LncRNA_SNHG17...癌细胞生物学行为的调控作用_刘韵鹏.pdf

第 49 卷 第 2 期2023年 3 月吉林大学学报（医学版）Journal of Jilin University（Medicine Edition）Vol.49 No.2Mar.2023DOI：10.13481/j.1671587X.20230205LncRNA SNHG17通过 miR-384靶向 AEG1对非小细胞肺癌细胞生物学行为的调控作用刘韵鹏1,刘子豪1,康伯铭2,杨志广1（1.吉林大学第一医院胸外科，吉林 长春 130021；2.吉林大学药学院药学系，吉林 长春 130021）摘要 目的目的：研究长链非编码 RNA 小核仁 RNA 宿主基因 17（lncRNA SNHG17）对非小细胞肺癌（NSCLC）细胞生物学行为的影响，并阐明其作用机制。方法方法：培养人 NSCLC A549 细胞和H1299 细 胞，细 胞 按 照 分 组 要 求 分 别 转 染 pcDNA3.1-NC、SNHG17 过 表 达 质 粒（pcDNA3.1-SNHG17）、si-NC、SNHG17小干扰 RNA（si-SNHG17）、mimics NC、微小RNA-384模拟物（miR-384 mimics）、inhibitor NC、miR-384 抑 制 剂（miR-384 inhibitor）、pcDNA3.1-星 形 细 胞 上 调 基 因 1（AEG1）和 si-AEG1。实时荧光定量 PCR（RT-qPCR）法检测 A549细胞和 H1299细胞及各组转染后细胞中 lncRNA SNHG17、miR-384 和 AEG1 mRNA 表达水平；ENCORI 和 TargetScan 数据库预测lncRNA SNHG17 与 miR-384、miR-384 与 AEG1 mRNA 之间的靶向结合作用。A549 细胞分为 si-NC组、si-SNHG17 组、inhibitor NC 组、miR-384 inhibitor 组、si-NC+inhibitor NC 组、si-SNHG17+inhibitor NC 组、si-SNHG17+miR-384 inhibitor 组、si-AEG1 组、inhibitor NC+si-NC 组、miR-384 inhibitor+si-NC 组和 miR-384 inhibitor+si-AEG1 组。H1299 细胞分为 pcDNA3.1-NC 组、pcDNA3.1-SNHG17 组、mimics NC 组、miR-384 mimics 组、pcDNA3.1-NC+mimics NC 组、pcDNA3.1-SNHG17+mimics NC 组、pcDNA3.1-SNHG17+miR-384 mimics 组、pcDNA3.1-AEG1 组、mimics NC+pcDNA3.1-NC 组、miR-384 mimics+pcDNA3.1-NC 组 和 miR-384 mimics+pcDNA3.1-AEG1组。采用 CCK-8 法检测各组细胞活力，Transwell 法检测各组细胞中迁移细胞数和侵袭细胞数，Western blotting 法检测各组细胞中 AEG1 蛋白表达水平。结果结果：H1299 细胞中 lncRNA SNHG17 表达水 平 明 显 低 于 A549 细 胞（P0.01）。在 A549 细 胞 中，与 si-NC 组 比 较，si-SNHG17 组 细 胞 中SNHG17表达水平明显降低（P0.01），细胞活力、迁移细胞数和侵袭细胞数明显降低（P0.01）；在 H1299细胞中，与 pcDNA3.1-NC 组比较，pcDNA3.1-SNHG17组细胞中 SNHG17表达水平明显升高（P0.01），细胞活力、迁 移 细 胞 数 和 侵 袭 细 胞 数 明 显 升 高（P0.01）。在 A549 细胞中，与si-NC 组比较，si-SNHG17 组细胞中 miR-384 表达水平明显升高（P0.01），AEG1 mRNA 表达水平明显降低（P0.01）；在 H1299 细胞中，与 pcDNA3.1-NC 组比较，pcDNA3.1-SNHG17 组细胞中miR-384表达水平明显降低（P0.01），AEG1 mRNA 表达水平明显升高（P0.01）。ENCORI数据库预 测 SNHG17 与 miR-384 有 2 个 结 合 位 点。在A549细胞中，与 si-NC+inhibitor NC 组 比 较，si-SNHG17+inhibitor NC 组细胞中 AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显降低（P0.01），迁移细胞数和 侵 袭 细 胞 数 明 显 减 少（P0.01）；与 si-SNHG17+inhibitor NC 组 比 较，si-SNHG17+miR-384 inhibitor组细胞中 AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显升高（P0.01），迁移细胞数和侵袭细胞数明显 增 加（P0.01）。在 H1299 细 胞 中，与 pcDNA3.1-NC+mimics NC 组 比 较，pcDNA3.1-SNHG17+mimics NC 组细胞中 AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显升高（P0.01），迁移细胞数和侵 袭 细 胞 数 明 显 增 加（P0.01）；与 pcDNA3.1-SNHG17+mimics NC 组 比 较，pcDNA3.1-SNHG17+miR-384 mimics组细胞中 AEG1蛋白表达水平和细胞活力明显降低（P0.01），迁移细胞数 和 侵 袭 细胞数明显减少（P0.01）。在 A549细胞中，与 si-NC 组比较，si-AEG1组细胞中 AEG1文章编号 1671587X(2023)02029810收稿日期 20220627基金项目 吉林省科技厅自然科学基金项目（20200201372JC）作者简介 刘韵鹏（1984），男，吉林省长春市人，主治医师，医学博士，主要从事肺癌分子机制方面的研究。