50%稻瘟酰胺·稻瘟灵乳油气相色谱分析_万娜娜.pdf

Pesticide Science and Administration2023，44(1)农药研究50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油气相色谱分析万娜娜，余德勉，张钊，宋怀挺，梁观凤(上海悦联生物科技有限公司，上海201215)收稿日期:2022 9 11作者简介:万娜娜，女，质量工程师，主要从事农药制剂产品研发及分析方法开发工作。联系电话:021 67228039;E mail:wannana 。Analysis of 50%IsoprothiolaneFenoxanil EC by GCWan Nana，Yu Demian，Zhang Zhao，Song Huaiting，Liang Guanfeng(Shanghai Yuelian Bio-tech Co.，Ltd.Shanghai 20121，China)Abstract:In this paper，the analysis method to determine Fenoxanil and Isoprothiolane simultane-ously was established using GC FID，with Dibutyl O phthalate as internal standard.The re-sults showed that a standard curve of linear regression coefficients of 0.998 8 and 0.998 6，a stand-ard deviation of 0.146 and 0.084 8，a variation coefficient of 0.43%and 0.51%，and an averagerecovery of 99.92%and 99.37%for Fenoxanil and Isoprothiolane，respectively.Key Word:fenoxanil;isoprothiolane;GC摘要:文章中，建立了气相色谱法同柱分析稻瘟灵、稻瘟酰胺的含量的分析方法，以邻苯二甲酸二丁酯为内标，使用 HP 5 石英毛细管柱和 FID 检测器。结果表明，在该方法中稻瘟灵、稻瘟酰胺的标准曲线线性回归系数分别0.998 8 和0.998 6，标准偏差分别为0.146和 0.084 8，变异系数分别为 0.43%和 0.51%，平均回收率分别为 99.92%和 99.37%。关键字:稻瘟灵;稻瘟酰胺;气相中图分类号:S482.2;0657.7+1文献标识码:A文章编号:1002 5480(2023)1 29 8稻瘟灵是一种内吸性杀菌剂，耐雨水冲刷、药效显着、毒性低等。可用于浸泡稻种。正常使用条件下，对人、畜安全，对作物无药害。稻瘟灵主要防治稻瘟病，对稻瘟病具有预防和治疗作用。对水稻纹枯病、小球菌核病和白叶枯病有一定防效，同时可抑制稻飞虱的发生条件。稻瘟酰胺是一个新颖的用于防治水稻稻瘟病的内吸性杀菌剂，是一种难溶于水、低毒白色无臭固体。稻瘟酰胺的作用机制是抑制黑色素的生物合成途径，通过抑制附着胞的渗透从而阻止稻瘟病菌的侵染。具有新颖作用机制，92农药研究Pesticide Science and Administration2023，44(1)属于黑色素生物合成抑制剂(MBI)，在叶面和水下施用时防治稻瘟病效果极佳，且持效显著。该药性能稳定，持效期长，比较耐雨水冲刷，在稻田施药比较方便。将稻瘟灵和稻瘟酰胺两个药剂以适当比例混配使用，可以降低水稻稻瘟病的防治成本，提高防治效果，延长施药周期，减少农民的种植成本。现有文献报道，稻瘟灵气相分析方法1 5 和稻瘟酰胺的气相6 9 分析方法中部分采用填充柱分析，部分采用 ECD 检测器。由于现在气相分析主要以毛细管柱和 FID 检测为主，而目前还没有稻瘟灵和稻瘟酰胺同时分析的方法报道。由于 50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油为复配制剂，在实际生产中，如果两个组分单独测定易耗费时间。经过试验，摸索了一个在气相条件下同时测定稻瘟灵和稻瘟酰胺的分析方法。