RBP、miR-126、S...粥样硬化斑块稳定性的相关性_刘梓宸.pdf

论著 收稿日期 基金项目 廊 坊 市 科 学 技 术 研 究 与 发 展 计 划 自 筹 项 目（）作者简介 刘梓宸（），男，河北霸州人，河北省廊坊市第四人民医院主治医师，医学学士，从事急性脑梗死疾病诊治研究。通信作者。：、在急性脑梗死中的表达及与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的相关性刘梓宸，李克娇，畅莎，宋雪，李芳（河北省廊坊市第四人民医院神经内二科，河北 廊坊 ；河北省廊坊市第四人民医院检验科，河北 廊坊 ）摘要目的 研究急性脑梗死患者血清视黄醇结合蛋白（，）、微小核糖核酸 （，）、沉默信息调节因子（，）水平较健康人变化幅度，并分析急性脑梗死患者三个指标水平变化与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的相关性。方法 选取来我院就诊的急性脑梗死患者 例为病例组，另选同期健康体检者 例为对照组，病例组患者行彩色多普勒超声检查，据超声结果分为稳定斑块组（）和不稳定斑块组（）。收集研究对象的临床资料；酶联免疫吸附试验检测血清 、表达；实时荧光定量 法检测血清 表达；分析患者血清 、表达与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系；受试者工作特征曲线分析患者血清 、表达对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的预测价值。结果 病例组患者血清 表达较对照组增加，、表达较对照组降低（）；不稳定斑块组血清 表达较稳定斑块组增加，、表达较稳定斑块组降低（）；血清 表达与颈动脉粥样硬化斑块稳定性存在正相关关系（，），血清 、表达与颈动脉粥样硬化斑块稳定性存在负相关关系（、，）；、及联合预测的 为 、，敏感度为、，特异度为、，三指标联合预测颈动脉粥样硬化斑块稳定性的价值好于单一预测价值。结论 急性脑梗死患者血清 表达增加，、表达降低，与颈动脉粥样硬化斑块稳定性相关，血清 、对颈动脉粥样硬化斑块稳定性具有较好的预测价值。关键词脑梗死；斑块，动脉粥样硬化；视黄醇结合蛋白质类 ：中图分类号 文献标志码 文章编号 （），（.，；.，）（），（）（）（），第 卷第期 年月河北医科大学学报 （）（），（），（）（，），（，），；，；急性脑梗死指脑动脉血管粥样硬化形成斑块，脱落后阻塞血管、血流中断或减少引起的脑组织坏死，是临床常见的脑血管疾病，近年来其发病率呈增加趋势，该病致残率及致死率高，严重影响患者的生活和生命安全。研究指出，高血压、高血脂、高血糖等是急性脑梗死、颈动脉粥样硬化斑块的影响因素，其参与急性脑梗死的病情进展。因而，发掘与斑块稳定性有关的标志物对急性脑梗死的诊断、治疗及评估具有重要意义。相关研究指出，血清视黄醇结合蛋白（，）、微小核糖核酸 （，）及沉默信息 调 节 因 子（，）与颈动脉粥样硬化斑块的稳定性存在关联，并且在急性脑梗死的发生发展中发挥作用。本研究旨在探索急性脑梗死患者血清 、水平变化，并分析其水平变化与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的相关性，为急性脑梗死的诊断及治疗、评估提供新思路。资 料 与 方 法一般资料选取 年月 年月来我院就诊的急性脑梗死患者 例为病例组，另选同期健康体检者 例为对照组，病例组患者行彩色多普勒超声检查，据超声结果分为稳定斑块组（）和不稳定斑块组（）。纳入标准：患者经、检查且符合急性脑梗死诊断标准；发病 内入院；精神状态良好能正常配合研究；患者临床资料完整；患者及其家属均知情同意。排除标准：心血管疾病者；癌症患者；免疫系统疾病。病例组、对照组一般资料差异无统计学意义（），具有可比性，见表。本研究经医院伦理委员会批准，且患者及家属均签署知情同意书。河 北 医 科 大 学 学 报第 卷第期表组研究对象一般资料比较 组别例数性别（例数）男性女性年龄（，岁）体重指数吸烟（例数）是否饮酒（例数）是否病例组 对照组 值 值 方法颈动脉超声检查采用美国 彩色多普勒超声诊断仪，探头频率 。