通信作者 杨志广，主任医师，硕士研究生导师（E-mail：）298刘韵鹏，等.LncRNA SNHG17通过 miR384靶向 AEG1对非小细胞肺癌细胞生物学行为的调控作用蛋白表达水平和细胞活力明显降低（P0.01），迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少（P0.01）；在H1299 细胞中，与 pcDNA3.1-NC 组比较，pcDNA3.1-AEG1 组细胞中 AEG1 蛋白表达水平和细胞活力明显升高（P0.01），迁 移 细 胞 数 和 侵 袭 细 胞 数 明 显 增 加（P0.01）。ENCORI 数据库预测miR-384 与 AEG1 有 1 个 结 合 位 点。在 A549 细 胞 中，与 inhibitor NC+si-NC 组 比 较，miR-384 inhibitor+si-NC 组细胞中细胞活力明显升高（P0.01），迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加（P0.01）；与 miR-384 inhibitor+si-NC 组比较，miR-384 inhibitor+si-AEG1 组细胞中细胞活力明显降低（P0.01），迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少（P0.01）。在 H1299 细胞中，与 mimics NC+pcDNA3.1-NC组比较，miR-384 mimics+pcDNA3.1-NC组细胞中细胞活力明显降低（P0.01）、迁移细胞数和侵袭细胞数明显减少（P0.01）；与 miR-384 mimics+pcDNA3.1-NC 组比较，miR-384 mimics+pcDNA3.1-AEG1组细胞中细胞活力明显升高（P0.01），迁移细胞数和侵袭细胞数明显增加（P0.01）。结论结论：lncRNA SNHG17 通过 miR-384 靶向 AEG1 调控 NSCLC 细胞的增殖、迁移和侵袭。关键词 长链非编码 RNA；小核仁 RNA 宿主基因 17；微小 RNA-384；星形细胞上调基因 1；癌，非小细胞肺；生物学行为中图分类号 R734.2文献标志码 ARegulatory effect of lncRNA SNHG17 on biological behavior of non-small cell lung cancer cells by targeting AEG1 through miR-384LIU Yunpeng1,LIU Zihao1,KANG Boming2,YANG Zhiguang1（1.Department of Thoracic Surgery，First Hospital，Jilin University，Changchun 130021，China；2.Department of Pharmacy，School of Pharmacy，Jilin University，Changchun 130021，China）ABSTRACT Objective：To investigate the effect of long non-coding RNA small nucleolar RNA host gene 17（lncRNA SNHG17）on the biological behavior of the non-small cell lung cancer（NSCLC）cells，and to clarify its mechanism.Methods：The human NSCLC A549 cells and H1299 cells were cultured，and the cells were transfected with pcDNA3.1-NC，SNHG17 over-expression plasmid（pcDNA3.1-SNHG17），si-NC，SNHG17 small interference RNA（si-SNHG17），mimics NC，microRNA-384 mimics（miR-384 mimics），inhibitor NC，miR-384 inhibitor（miR-384 inhibitor），pcDNA3.1-astrocyte elevated gene 1（AEG1），and si-AEG1，respectively.Real-time quantitative PCR（RT-qPCR）method was used to detect the expression levels of lncRNA SNHG17，miR-384，and AEG1 mRNA in the A549 cells，H1299 cells and cells in various groups after transfection；ENCORI and TargetScan Databases were used to predicte the targeted bindings between lncRNA SNHG17 and miR-384，miR-384 and AEG1 mRNA.The A549 cells were divided into si-NC group，si-SNHG17 group，inhibitor NC group，miR-384 inhibitor group，si-NC+inhibitor NC group，si-SNHG17+inhibitor NC group，and si-SNHG17+miR-384 inhibitor group，si-AEG1 group，inhibitor NC+si-NC group，miR-384 inhibitor+si-NC group and miR-384 inhibitor+si-AEG1 group.The H1299 cells were divided into pcDNA3.1-NC group，pcDNA3.1-SNHG17 group，mimics NC group，miR-384