IL-33及其受体ST2在前列腺癌组织中的表达及意义_白成霞.pdf

第 卷 第 期北华大学学报（自然科学版）年 月 （）文章编号：（）：及其受体 在前列腺癌组织中的表达及意义白成霞，赵 腾，肖梓屾，刘 剑，王振江，杨丽娟，侯勤龙，姜 晶，刘艳波（北华大学基础医学院，吉林 吉林；榆树市人民医院，吉林 榆树；北华大学附属医院，吉林 吉林）摘要：目的 探讨白细胞介素（，）及其受体生长刺激表达基因 蛋白（，）在正常前列腺组织（，）、良性前列腺增生组织（，）以及前列腺癌（，）组织中的表达差异方法 收集癌旁正常前列腺组织 例，良性前列腺增生组织 例，前列腺癌组织 例；通过免疫组织化学染色技术检测各个组织中 及 的阳性表达率，并分析二者之间关系，同时判定 和 与前列腺癌恶性度之间的关系；通过免疫组织化学染色法检测 巨噬细胞在不同前列腺组织的浸润差异，并分析 与巨噬细胞浸润的关系结果 与 相比，组织中 和 表达明显降低，且随前列腺癌 分级增加，其表达降低（）；与 相比，组织中 和 表达明显降低（）；与 在、中的表达均呈正相关关系；与巨噬细胞在、中的表达均呈正相关关系结论 和 中的 可能是由巨噬细胞分泌的，可能具有抑制前列腺癌发生发展的作用关键词：白细胞介素；生长刺激表达基因 蛋白（）；前列腺癌中图分类号：文献标志码：收稿日期：基金项目：吉林省科技发展计划项目（，）；北华大学研究生创新项目（，）作者简介：白成霞（），女，硕士研究生，主要从事泌尿生殖系统肿瘤发病机制研究，：；通信作者：刘艳波（），女，博士，教授，硕士生导师，主要从事泌尿生殖系统恶性肿瘤发病机制研究，：，（，；，；，）：（）（）（），（）（），（），（），；：；（）；目前，前列腺癌的发病率在中老年男性中呈逐年上升趋势根据 年世界癌症报告数据显示：前列腺癌为全球第四大常见癌症和男性第二大癌症在前列腺炎发病过程中，伴有大量炎症细胞的浸润和细胞因子的分泌，这些炎症因子在前列腺癌发生发展过程中发挥重要作用 为 家族中的一员，有研究发现，在多种恶性肿瘤中高表达，并能促进癌症的恶化但是，在前列腺癌发生发展过程中的作用国内外尚未见报道因此，本研究通过探讨 及其受体 在正常前列腺组织、良性增生前列腺组织、前列腺癌组织中的表达差异以及与前列腺癌恶性度之间的关系，为前列腺癌的靶向治疗提供实验依据 材料与方法 研究对象选取 年 月 年 月北华大学附属医院收治的前列腺癌患者 例（其中 评分 分 例，分 例，分 例），另取同期收治的良性前列腺增生患者 例（病理学证实），取癌旁的正常前列腺组织 例前列腺癌患者年龄 岁，平均（）岁；前列腺增生患者年龄 岁，平均（）岁本研究经北华大学医学伦理委员会批准，患者对本研究知情同意 仪 器显微镜（，公司，日本）；海尔冰箱（，青岛海尔公司）；光学显微镜、显微摄像仪（公司，日本）；电子天平（，上海圣科仪器有限公司）；移液 器（，德国）；灭菌锅（，广州康迈医疗器械有限公司）；计（山东潍坊精鹰医疗器械有限公司）；载玻片、盖玻片等（北京中杉金桥生物技术有限公司）试 剂兔抗（）抗体、兔抗（）抗体、鼠抗（）抗体（公司，美国）；辣根过氧化物酶标记的兔 鼠 二抗以及 显色液（北京中杉金桥生物技术有限公司）；二甲苯（分析纯，天津化工生产有限公司）；无水乙醇（天津化工生产有限公司）；中性树胶封片剂（上海研生生化试剂有限公司）；甲醛（天津化工生产有限公司）；苏木素、磷酸盐缓冲溶液（缓冲液）颗粒、柠檬酸盐抗原修复缓冲颗粒、阴离子防脱片剂（北京中杉金桥生物技术有限公司）其他均为国产分析纯试剂 方 法本研究采用免疫组织化学染色法检测 及 的表达取组织切片，在标准浓度二甲苯中脱蜡 次，次；经梯度酒精脱水（酒精，酒精 ，酒精 ，酒精，酒精 ，酒精 ）后放入 液中漂洗 次，次；将组织切片放入高压锅中，加入抗原修复液 ，没过切片，行高温高压修复，然后关闭电源，待修复液冷却至室温后用 液漂洗 次，次；将滴加新鲜配制的 溶液的切片放入湿盒中封闭 ；漂洗 次，次；滴加一抗（、和巨噬细胞），放置过夜；漂洗 次，次；滴加二抗，后 漂洗 次，次；显色 ，实时行镜下观察，当棕黄色阳性颗粒染色强度高于背景时，将组织切片放入自来水中终止反应；在苏木素中核染 ，用自来水冲洗 ；梯度酒精脱水（酒精 ，酒精 ，酒精 ，酒精 ，酒精，酒精 ），用二甲苯透明后中性树脂封片 结果判断及处理由两位经验丰富的病理医师进行双盲阅片在固定稀释倍数和时间下，当细胞膜和（或）胞浆显现棕黄色颗粒时判定为 及 阳性表达使用 软件对阳性表达率及浸润情况进行计算：、阳性表达率阳性面积 整个切片面积巨噬细胞浸润情况为前列腺切片单位面积上的 巨噬细胞数 统计学分析应用 对数据进行处理与统计学分析计量资料以均数标准差（?）表示，多组间样本均数比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用 检验；计数资料以百分率（）表示，组间比较行检验；相关性表达进行 分析以 为差异具有统计学意义 结 果 及其受体 在前列腺组织中的表达本研究结果显示，运用免疫组织化学染色法检测标本、的表达及定位，阳性表达的 呈棕黄色颗粒，主要表达于腺上皮细胞、癌细胞和成纤维细胞等，箭头表示阳性染色区域见图 与 相比，在 中的表达明显降低（）；与 比，在 的表达明显降低（）见图 阳性表达的 呈棕黄色颗粒，主要表达于腺上皮细胞、单核细胞、癌细胞、血管内皮细胞等见图 与 相比，在 中的表达明显降低（）；与 比，在 的表达亦明显降低（）见图 不同前列腺组织 与 相关性分析本研究结果显示，组织中 与 阳北华大学学报（自然科学版）第 卷性表达呈正相关关系（，）；组织中 与 阳性表达呈正相关关系（，）见图 图 及 在前列腺组织中的表达情况（）（）图 和 在前列腺组织表达的统计学分析 图 及 在 及 组织表达的相关性 及 与前列腺癌恶性度关系本研究通过对 例 标本均进行 分级，并统计 及 在不同病理分级标本中的表达情况，结果显示，评分 分为 例，第 期白成霞，等：及其受体 在前列腺癌组织中的表达及意义的阳性表达率为（），阳性表达率为（）；评分 分为 例，的阳性表达率为（），阳性表达率为（）；评分 分为 例，的阳性表达率为（），阳性表达率为（）评分越高，前列腺癌恶性度越高，及 表达越低不同病理分级之间比较差异具有统计意义（）见表 表 前列腺组织中、的表达与 分级关系 （?）评分 分 阳性率 阳性率 注：与低恶性度比较；中恶性度与高恶性度比较 与巨噬细胞在前列腺组织中的相关性本研究结果显示，与 比，巨噬细胞在 中的单位面积数量明显降低（）；与 比，巨噬细胞在 的单位面积数量明显降低（）巨噬细胞在不同前列腺组织中的浸润情况见图 、，箭头表示浸润的巨噬细胞 与 巨噬细胞在、中的相关性分析结果显示，组织中 与巨噬细胞阳性表达呈正相关关系（，见图）；组织中 与 巨噬细胞阳性表达呈正相关关系（，见图）图 不同前列腺组织中 巨噬细胞的浸润情况 图 与浸润的 巨噬细胞在不同前列腺组织中的相关性 讨 论实体恶性肿瘤在发生发展过程中伴有大量炎症细胞浸润和细胞因子分泌，与肿瘤有关的细胞因子较多，如 家族、家族、肿瘤坏死因子家族以及 家族等，其中 家族在肿瘤中的作用受到广泛关注 被证实为 家族中重要成员，有研究证实 在组织和结构细胞（血管内皮细胞、支气管上皮细胞、胃上皮细胞、成纤维细胞等）的细胞核中为组成性表达，也有研究证实 也是细胞外的细胞因子 作为 家族成员，曾经被认为是孤儿受体，经过研究最终认为是 的受体，最初研究证实 仅在 细胞中表达，后证实 细胞、细胞、细胞也表达 通过由 和 组成的异二聚体受体复合物介导，该复合物启动适应分子的招募，包括骨髓分化初级反应蛋白（）、受体相关激酶（）、受体相关激酶 （）、受体相关因子（）、端激酶（）、细胞外信号调节激酶（）、激酶的激活，启动信号传导，通过级联放大效应产生一系列生物学作用有研究证实，亚型 在不同肿瘤中具有抑制或促进恶性肿瘤发生发展的效应，可能与北华大学学报（自然科学版）第 卷肿瘤的微环境有关，如 在乳腺癌、多发性骨髓瘤、肺癌、舌鳞癌、胃癌、非小细胞肺癌、卵巢癌等多种恶性肿瘤中高表达，并且大多与不良预后相关在对人类结直肠癌、胶质瘤等研究中发现，血清中高水平的 