241欢迎关注本刊公众号《中国癌症杂志》2023年第33卷第3期CHINAONCOLOGY2023Vol.33No.3·论著·tRF-Pro-CGG对小鼠胰腺癌细胞生物学行为的影响及其分子机制符庆胜1，2，金雷2，张旭东2，徐荧晨1，朱春富2，秦锡虎2，吴宝强1，21.蚌埠医学院研究生院，安徽蚌埠233030；2.常州市第二人民医院肝胆胰外科，江苏常州213003［摘要］背景与目的：tRNA衍生的片段（tRNA-derivedfragments，tRF）是一类长度为14~30nt的小分子非编码RNA，其影响着恶性肿瘤的发展进程。本研究旨在探讨tRF-Pro-CGG对小鼠胰腺癌细胞生物学行为的影响及其可能的分子机制。方法：采用实时荧光定量聚合酶链反应（real-timefluorescencequantitativepolymerasechainreaction，RTFQ-PCR）检测tRF-Pro-CGG在小鼠胰腺癌细胞系pan02、LTPA，人胰腺癌细胞系Capan-2和正常胰腺细胞HPDE6-C7中的表达水平。通过慢病毒转染技术过表达pan02细胞及敲低LTPA细胞中tRF-Pro-CGG的表达，采用RTFQ-PCR和蛋白质印迹法（Westernblot）检测过表达和敲低效果。采用细胞计数试剂盒-8（cellcountingkit-8，CCK-8）检测细胞增殖情况。采用transwell实验检测细胞迁移和侵袭能力。采用动物模型检测tRF-Pro-CGG对胰腺癌裸鼠移植瘤生长和转移的影响。采用H-E染色观察移植瘤的组织病理学结构。采用Westernblot检测移植瘤组织中Ki-67增殖指数、转移相关蛋白E-钙黏蛋白（E-cadherin）、波形蛋白（vimentin）的表达及磷脂酰肌醇3-激酶（phosphoinositide3-kinase，PI3K）/蛋白激酶B（proteinkinaseB，AKT）信号转导通路蛋白的表达及磷酸化情况。结果：小鼠胰腺癌细胞系pan02中tRF-Pro-CGG表达最低，在pan02细胞中转染tRF-Pro-CGGmimics后，tRF-Pro-CGG的mRNA和蛋白表达水平均显著升高（P＜0.01），细胞增殖能力显著降低（P＜0.01），细胞迁移（P＜0.001）和侵袭能力（P＜0.001）显著降低，裸鼠移植瘤体积（P＜0.01）和重量（P＜0.001）均显著降低，裸鼠移植瘤组织中出现明显坏死和凋亡细胞；裸鼠移植瘤组织中Ki-67增殖指数和vimentin的表达显著降低（P＜0.001），而E-cadherin的表达显著升高（P＜0.001），PI3K、P-PI3K、AKT和P-AKT的表达显著降低（P＜0.001），胰腺癌肝转移例数差异无统计学意义（P＞0.05）。小鼠胰腺癌细胞系LTPA中tRF-Pro-CGG表达最高，在LTPA细胞中转染tRF-Pro-CGGinhibitor后，tRF-Pro-CGG的mRNA和蛋白表达水平显著降低（P＜0.01），细胞增殖能力显著升高（P＜0.01），细胞迁移（P＜0.001）和侵...