患者取平卧位，于肩下垫软枕，将头部偏向一侧，充分暴露颈部，观察颈动脉内膜结构、光滑程度、增厚情况、斑块形态、位置、大小、内部回声、血流等情况，测量双侧颈动脉和分叉处及颅外段颈动脉内中膜厚度，取平均值为最终颈动脉内中膜厚度。检测采用荷兰皇家 成像系统，通道高分辨头颅线圈，对血管定位，确定血管分叉处，在颈动脉分叉处分别向上、下各扩展 行横断扫描及冠状面扫描。斑块稳定性判断根据颈动脉超声及 进行判断。若为软斑块或溃疡斑块，伴随斑块内出血、纤维帽破裂即为不稳定斑块；扁平斑块或硬斑块即为稳定斑块。血清 、表达检测收集组研究对象清晨空腹静脉血，高速离心机（北京东南仪诚实验室设备有限公司）离心 ，分离上清，酶联免疫吸附试验检测血清 （，广东固康生物科技有限公司）、（，北京博尔优生物技术有限公司）表达水平，按试剂盒说明书操作，多功能酶标仪（昆明赞纳生物科技有限公司）检测。血清 表达检测 提取血清总 ，加 与 样 品 比 例 ，混 匀，静 置 ，加 氯仿，静置，离心，取上层 ，加异丙醇，静置，离心，留沉淀，加 无水乙醇离心，弃上清，室 温干燥 ，加 水 溶 解，测 定 浓 度 及 纯 度，逆 转 录 为 ，反应条件为：，去除，反转录应条件为：，反应结束后，将 放在 冰箱备用，引物序列见表。实时荧光定量 ，为内参基因，法计算 的相对表达量，重复次。统计学方法应用 软件进行统计分析。计量资料采用比较检验，计数资料比较采用检验，相关性分析 、表达与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的关系；曲线分析 、表达对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的预测价值。为差异有统计学意义。表引物序列 （）结果病例 组 与 对 照组 研 究 对 象血 清 、表达与对照组相比，病例组患者血清 表达增加，、表达降低，差异有统计学意义（），见表。表组血清 、表达 ，（）组别例数 （）（）病例组 对照组 值 值 稳定斑块组和不稳定斑块组血清 、表达与稳定斑块组相比，不稳定斑块组血清 表达增加，、表达降低（），见表。表组血清 、表达水平 ，（）组别例数 （）（）稳定斑块组 不稳定斑块组 值 值 相关性分析血清 表达与颈动脉粥样硬化斑块稳定性存在正相关关系（河 北 医 科 大 学 学 报第 卷第期 ），血清 、表达与颈动脉粥样硬化斑块稳定性存在负相关关系（），见表。曲线分析血清 、单独及联合表达对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的预测价值：、及联合预测的 为 、，敏 感 度 为 、，特异度为 、，见表，图。表 相关性分析 值 值 值颈动脉粥样硬化斑块稳定性 表 曲线结果分析 最佳截断值 指数标准误 敏感度特异度 联合预测 图血清 、单独及联合表达对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的预测价值 ，讨论脑血管疾病是全球疾病负担的第位疾病，根据 中国卫生健康统计提要 报告显示，年我国农村和城市脑血管疾病病死率分别为 和 ，约每例脑血管疾病患者中有例死亡。急性脑梗死是脑血管疾病的常见类型。文献指出，约七成脑梗死患者存在单侧颈动脉粥样硬化，约六成脑梗死患者存在双侧颈动脉粥样硬化；通过手术去除颈动脉粥样硬化病变组织后，患者发生脑梗死的概率大大降低，提示着颈动脉粥样硬化斑块易损结构破裂、血小板聚集形成血栓是脑梗死的主要危险因素。颈动脉粥样硬化斑块可通过超声检查区分为稳定性斑块与不稳定性斑块，其中稳定性斑块的炎性细胞少且纤维多，不易破裂；而不稳定性斑块炎性细胞较多且质地柔软，新生成的微血管多，容易破裂，进而促进急性脑梗死的病情进展，所以，对斑块稳定性的检测有助于急性脑梗死的预防和治疗。目前，临床常采用彩色多普勒超声检查来判断、评估患者的颈动脉粥样硬化，但该方法对斑块稳定性的诊断较差，因此，探索与颈动脉粥样硬化斑块稳定性相关的指标对急性脑梗死的诊断、治疗及评估具有重要意义。目前关于 、与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的研究较多，但国内尚未有其联合预测颈动脉粥样硬化斑块稳定 性 的 报 道，所 以 本 研 究 检 测 患 者 与 健 康 者 、表达水平波动情况，分析其对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的预测价值。