[收稿日期]2021-11-30；[修回日期]2022-01-18[基金项目]江西省卫生健康委科技计划（SKJP20211554）；江西省中医药管理局科技计划（2022A177）[作者简介]胡熹（1987-），女，硕士研究生，主治医师，E-mail:656605964@qq.com[通信作者]罗俊，E-mail:174637426@qq.comc2023年版权归《上海口腔医学》编辑部所有miR-497-5p在前成骨细胞MC3T3-E1分化和矿化中的作用及机制探讨胡熹1，罗俊2（1.南昌大学第二附属医院口腔医学诊疗中心，江西南昌330006；2.南昌大学附属口腔医院正畸科，江西省口腔生物医学重点实验室，江西南昌330006）[摘要]目的：研究微小RNA（miR）-497-5p在前成骨细胞MC3T3-E1分化和矿化中的作用，并探讨其相关机制。方法：取第3代MC3T3-E1细胞，分别转染miR-497-5p过表达质粒miR-497-5pmimics、低表达质粒miR-497-5pinhibitor和阴性对照质粒miR-497-5pNC，设为miR-497-5pmimics组、miR-497-5pinhibitor组和miR-497-5pNC组。取不做处理的细胞作为空白组。成骨诱导后14天，检测碱性磷酸酶（ALP）活性；免疫印迹法检测成骨分化相关蛋白骨钙素（OCN）、I型胶原（COL-I）蛋白表达量；茜素红染色法观察矿化情况；免疫印迹法检测Smad泛素化调节因子2（Smurf2）蛋白表达量；双荧光素酶实验验证miR-497-5p与Smurf2的靶向关系。采用SPSS25.0软件包进行统计学分析。结果：与空白组、miR-497-5pNC组相比，miR-497-5pmimics组ALP活性显著增强，OCN、COL-I蛋白表达量及矿化结节面积构成比显著升高，Smurf2蛋白表达量显著降低（P＜0.05）；miR-497-5pinhibitor组ALP活性显著减弱，OCN、COL-I蛋白表达量及矿化结节面积构成比显著降低，Smurf2蛋白表达量显著升高（P＜0.05）；与Smurf23’-UTR-WT＋miR-497-5pNC组、Smurf23’-UTR-MT＋miR-497-5pmimics组和Smurf23’-UTR-MT＋miR-497-5pNC组相比，Smurf23’-UTR-WT＋miR-497-5pmimics组双荧光素酶活性值显著降低（P＜0.05）。结论：过表达miR-497-5p对前成骨细胞MC3T3-E1的分化和矿化具有促进作用，其作用机制可能与负性靶向调控Smurf2蛋白表达有关。[关键词]前成骨细胞；微小RNA-497-5p；分化；矿化[中图分类号]R681[文献标志码]ADOI:10.19439/j.sjos.2023.01.004RoleandmechanismofmiR-497-5pinthedifferentiationandmineralizationofpre-osteoblastMC3T3-E1HUXi1,LUOJun2.(1.CenterofStomatology,TheSecondAffiliatedHospitalofNanchangUniversity.Nanchang330006;2.DepartmentofOrthodontics,Affiliat...