经过实验验证，此分析方法具有较好的准确度和精确度。1材料仪器1.1样品和试剂丙酮:分析纯;稻瘟酰胺标样:已知稻瘟酰胺质量分数98.0%;稻瘟灵标样:已知稻瘟灵质量分数98.0%;内标物:邻苯二甲酸二丁酯，应不含有干扰分析的杂质;内标溶液:称取1.25g 邻苯二甲酸二丁酯，置于250mL 棕色容量瓶中，用丙酮溶解并稀释至刻度，摇匀。1.2仪器气相色谱仪:具有氢火焰离子化检测器;色谱柱:30m 0.32mm(i.d.)石英毛细管柱，内壁键合 HP 5，膜厚 0.25m。1.3气相色谱操作条件温度():柱温230、检测器 270、气化器 270;气体流量(mL/min):载气(N2)40、氢气(H2)40、空气400;进样体积:1L;保留时间:内标物约为2.9min，稻 瘟 灵 约 为 4.4min，稻 瘟 酰 胺 约为 5.1min。上述操作参数是典型的，可根据仪器特点对给定操作参数作适当调整，以期获得最佳效果。50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油的气相色谱图(图 1)。1内标物;2稻瘟灵;3稻瘟酰胺图 150%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油气相色谱图2试验方法2.1标样溶液的配制称取稻瘟酰胺标样0.08g 和稻瘟灵标样 0.16g(精确到 0.000 2g)，置于同一 25mL 容量瓶中，用移液管加入 10mL内标溶液，摇匀。2.2试样溶液的配制称取 50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油样品 0.5g(精确到 0.000 2g)，置于25mL 容量瓶中，用移液管加入 10mL 内标溶液，摇匀。2.3试样的测定在上述操作条件下，待仪器03Pesticide Science and Administration2023，44(1)农药研究稳定后，连续注入数针标样溶液，计算各针相对响应值的重复性，待相邻两针的响应值变化1.0%后，按照标样溶液，试样溶液，试样溶液，标样溶液的顺序进行测定。2.4试样中有效成分质量分数的计算将测得的2 针试样溶液以及试样前后2 针标样溶液中的峰面积分别与内标溶液峰面积比值进行平均，试样中稻瘟灵(稻瘟酰胺)的质量分数 X(%)按式(1)计算:X=A2m1PA1m2(1)式中:A1 标样溶液中稻瘟灵(稻瘟酰胺)与内标物峰面积比的平均值;A2 试样溶液中稻瘟灵(稻瘟酰胺)与内标物峰面积比的平均值;m1 稻瘟 灵(稻 瘟 酰 胺)标 样 的 质量，g;m2 试样的质量，g;P 标样中稻瘟灵(稻瘟酰胺)的质量分数，%。3结果与讨论3.1溶剂的选择根据两种待测物质的溶解度性质，选择丙酮作为溶剂。3.2特异性在检测条件下，对 50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油中內标物、稻瘟灵、稻瘟酰胺试样进行 GC MS 分析，其 quality 值分别为 99、94、93，90，对 50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油试样及空白进行 GC MS 分析，其稻瘟酰胺、稻瘟灵及內标物出峰条件无干扰，满足分析条件中的特异性要求。图 2特异性测定 50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油试样+內标物 GC MS 色谱图13农药研究Pesticide Science and Administration2023，44(1)图 3特异性测定 空白样品 GC MS 色谱图图 4特异性测定 內标物 GC MS 色谱图23Pesticide Science and Administration2023，44(1)农药研究图 5特异性测定 稻瘟灵 GC MS 色谱图图 6特异性测定 稻瘟酰胺 GC MS 色谱图3.3分析方法的线性相关性实验按照方法准确配制一系列不同浓度的稻瘟灵和稻瘟酰胺标样溶液，然后按照本文中 2.3 测定步骤进行分析检测，分别以稻瘟灵、稻瘟酰胺与内标的质量浓度比为横坐标，稻瘟灵、稻瘟酰胺与内标物峰面积比为纵坐标，计算一元线性回归方程和作线性相关图。