关关系，也就是说至少在这部分乳腺导管癌患者中，分期较高时 的阳性表达率较低，此时 可能作为一种抑癌基因发挥作用本研究发现，和 与乳腺导管癌的 分期呈负相关关系，二者在 信号通路中是上下游关系，其一致性检验发现 与 二者的表达具有一致性，也就是说 与 常表现为共同阴性表达或者共同阳性表达虽然目前还不清楚这种现象的发生机制，但推测作为抑癌基因的 与 联合表达者 信号通路可能是通畅的，细胞的生长受到调控，而二者皆失表达者可能无法通过 通路传递生长抑制信号而无序性生长，转化为恶性，这还需要进一步的实验去证实综上所述，本研究发现，至少在部分乳腺导管癌患者中检测 和 蛋白的表达可能有助于初步评估乳腺导管癌患者的预后此外，本研究为乳腺癌发生的分子机制研究提供了实验依据致谢：本文是北华大学大学生创新创业训练项目（）研究成果的一部分，临床医学院 级周阳、级刘家彤、级姚子涵，口腔学院 级冯建行等同学参与了本项目的研究工作参考文献：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，：，：，：，：，（）：，（）：，（）：，（），（）：，（）：张书勤，魏柏，马薇，等、在乳腺癌细胞中的表达和意义中国妇幼保健，（）：，（）：，（）：，：，：【责任编辑：陈丽华】北华大学学报（自然科学版）第 卷