ApoE-_-小鼠在中医抗...粥样硬化研究中的应用及进展_江雨晨.pdf

作者单位安徽医科大学 生命科学学院，安徽 合肥 230032 作者简介江雨晨(2000 )，女，在读本科。DOI:10 14126/j cnki 1008 7044 2023 02 027综述ApoE /小鼠在中医抗动脉粥样硬化研究中的应用及进展江雨晨 关键词 动脉粥样硬化;小鼠，ApoE-/-;中医抗 AS;应用及进展;综述 中图分类号 543.5 文献标识码 A 文章编号 1008-7044(2023)02-0209-03在全球范围内，心血管疾病已成为威胁人类健康的“头号杀手”，而动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)是心血管疾病共同的病理生理基础，已成为欧美国家第一大死亡原因;在中国，随着经济水平及生活方式的改变，其发病率也呈逐年上升趋势。ApoE-/-小鼠由美国洛克菲勒大学生化遗传与代谢实验室和北卡罗莱纳大学病理遗传实验室应用胚胎干细胞基因敲除技术于 1992 年培育成功。ApoE-/-小鼠是动脉粥样硬化研究的经典动物模型，可在自然膳食的情况下形成严重的高脂血症，并自发形成纤维斑块和复合斑块，病理学改变与人类极为相似，因而被广泛应用于中医抗 AS 的研究。目前，ApoE-/-小鼠在中医抗 AS 研究涉及中药材、中药提取物、中药成品药及中医方剂等领域，并取得了相应的成果。1ApoE-/-小鼠在中医抗 AS 研究中的应用利用 ApoE-/-小鼠探索已有中药或中医疗法抗 AS 机理，对于推动中医的科学化和可持续发展及现代中西医学的发展有重要的意义。1 1中药材研究1 表明，艾叶具有抗炎和调节心血管系统功能的作用，能降低 IL-6、IL-l 等炎症因子的表达及巨噬细胞 NO 的释放量，从而抑制炎症反应。1999 年，oss2 指出 AS 既是脂质沉积性疾病，也是炎症性疾病。炎症和免疫反应在 AS 的形成和发展过程中起着重要的作用，是导致斑块不稳定和急性冠状动脉综合征发生的主要原因3。艾叶抗 AS 机制涉及炎症反应、细胞增殖迁移及凋亡等生物过程，选择性抑制 PIK3-Akt 信号通路可诱导巨噬细胞自噬，并减少斑块巨噬细胞的浸润，抑制炎症反应，达到稳定 AS 易损斑块的目的4。因此，艾叶对防治 AS 作用可能与降低 AS炎性反应有关。1 2中药材提取物部分药材提取物对 AS 有治疗作用，主要有黄连提取物、半枝莲总黄酮、丹参酮A、三七总皂苷等。黄连提取物具有减少斑块破裂次数和稳定斑块的作用，其机制大致与活化动脉硬化斑块内 PPA-7 表达有关，通过调节巨噬细胞极化达到控制动脉粥样硬化进程目的5。半枝莲总黄酮具有提高机体 SOD 活力、降低 MDA 含量的功效，通过抑制血管内皮细胞氧化损伤达到保护血管内皮的功能。丹参酮A 具有调节血脂、抗 AS 作用，作用机理与其参与 BP4 等信号通路调控及 LDL-和 LCAT 基因表达有关6。从三七中提取的三七总皂苷(total saponins of panaxnotoginseng，PNS)具有调节 MMP-9 和 TIMP-1 表达的作用，对 AS 性心脑血管疾病具有较好的临床疗效7。PNS 抗 AS作用与脂类代谢调节、血管内皮保护、炎症反应缓解、免疫相关细胞黏附抑制等作用机理有关8。1 3中成药丹蒌片、调脂通脉颗粒、软脉灵口服液、通心络胶囊、血脂康等中药成品药等被广泛应用于中医临床治疗中。丹蒌片通过抑制、减弱 VSMC 的活化与增殖达到减缓AS 进展的作用9。高 TG 和 LP-C 水平与血清中 sICAM-1及 sVCAM-1 水平升高相关，并参与 AS 病变过程。研究10 表明，调脂通脉颗粒可通过降低血清 LP-C 水平和减少黏附分子表达延缓 AS 进展。软脉灵口服液可抗血管生成，通过降低斑块内 CD105 蛋白表达抑制 AS 斑块内血管新生，从而抑制斑块的生成11。通心络胶囊中的蜈蚣、赤芍具有较强的抗 AS 作用，抗冠状 AS 机制与降低 TC、TG、LDL-C、CEC、ET、MMP-1、MMP-9 和升高 HDL-C、TIMP-1 水平等有关。