常熟理工学院学报（自然科学）JournalofChangshuInstituteofTechnology（NaturalSciences）第37卷第2期2023年3月Vol.37No.2Mar.,2023miRNA-222调控CDKN1b和CDKN1c表达促进乳腺癌细胞增殖和迁移的机制研究殷嘉1,2*，何树燕3*，陈洁1，潘洁1，邵芳1（1.南京医科大学附属常州市第二人民医院中心实验室，江苏常州213003；2.常州武进区疾病预防控制中心，江苏常州213003；3.南通大学附属江阴医院肿瘤科，江苏江阴214400）摘要：通过检测乳腺癌样本和正常组织样本中miR-222表达量，转染miR-222模拟物（mimics）和抑制物（inhibitors），用CCK-8和Transwell检测miR-222对乳腺癌细胞增殖能力和迁移能力的影响．进一步预测miRNA-222的靶基因，构建其过表达载体和预测靶基因的荧光素酶报告载体．通过双荧光素酶检测系统鉴定靶基因，点突变实验验证与靶基因的结合位点．RT-PCR检测miRNA-222过表达或抑制后对靶基因表达的影响．分析CDKN1b和CDKN1c高、低表达水平与乳腺癌患者生存率的关系．结果表明与正常乳腺组织比较，肿瘤组织中miR-222表达显著上升（P<0.0001），miR-222的表达与淋巴结转移呈正相关．miR-222过表达后能促进乳腺癌细胞的增殖和迁移，反之则会抑制乳腺癌细胞的增殖和迁移．双荧光素酶报告系统显示miRNA-222过表达能显著抑制CDKN1b和CDKN1c的荧光素酶活性，点突变实验证实miR-222通过“种子区”与CDKN1b、CDKN1c的靶位点结合，从而负向调控CDKN1b和CDKN1c的表达．过表达miRNA-222后CDKN1b和CDKN1cmRNA的表达量显著降低（P<0.01）．相反，抑制miRNA-222表达后CDKN1b和CDKN1cmRNA的表达量上升（P<0.05）．CDKN1b和CDKN1c高表达患者的总体生存率显著高于低表达患者（P<0.05）．本研究表明miRNA-222通过负向调控CDKN1b和CDKN1c基因表达，进而影响乳腺癌细胞的增殖和迁移．关键词：miR-222；乳腺癌细胞；CDKN1b；CDKN1c；增殖；迁移中图分类号：R393文献标志码：A文章编号：1008-2794（2023）02-0078-08收稿日期：2022-10-15基金项目：常州市科技应用基础研究计划项目“莱菔硫烷通过pERK介导的Nrf2/HO-1信号轴抑制结肠癌细胞效应的机制研究”（CJ20200098）；常州市青苗人才培养项目（CZQM2020070）；江阴市卫健委面上项目“阻断CD47/SIRPα调控IFN-γ信号通路诱导肺癌肿瘤血管正常化的机制研究”（S202101）*共同第一作者通信作者：邵芳，助理研究员，硕士，研究方向：肿瘤免疫，E-mail：fuchenai@foxmail.com．近年来，乳腺癌已成为女性发生概率最...