及其受体 可增加肿瘤细胞的迁移和侵袭，以上证据说明 具有促进上述实体恶性肿瘤的作用另有研究证实，将 注射到已建立的黑色素瘤小鼠模型中，发现其可抑制肿瘤的发展，其机制可能与 细胞和嗜酸性粒细胞的浸润增加以及免疫抑制性骨髓细胞的激活减少有关另外，还通过 途径促进 的分化和成熟，增强 细胞和 细胞的抗肿瘤反应低剂量的重组小鼠白介素 能够显著抑制肝癌、胃癌、肺癌皮下荷瘤小鼠的生长，高剂量的重组小鼠白介素 显著抑制结肠癌皮下荷瘤小鼠的生长肿瘤衍生的 能抑制小鼠肝细胞癌的发展 还可以激活嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细胞，进一步推动 抗肿瘤作用的发生以上研究均可证实 具有抑制某些实体恶性肿瘤的作用但 及其受体是否参与前列腺癌的发生发展尚不清楚为探究 对前列腺癌的作用及可能机制，本研究利用免疫组织化学染色法观察了 和 在前列腺癌、良性前列腺增生组织及前列腺癌旁组织的表达情况，并分析 和 在不同前列腺疾病的表达差异，结果显示：主要分布在腺上皮细胞、血管内皮细胞、巨噬细胞和部分癌细胞等，主要分布在单核细胞、巨噬细胞以及血管内皮细胞等与癌旁组织比（），组织中 和 的表达量没有明显变化（），但在 中的表达明显降低（），且随着癌症恶性度的增加其表达明显降低本研究通过分析 和 相关性可知，和 在 和 组织均呈正相关关系，表明 信号途径可能参与了抑制前列腺癌的发生发展本研究通过免疫组织化学染色法检测了巨噬细胞和 阳性淋巴细胞等在 和 组织的浸润情况，结果显示：与 比，在 和 中，巨噬细胞表达明显增多（），与 比，在 中，巨噬细胞浸润降低；同时还发现，无论在 组织还是 组织中，与 巨噬细胞均呈正相关关系，表明巨噬细胞可能是分泌 的主要细胞类型巨噬细胞作为多效性的细胞分为 和 两种，经典的 型巨噬细胞分泌细胞因子可消灭肿瘤，型巨噬细胞则起到促进肿瘤生长的作用，肿瘤微环境决定肿瘤的发生发展在炎症细胞浸润的肿瘤微环境中巨噬细胞发挥着 吞噬消灭肿瘤的功能，但是在细胞因子等的作用下，型逐渐被极化为 型，使其占实体瘤免疫细胞的大多数，逐渐失去抗肿瘤的作用，因此，通常认为极化后的 型巨噬细胞是肿瘤预后不良的标志可识别 和 型的巨噬细胞，由于目前的研究并没有发现能够用于特异性识别 型巨噬细胞的标记物，所以认为 型巨噬细胞的标记物是 本研究结果显示，在 组织内主要以 型巨噬细胞浸润为主，其分泌的 具有抗前列腺癌的效应；当 发生恶性转化后，巨噬细胞由 逐渐过渡到以 型为主，发挥促癌作用但 与 和 之间的关系尚需进一步探索本实验存在不足之处：一是组织标本量不充足，方法单一；二是尚需增加细胞实验和动物实验进一步验证相关结论致谢：本 文 是 北 华 大 学 研 究 生 创 新 项 目（）研究成果的一部分，北华大学临床医学院 级刘家秀同学参与了本实验的部分工作参考文献：，：，（）：，（）：，（）：，（），：，：，：第 期白成霞，等：及其受体 在前列腺癌组织中的表达及意义，：，（）：，：，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：，：？，：，：，：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：，（）：王海涛，卢斌峰，蒋敬庭白介素 对免疫细胞的影响及其作用机制中国肿瘤生物治疗杂志，（）：，（）：，（）：，：，（）：，：，：，（）：王宏力，陈晓艳，张鹏，等缺氧诱导的结直肠癌外泌体通过激活 信号通路介导巨噬细胞极化现代肿瘤医学，（）：程辉，臧鲁燕，孙兆霞，等细胞毒性 淋巴细胞对 感染的巨噬细胞的杀伤作用中国病理生理杂志，（）：张暑军，李青青，乔春林，等 型巨噬细胞对小鼠膀胱癌 细胞活力、迁移、侵袭及凋亡的影响中国病理生理杂志，（）：，：，（）：，：，（）：，（）：刘杰，刘艳波，杨丽娟，等细胞因子、及其受体在前列腺癌组织中的表达及意义北华大学学报（自然科学版），（）：【责任编辑：陈丽华】北华大学学报（自然科学版）第 卷