血脂康通过抑制 HMG-CoA 还原酶减少胆固醇合成，通过增加肝细胞表面 LDL 受体活性加速 LDL 的清除。护心康通过降低血脂和 Wnt5a 在 AS 中的表达减轻 AS 病情12。1 4中医方剂中医方剂在中医药发展史中有着重要的作用，搜风祛痰法、降脂通脉方、黄连温胆汤等抗 AS 原理也是ApoE-/-鼠动物模型研究的重要内容。搜风祛痰中药复方稳斑汤通过调控血脂异常达到抗 AS的作用，其原理有三:一是调节血管壁 PPA-基因活性减轻 AS 的炎症作用，进而稳定易损斑块;二是提高 beclin-1 与LC3 的蛋白表达来增强粥样动脉硬化斑块的稳定性;三是通过调节 HO-1 和 HSP70 的表达干预 AS 斑块的形成及破裂。另外，血清 IGF-1 水平与动脉斑块稳定性有一定相关性，其水平下降可能会引起动脉斑块不稳定13。降脂通脉方对AS 小鼠具有降低血清总胆固醇、低密度脂蛋白的作用，对其肝脏基底膜 HSPG 表达有调节作用。黄连温胆汤对 ApoE-/-小鼠具有降脂、抗动脉粥样硬化、稳定易损斑块的作用，其机制可能通过调控 PI3K/Akt/mTO 信号通路，诱导巨噬细胞自噬，减轻动脉粥样硬化斑块内脂质负荷和炎症反应14，从而发挥抗 AS 作用。从传统的艾叶等中药及中药提取物如半枝莲总黄酮、丹参酮A、三七总皂苷等，到丹蒌片、调脂通脉颗粒、软脉灵口服液、通心络胶囊、血脂康等中药成品药，再到搜风祛痰法、降脂通脉方、黄连温胆汤等中医方剂，都被医学证明具有抗 AS 的疗效，也成为 ApoE-/-小鼠研究的主要内容。902淮海医药2023 年 3 月 第 41 卷 第 2 期J Huaihai Med，March 2023，Vol.41，No.22中医干预 ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的研究利用 ApoE-/-小鼠研究对已有中药或中医疗法的作用机理，探索其在治疗 AS 上的功效及作用机制。21中药材随着人们健康意识的增强，石斛、山楂等具有保健与药用价值的中药材在治疗 AS 等心血管疾病上的作用逐渐被重视。在我国，山楂作为保健和药用物品的历史久远，在预防或治疗疾病上已被广泛应用15，可调节 LDL-/-小鼠脂代谢，降低肝脏脂质及血脂水平，从而有效防治 AS。霍山石斛中的多糖可明显抑制血管内皮细胞的凋亡;同时石斛可抑制IL-1 等炎症因子表达，减少肝脏中 MDA，增加 SOD 和 GSH表达。表明霍山石斛可通过抑制炎症反应发挥抗 AS 作用16。22中药材提取物虎杖、南蛇藤素、淫羊藿苷等中药材提取物抗 AS 疗效研究也在逐步深入，如虎杖苷可与山楂提取物等配伍治疗 AS。连翘苷可上调经 AcLDL 刺激后的巨噬细胞 ABCA1、AB-CG1、S-B1 等基因表达，具有一定的抗 AS 作用17。淫羊藿苷(ICA)能改善 ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化易损斑块，有望成为防治易损斑块、治疗心脑血管疾病的潜在药物18。山楂叶总黄酮能降低血脂中的 TC、TG、LDL-C 水平，提高 HDL-C 水平，具有调节血脂功效，对 AS 治疗有积极效果19。虎杖苷在心血管系统疾病的防治过程中具有积极作用，尤其在抗 As 过程中20。虎杖与大黄醇提取物可明显增加抗 AS 炎症的保护性受体 PPA-蛋白和基因表达;虎杖苷、山楂提取物配伍通过刺激 PPA-、干预 ox-LDL-PPA-CD36 信号通路，使 ABCA1 mNA 表达上调、CD36 mNA 表达下调，抑制巨噬细胞泡沫化过程而达到抗 AS 的作用。另外，西洋参茎叶皂苷可通过改善小鼠主动脉斑块内部成分，尤其是减少斑块内脂质含量来稳定 AS 的斑块。南蛇藤素(又名雷公藤红素)可抑制 ApoE-/-小鼠血管壁 MMP-9 的表达，具有一定的抗 AS 作用。