线性相关性测定试验数据(表 1)。33农药研究Pesticide Science and Administration2023，44(1)表 1稻瘟灵和稻瘟酰胺线性实验结果项目12345稻瘟灵标样与内标浓度比1.642 02.428 03.242 04.054 04.838 0稻瘟灵标样与内标峰面积比1.1951.8272.3982.9343.568稻瘟酰胺标样与内标浓度比0.830 01.254 01.666 02.058 02.476 0稻瘟酰胺标样与内标峰面积比0.6070.951.2721.6582.007稻瘟灵一元线性回归方程:y=0.729 8x+0.019 2，相关系数:2=0.998 8。稻瘟酰胺一元线性回归方程:y=0.856 1x0.119 6，相关系数:2=0.998 6。3.4分析方法的精密度实验任取一批 50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油，按本文中方法测定步骤连续测定稻瘟灵、稻瘟酰胺含量 5 次，分别计算其平均值、标准偏差、变异系数。精密度测定试验数据(表 2)。表 2稻瘟灵、稻瘟酰胺精密度实验结果项目12345稻瘟灵含量(%)33.7933.5433.6733.7733.93稻瘟灵平均含量(%)33.74稻瘟灵标准偏差(s)0.145 6稻瘟灵变异系数(%)0.43稻瘟酰胺含量(%)16.6816.5416.5816.6616.76稻瘟酰胺平均含量(%)16.64稻瘟酰胺标准偏差(s)0.084 8稻瘟酰胺变异系数(%)0.51从精密度测定试验数据表中可以看出，从稻瘟灵精密度测定试验数据表中可以看出，稻瘟灵 质 量 分 数 平 均 值 33.74%，标 准 偏 差0.145 6%，变异系数0.43%浓度 Horwits 公式计算 值 0.78。稻 瘟 酰 胺 质 量 分 数 平 均 值16.64%，标 准 偏 差 0.084 8%，变 异 系 数0.51%浓度 Horwits 公式计算值 0.87。此气相分析方法具有良好的精密度。3.5分析方法的准确度实验选取准确称取5 份空白试样，并分别加入定量的稻瘟灵、稻瘟酰胺标样，然后按本文中方法测定步骤测定稻瘟灵、稻瘟酰胺标样的加入量，同理论值进行比较，计算回收率。回收率测定中非分析物干扰空白试样代表性图谱(图7)，回收率测定试验数据(表3)。图 750%稻瘟酰胺.稻瘟灵乳油准确度空白试样测定代表性气相色谱图43Pesticide Science and Administration2023，44(1)农药研究表 3回收率测定实验结果序号稻瘟灵标样加入量(g)实测值(g)回收率(%)稻瘟酰胺标样加入量(g)实测值(g)回收率(%)10.164 90.163 899.330.083 30.082 899.4020.165 20.166 7100.910.084 20.083 198.6930.162 60.161 699.380.084 70.085 9101.4240.168 60.167 599.350.089 40.088 198.5550.166 20.167 2100.600.081 90.080 998.78平均99.9299.37按照本文中规定的方法进行检测试验，稻瘟灵的回收率 99.33%100.91%之间，平均回收率为 99.92%，稻瘟酰胺回收率在 98.55%101.42%之间，平均回收率为 99.37%，符合工业生产和质量监督检验的要求。4结论本文建立的气相色谱分析方法能对 50%稻瘟酰胺稻瘟灵乳油中有效成分进行分离测定，且具有良好的线性、精密度和准确度，操作简便，符合农药产品的质量分析要求，适用于产品的质量检测和控制，可以作为稻瘟酰胺和稻瘟灵混配制剂的分析方法。参考文献 1 李改云.气相色谱法分析 20%霉稻瘟灵微乳剂 J.现代农药，2017，16(3):35 37.2 潘静，马超，徐妍，等.42%己唑稻瘟灵悬浮剂的气相色谱分析 J.现代农药，2016，15(1):25 27.3毛朝姝，张春荣，任丽萍，等.稻瘟灵原药的气相色谱分析 J.化学与生物工程，2007，24(2):7374.4程运斌，刘育清.40%异稻稻瘟灵乳油的气相色谱分析 J.农药，