研究表明，可抑制 酶活性，对胰岛素相关通路产生影响，导致胰岛素抵抗，进而引起机体高血糖，形成高胰岛素血症，刺激血管平滑肌增殖，促进动脉粥样硬化斑块形成。本试验中检测研究对象 水平发现，病例组患者血清 表达较对照组增加，且不稳定斑块组血清 表达较稳定斑块组增加，相关性分析的结果表明，与颈动脉粥样硬化斑块稳定性呈正相关，曲线也指出，对颈动脉粥样硬化斑块稳定性均有较好的预测价值。这可能是因为 在肝脏中合成，可以引起肝脏脂肪酸代谢异常，加剧患者胰岛素抵抗，另外 水平升高可引起血管的氧化应激反应，刺激炎性因子的生成及释放，引起血管损伤，促进动脉粥样硬化的发生及发展，这一点在何伟等、张海燕等 的研究中也有提到。是内皮细胞特异性的 ，研究表明，机体 水平降低会损伤血管的完整性，减少新血管生成，改变血管正常形态与功能。还有研究指出，与血管损伤及动脉粥样硬河 北 医 科 大 学 学 报第 卷第期化斑块相关，在凋亡小体内运转，对血管细胞发挥旁分泌作用，刺激血管细胞产生趋化因子基质细胞衍生因子，减少炎性细胞，形成稳定斑块，这表示其具有抗颈动脉粥样硬化作用。研究结果表明，病例组患者血清 表达较对照组降低，不稳定斑块组血清 表达也较稳定斑块组降低，相关性分析指出，与颈动脉粥样硬化斑块稳定性呈负相关，曲线表明，对颈动脉粥样硬化斑块稳定性均有较好的预测价值。这在范翥元等 的研究中也有提到。是去乙酰化酶，可与 、等信号通路中的蛋白相互作用，维持基因组和染色体稳定性，参与神经保护、炎症反应、氧化应激及细胞生物学行为等过程。研究表明 可以抑制低密度脂蛋白受体的水平，降低氧化型低密度脂蛋白摄取，降低 泡 沫 细 胞 数 量，起 到 抗 颈 动 脉 粥 样 硬 化 作用。本研究结果表明，病例组患者血清 表达较对照组降低，不稳定斑块组血清 表达也较稳定斑块组降低，相关性分析指 出，与颈动脉粥样硬化斑块稳定性呈负相关，曲线表明，对颈动脉粥样硬化斑块稳定性均有较好的预测价值。这是因为 可减轻内皮细胞氧化应激反应，促进内皮型合酶表达，保护内皮细胞功能；此外，可催化 去乙酰化，抑制其活性，减少等炎症因子的产生，减轻炎症反应病理损伤，保护内皮细胞，这一观点在唐宇姣等 的研究也有提到。综上所述，急性脑梗死患者血清 表达增加，、表达降低，可能参与急性脑梗死患者颈动脉粥样硬化斑块形成与发展，进而与急性脑梗死的病情进展相关，且 、联合对颈动脉粥样硬化斑块稳定性具有较好预测价值，所以监测急性脑梗死患者 、对急性脑梗死的及时干预与治疗具有重要意义。但本研究也存在一定的局限性，一方面，本研究纳入的病例来源较为单一且数量较少，研究结果缺乏广泛性；另一方面，血清 、水平与急性脑梗死及颈动脉粥样硬化斑块稳定性相关的机制通路尚不明确，所以，还需扩大病例来源，增加病例数进行更深层次地探索。参考文献 ，（）：，（）：陈建玲依达拉奉针联合丁苯肽注射液治疗急性脑梗塞疗效观察数理医药学杂志，（）：，（）：，：，（）：马娜，何慧君，刘远洪，等脑梗死后血管性认知障碍病人血清 、颈动脉狭窄程度与认知功能的关系探讨 中西医结合心脑血管病杂志，（）：胡占斌，曹丹丹，李豪威 、和 在急性脑梗死中的表达及临床意义分子诊断与治疗杂志，（）：，王放，涂祎敏，刘晓飞，等急性冠脉综合征患者血清 与冠脉病变相关中华急诊医学杂志，（）：中华医学会神经病学分会，中华医学会神经病学分会脑血管病学组中国急性缺血性脑卒中诊治指南 中华神经科杂志，（）：张增平，王伟佳，孔憶娜，等急性脑梗死患者血清脂联素、白细胞介素水平与颈动脉粥样硬化斑块稳定性的相关性徐州医科大学学报，（）：王婷婷，陈娟，周晶，等探讨高分辨率磁共振成像下颈动脉斑块特征与缺血性脑卒中的相关性 世界最新医学信息文摘，（）：王陇德，刘建民，杨弋，等我国脑卒中防治仍面临巨大挑战 中国脑卒中防治报告 概要中国循环杂志，（）：刘福德，王建懿，陈晨，等 早期颈内动脉支架置入对动脉粥样硬化脑梗患者血清 和 水平的影响现代生物医学进展，（）：南嘉格列，侯玉虎，乔志忠，等超声弹性成像与超声造影评估颈动脉斑块稳定性的对比研究 中国现代医药杂志，（）：马娜，何慧君，刘远洪，等 脑梗死后血管性认知障碍病人血清 、颈动脉狭窄程度与认知功能的关系探讨中西医结合心脑血管病杂志