另外，南蛇藤素通过减少 ApoE-/-小鼠 AS 斑块中 CD40L 表达和巨噬细胞聚集，抑制 ApoE-/-小鼠动脉 AS斑块内 炎 症 反 应，从 而 稳 定 AS 斑 块21。银 杏 内 酯 B(ginkgolide B，GB)能够特异性拮抗血小板活化因子(plateletactivating factor，PAF)受体，GB 能减轻或延缓 AS 进展，其作用机理与抑制炎症因子表达、保护血管内皮细胞等有关22。23中成药中药成品药抗 AS 成效一直是临床重要关注点。益肾活血胶囊、清热祛瘀颗粒、新活络效灵丹、双参芎连颗粒等中药成品药在抗 AS 方面的研究取得了较好的进展。益肾活血胶囊中的枸杞多糖、丹参酮及川芎嗪等有良好的降血脂作用。清热祛瘀颗粒能抑制小鼠糖尿病 AS 的炎症反应，为临床使用中医治疗糖尿病 AS 提供了科学依据与新思路。新活络效灵丹具有提高 AS 小鼠主动脉组织 TGF-mNA 和 Cav-1mNA、S-BImNA 表达的作用，能防治 AS早期斑块的形成23。双参芎连颗粒主要成分为丹酚酸、丹参酮、小檗碱，可通过抗炎作用抑制 AS 的发生和发展。复方冬虫夏草口服液由冬虫夏草、西洋参等组成，可抑制ApoE-/-小鼠 AS 斑块的形成，与降低其血清中 TC、TG、LDL-C 水平、缩小胸主动脉斑块面积等有关24。中药材与中药成品药的配伍也成为一种潜在治疗方案，由虎杖和芍芍胶囊组成的解毒活血方案在调控 AS 易损斑块相关因子方面优越性显著。24中医方剂清热化痰活血方、温肾化痰方、通瘀煎等中医方剂在治疗 AS 方面的功效得到证实。清热化痰活血方可有效抑制 AS 斑块内超氧化物阴离子及炎性因子的表达，达到稳定斑块的作用。温肾化痰方可通过调节与血管平滑肌细胞凋亡、增殖相关基因及蛋白表达改善 AS 斑块形成及发展25。通瘀煎通过降脂、减少炎症因子的释放、抑制主动脉内炎症及增生反应的发生达到抗 AS 斑块形成作用26。3小结中医利用 ApoE-/-小鼠抗 AS 的机制及功效研究尚处在探索初始阶段，后续研究应关注以下三个方面。其一，对于抗 AS 而言，中药和中医疗法是一个巨大的宝库，目前无论在 AS 的治疗机理揭示，还是从中医角度获得新的抗 AS 治疗的中药和中医疗法，广度和深度都有待进一步拓展。其二，ApoE-/-小鼠为中医研究抗 AS 提供了动物模型，也为中西医结合治疗 AS 提供更多的切入点。比如，从中医角度，AS 的病机多为瘀毒阻于脉络，致气血运行失畅，血液瘀滞，瘀毒互阻致脉络不畅。这样，清热解毒法治疗 AS 作为中西医结合治疗 AS 极好的切入点，将清热解毒与活血化瘀结合才能发挥多通路、多靶点作用的优势。最后，要坚持“走出去，引进来”的方略，扩大中医抗 AS研究的中外医学学术交流。利用 ApoE-/-小鼠动物模型开展中医抗 AS 研究是中外合作的技术与方法。一方面将研究成果发表在国际医学期刊上，便于国际交流并扩大中医的影响力;另一方面要加强对国外 ApoE-/-小鼠动物模型最新研究成果的追踪，通过学习吸收，为进一步拓展中医治疗 AS的研究探索新思路。参考文献 1LI S，ZHOU S，YANG W，et al Gastro-protective effect of edibleplant Artemisia argyi in ethanol-induced rats via normalizing in-flammatory responses and oxidative stressJ Journal of Ethno-pharmacology，2018，214:207-217 2OSS Atherosclerosisan inflammatory diseaseJ N Engl JMed，1999，340(2):115-126 3HANSSON G K，HEMANSSON A The immune system in ather-osclerosis J Nat Immunol，2011，12(3):204-212 4何树苗，陈元堃，曾奥，等 基于网络药理学与分子对接技术预测艾叶抗动脉粥样硬化的分子机制J 海南师范大学学报(自然